分散固相萃取——氣相色譜法測定五味子中的敵敵畏和甲胺磷的殘留量

劉 平

（丹東市食品藥品檢驗所，遼寧 丹東 110023）

中藥材農(nóng)藥殘留危害身體健康，引起進(jìn)國家的高度重視。五味子是我市主要的地產(chǎn)中藥材之一，每年都有大量的產(chǎn)品出口，可由于沒有建立很好的藥材種植基地和進(jìn)行有效的農(nóng)藥殘留檢測，因此使得五味子的出口受到很大的限制。本文作者要摸索一種簡便快速靈敏的測定方法，建立五味子中的有機(jī)磷農(nóng)藥殘留量測定方法。為藥材出口提供有效的數(shù)據(jù)。查閱相關(guān)文獻(xiàn)[1,2]，發(fā)現(xiàn)提取過程復(fù)雜，即浪費(fèi)時間又浪費(fèi)試藥。經(jīng)過很多實驗，作者最終選用分散固相萃取技術(shù)，運(yùn)用安捷倫Agilent Sampliq QuEChERS 分散固相萃取包來處理樣品，建立了下文中測定五味子中滴滴畏和甲胺磷殘留量方法。實驗過程如下。

1 儀器與試劑

氣相色譜儀6890N 及安捷倫色譜工作站； FPD檢測器 ； 離心機(jī)：Sigma 3-18k型，（德國賽多利斯）； Agilent Sampliq QuEChERS分散固相萃取包；滴滴畏、甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)品：純度均為99.0%（北京陸橋公司）。

2 標(biāo)準(zhǔn)溶液制備

精密稱取滴滴畏、甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)品，共置同一容器中，加二氯甲烷溶解，制成分別含滴滴畏、甲胺磷1μg/mL的溶液。

3 樣品預(yù)處理

取樣品勻漿，精密稱取10.00g，置萃取管中，加入乙腈20.00 mL，振搖提取40s，再加入硫酸鎂氯化鉀萃取試劑包，強(qiáng)力震搖1min，靜置分層，用5mol/L氫氧化鈉試液調(diào)節(jié)pH值為5.0。再振搖1min，靜置，精密量取上清液7mL，置凈化管中，振搖1min。于8000轉(zhuǎn)/min，離心5min。

圖1 敵敵畏、甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液氣相色譜圖tr=2.837min 滴滴畏；tr=3.431min 甲胺磷

4 色譜條件及測定結(jié)果

色譜柱：DB-1701石英毛細(xì)管柱（25m×0.32mm i.d）；載氣：高純氮氣，流速20mL/min； 氫氣流速75mL/min；空氣流速100mL/min；程序升溫：初始溫度120℃，升溫速率10℃/min。最終溫度220℃，進(jìn)樣口溫度250℃；檢測器溫度300℃；進(jìn)樣方式：無分流。 進(jìn)樣量：1μL。滴滴畏、甲胺磷標(biāo)準(zhǔn)溶液以及樣品測定的色譜圖如下（圖1和圖2）。

圖2 被測樣品氣相色譜圖

5 結(jié)果與討論

5.1 樣品預(yù)處理條件的選擇和優(yōu)化

采用分散固相萃取，此為安捷倫公司推出的參照方法之一，作者根據(jù)檢材的特點優(yōu)化前處理步驟，如提取溶劑的的用量等，使樣品處理過程簡化，提高了提取效率。國家標(biāo)準(zhǔn)[1]中有機(jī)磷農(nóng)藥的測定基本上采用丙酮，二氯甲烷提取凈化的方法，浪費(fèi)時間，而且丙酮不易分層，容易導(dǎo)致回收率偏低。

5.2 線性關(guān)系及最低檢出限

精密稱取5份勻漿后空白樣品，每份10g。分別準(zhǔn)確加入標(biāo)準(zhǔn)品溶液0.5 mL、1.0 mL、2.0 mL、4.0 mL、6.0mL，按上述樣品預(yù)處理步驟進(jìn)行提取凈化，取1μL樣品注入氣相色譜儀進(jìn)行測定。結(jié)果見表1。

表1 線性關(guān)系測定結(jié)果

將上面實驗結(jié)果，以濃度為橫坐標(biāo)，以峰面積為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，滴滴畏的回歸方程為：A＝478C＋53.1 r=0.9996。 甲胺磷的回歸方程為：A＝415C+22.8 r=0.9998。當(dāng)信噪比為2時，滴滴畏、甲胺磷的最低檢出量分別為0.1ng、0.1ng。

5.3 精密度試驗

稱取5份樣品，每份10.0g，分別加入滴滴畏、甲胺磷混合標(biāo)準(zhǔn)溶液2.0mL。按樣品預(yù)處理步驟進(jìn)行提取凈化后，取1μL注入氣相色譜儀進(jìn)行測定，結(jié)果為：滴滴畏A平均：559，RSD為3.1%。甲胺磷A平均：439，RSD為4.0%。

5.4 樣品放置穩(wěn)定性試驗

取線性關(guān)系試驗樣品一份，在室溫下放置，分別在1h、2h、4h、6h、8h取樣測定，結(jié)果滴滴畏A平均：為550，RSD為3.0%。甲胺磷A平均為440，RSD為3.0%。

表2 回收率測定結(jié)果

5.5 回收率試驗

分別稱量9份空白樣品，每份10.0g，三份一組，三組各分別準(zhǔn)確加入混合標(biāo)準(zhǔn)液1.0 mL、2.0 mL、3.0mL，按樣品預(yù)處理步驟進(jìn)行提取凈化后，取1μL樣品注入氣相色譜儀進(jìn)行測定，結(jié)果見表2。

回收率實驗結(jié)果顯示：九份樣品的測定結(jié)果均比較好，回收率較穩(wěn)定。

5.6 樣品測定 按上述實驗條件，又測定了4批樣品，結(jié)果樣品中均未檢出滴滴畏和甲胺磷。

5.7 討論

分散固項萃取技術(shù)是近幾年開發(fā)的一種樣品前處理技術(shù)。而應(yīng)用于五味子農(nóng)藥殘留測定是我們實驗室的初步嘗試。采用分散固相萃取進(jìn)行樣品的前處理，簡化了樣品前處理的步驟。而且檢出限低，線性范圍、回收率、精密度等指標(biāo)均滿足農(nóng)殘分析要求。本文對兩種方法的回收率進(jìn)行了比較試驗，結(jié)果非常理想。但原標(biāo)準(zhǔn)由于使液液萃取，處理復(fù)雜而且丙酮分層效果也不理想，常常導(dǎo)致回收率偏低，變異較大。而采用分散固相萃取方法由于簡化了操作步驟，使得回收率穩(wěn)定。分散固相萃取是一種很有應(yīng)用前景的樣品前處理方法，隨著我們的檢驗品種的逐漸增加，將該方法的使用范圍逐步擴(kuò)大。并且在此基礎(chǔ)上不斷摸索出更加優(yōu)化的萃取條件。

[1]農(nóng)藥殘留國家標(biāo)準(zhǔn)匯編[S].北京:中國標(biāo)準(zhǔn)出版社,1999:58.

[2]洪蔚萍,陳枝華,楊忠強(qiáng).氣相色譜法同時檢測蔬菜中多種有機(jī)磷、擬除蟲菊酯類農(nóng)藥的含量[J].色譜,2004,22(3):289.