雷米普利片在健康人體的藥代動(dòng)力學(xué)和相對(duì)生物利用度

陳令允

(江蘇省邳州市人民醫(yī)院,江蘇邳州,221300)

雷米普利早在2000年即被食品及藥物管理局(FDA)批準(zhǔn)應(yīng)用于降低心肌梗死、腦卒中和心血管死亡危險(xiǎn)性[1-2]。隨后,由意大利赫斯特Aventis Pharma公司生產(chǎn),北京安萬(wàn)特(中國(guó))投資有限公司分裝的雷米普利片(商品名:瑞泰)逐漸在國(guó)內(nèi)廣泛應(yīng)用,主要用于治療高血壓和充血性心力衰竭。國(guó)產(chǎn)雷米普利片與瑞泰在藥代動(dòng)力學(xué)上是否具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異,2組藥物是否具有生物等效性,目前報(bào)道較少。本研究選取30例健康的受試者,進(jìn)行了國(guó)產(chǎn)雷米普利片和進(jìn)口雷米普利片的健康人體生物利用度和藥動(dòng)學(xué)研究,評(píng)價(jià)2者是否具有生物等效性,以期為臨床應(yīng)用提供依據(jù),現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取30例經(jīng)過(guò)常規(guī)檢查的健康人,其中男16例,女14例 ,平均年齡(25±4)歲 ,體質(zhì)量(64±11)kg,身高(176±12)cm,血尿常規(guī)正常,無(wú)家族病、精神病史,無(wú)吸煙、嗜酒等不良嗜好,各臟器經(jīng)檢查功能均正常。在受試者簽署知情同意書(shū)和倫理委員會(huì)批準(zhǔn)后,采用數(shù)字隨機(jī)法將30例受試者分為試驗(yàn)組15例和對(duì)照組15例。試驗(yàn)組男8例,女 7例,平均(25±4)歲,體質(zhì)量(63±12)kg,身高(175±11)cm;對(duì)照組男8例,女7例,平均(25±4)歲,體質(zhì)量(65±10)kg,身高(176±13)cm。2組受試者在性別、年齡、體質(zhì)量、身高上的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,具有可比性。

1.2 儀器及試劑

1.2.1 儀器:Surveyor Plus高效液相色譜儀(Thermo,美國(guó),四元梯度泵);Finnigan TSQ Qnant-nffl discovery質(zhì)譜檢測(cè)器;Surveyor溫控生物自動(dòng)進(jìn)樣器;Xcalibur 4液質(zhì)數(shù)據(jù)工作站;AJ-30i高速冷凍離心機(jī)(BECKMAN,美國(guó));超純水儀(Millipore,美國(guó))。

1.2.2 主要試劑:雷米普利和雷米普利拉對(duì)照品(美國(guó)SIGMA公司);馬來(lái)酸依那普利內(nèi)標(biāo)(美國(guó)SIGMA公司);雷米普利片(商品名:瑞泰,賽諾菲安萬(wàn)特北京制藥有限公司生產(chǎn));雷米普利片(商品名:瑞素坦,昆山龍燈瑞迪制藥有限公司生產(chǎn));乙腈、甲醇色譜純?cè)噭?美國(guó)SIGMA公司);其他試劑均為分析純?cè)噭?國(guó)藥試劑有限公司);水為超純水儀自制純化水。

1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)溶液及內(nèi)標(biāo)液的配制:雷米普利標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制:精密稱(chēng)定10.00 mg雷米普利于100 mL容量瓶中,加甲醇溶解并定容至刻度,即得濃度為100 mg/L的雷米普利母液,4℃保存。應(yīng)用時(shí),分別精密量取雷米普利母液 0.02、0.05、0.1、0.2 、0.5 、1.0、2.0 mL 于 10 mL 容量瓶中,用流動(dòng)相定容至刻度,即得濃度分別為0.20、0.50、1.00、2.00、5.00、10.00 和 20.00 mg/L 雷米普利系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。雷米普利拉標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法與之相同。

馬來(lái)酸依那普利內(nèi)標(biāo)液:精密稱(chēng)取馬來(lái)酸依那普利20 mg于20 mL容量瓶中,加甲醇溶劑并定容至刻度,即得1 g/L馬來(lái)酸依那普利母液,4℃保存。應(yīng)用時(shí),精密量取0.1 mL于10 mL容量瓶中,用甲醇定容至刻度,即得濃度為10 mg/L的馬來(lái)酸依那普利內(nèi)標(biāo)溶液。

1.3 方法

1.3.1 試驗(yàn)方案:30例受試者隨機(jī)分為試驗(yàn)組15例和對(duì)照組15例,試驗(yàn)組服用國(guó)產(chǎn)雷米普利片,對(duì)照組服用進(jìn)口分裝雷米普利片。試驗(yàn)采用雙周期,時(shí)間間隔為2周,10 mg/次。所有受試者試驗(yàn)前1天均須禁食12 h,并分別于試驗(yàn)當(dāng)日早晨8︰00用200 mL溫水按劑量口服雷米普利片。用藥2 h后飲定量水,4 h后統(tǒng)一定量進(jìn)食午餐,午餐為低脂食品。受試者于服藥前后0.25、0.5、0.75、1.0、1.5、2.0 、3.0 、4.0 、6.0 、8.0 、10.0、12.0、24.0 、36.0、48.0 和 72.0 h 分別抽取上肢前臂靜脈血3.0mL,轉(zhuǎn)移進(jìn)入已加入肝素的5 mL離心管中,4℃低溫離心制備血漿后貯存于-80℃冰箱中備后續(xù)試驗(yàn)用。2周后重復(fù)上述試驗(yàn)。服藥及抽血前后避免劇烈活動(dòng)或久臥床。試驗(yàn)期間,觀察檢測(cè)受試者生理指標(biāo)及不良反應(yīng)情況。

1.3.2 數(shù)據(jù)分析:Tmax、Cmax均用實(shí)測(cè)值;AUC0※t以梯形面積法求得(AUC0※∞=AUC0※t+Ct/λz);相對(duì)生物利用度 F%=[AUC0※t(T)/AUC0※t(R)]×100%。將AUC0※t、AUC0※∞和 C max等藥動(dòng)學(xué)參數(shù)進(jìn)行對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換。

2 結(jié) 果

2.1 色譜專(zhuān)屬性

將空白血漿、加內(nèi)標(biāo)馬來(lái)酸依那普利血漿、加對(duì)照雷米普利血漿、加對(duì)照雷米普利拉血漿、受試者血漿制備后樣品色譜圖進(jìn)行比較后發(fā)現(xiàn)血漿中雷米普利、雷米普利拉、馬來(lái)酸依那普利保留時(shí)間分別為 2.05 min、2.25 min和 1.95 min,峰形較對(duì)稱(chēng),無(wú)內(nèi)源性雜質(zhì)峰干擾。說(shuō)明在該色譜條件下,專(zhuān)屬性較好。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的制備

按照雷米普利標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法用移液器精密量取雷米普利系列標(biāo)準(zhǔn)溶液50 μ L置于1 mL離心管中,每管加入空白血漿450 μ L,配成質(zhì)量濃度相當(dāng)于20.0 、50.0 、100.0、200.0 、500.0、1000.0、2000.0 μ g/L 的血漿樣本,按血漿處理方法處理后進(jìn)行平行處理并進(jìn)樣分析。同樣方法得到雷米普利拉標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)樣本。以雷米普利色譜峰面積(As)與內(nèi)標(biāo)色譜峰面積(Ai)峰面積之比Y(Y=As/Ai)對(duì)質(zhì)量濃度(C,μ g/L)進(jìn)行回歸得到方程:C=0.206Y+0.009,r=0.9997。雷米普利血漿線(xiàn)性范圍是0.100～100.1 ng/mL,定量下限為0.05 ng/mL(S/N≥3)。以雷米普利拉色譜峰面積(As)與內(nèi)標(biāo)色譜峰面積(Ai)峰面積之比 Y(Y=As/Ai)對(duì)質(zhì)量濃度(C,μ g/L)進(jìn)行回歸得到方程:C=0.026Y-0.008,r=0.9998。雷米普利拉血漿線(xiàn)性范圍是0.106～100.6 ng/mL,定量下限為0.10 ng/mL(S/N≥3)。

2.3 回收率和精確度試驗(yàn)

按雷米普利標(biāo)準(zhǔn)溶液配制方法分別配制低(50.00 μ g/L)、中(200.0 μ g/L)、高(1000.0 μ g/L)3種濃度的血漿標(biāo)準(zhǔn)樣品(N=50),按血漿處理方法處理樣本后進(jìn)行平行處理分析,計(jì)算相對(duì)回收率和提取回收率。新制備的樣品每天進(jìn)樣測(cè)定5次并重復(fù)測(cè)定5 d,分別考察本實(shí)驗(yàn)方法的同一天內(nèi)以及不同天數(shù)之間的精密度。同樣方法得到雷米普利拉回收率和精密度檢測(cè)結(jié)果。結(jié)果表明血樣中雷米普利和雷米普利拉的相對(duì)回收率為均>90%,日內(nèi)、日間精密度<9%,符合生物樣品分析要求。

2.4 樣品穩(wěn)定性試驗(yàn)

分別配制低(50.00μ g/L)、中(200.0μ g/L)、高(1000.0 μ g/L)的血漿標(biāo)準(zhǔn)樣品各12份并分為3組。第1組室溫存放4 h后檢測(cè);第2組制備后樣本即刻凍存于-80℃凍存15 d后檢測(cè);第3組即刻凍存7 d,取出樣本融化后再次凍存7 d后檢測(cè)。求得經(jīng)反復(fù)凍融后樣本各個(gè)濃度回收率為90.3%～96.7%,表明樣品在上述條件下穩(wěn)定。

2.5 藥代動(dòng)力學(xué)及生物利用度分析

對(duì)照組和試驗(yàn)組共30例健康受試者單劑量口服國(guó)產(chǎn)和進(jìn)口雷米普利片雙周期后的主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù),見(jiàn)表1。國(guó)產(chǎn)與進(jìn)口制劑藥物間均無(wú)顯著性差異(P>0.05)。國(guó)產(chǎn)制劑的平均相對(duì)生物利用度雷米普利為(104.77±21.63)%,雷米普利拉為(102.57±22.54)%。

表1 2組主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)比較(,n=5)

表1 2組主要藥動(dòng)學(xué)參數(shù)比較(,n=5)

與對(duì)照組比較,＊＊P<0.01。

參數(shù) 雷米普利實(shí)驗(yàn)組 對(duì)照組雷米普利拉實(shí)驗(yàn)組 對(duì)照組血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)下面積 AUC0-t/μ g·(L·h)-1 42.91±11.43 43.16±11.34 343.65±61.58 353.63±65.57血藥濃度-時(shí)間曲線(xiàn)下面積 AUC0-∞/μ g·(L·h)-1 43.01±11.13 43.06±10.50 345.67±73.55 363.60±91.86血藥峰濃度 Cmax/μ g·L-1 40.61±14.21 42.32±14.50 43.82±11.53 45.78±12.57血藥濃度達(dá)峰時(shí)間Tmax/h 0.62±0.15 0.67±0.05 2.93±1.75 3.02±1.54終末半衰期t1/2/h 2.66±1.55 2.32±1.58 18.16± 6.85 19.01± 7.58

3 討 論

雷米普利化學(xué)名為N-[1(S)-乙氧羰基-3-苯丙基]-(S)-丙氨?；?順橋-2-氮雜二環(huán)[3,3,0]辛烷-3(S)-羧酸,由德國(guó)赫斯特公司1989年研制開(kāi)發(fā)上市。雷米普利為一種新型的非巰基血管緊張素轉(zhuǎn)換酶(ACE)抑制劑的前體藥物,人體吸收后水解成雷米普利拉而起作用。它能抑制ACE和持續(xù)減少血管緊張素Ⅱ直接或間接地?cái)U(kuò)張外周血管作用,降低血管的阻力[3-4]。2000年FDA批準(zhǔn)雷米普利用于降低心肌梗死、腦卒中和心血管死亡危險(xiǎn)性,這標(biāo)志著雷米普利是第一個(gè)也是唯一的一個(gè)正式擁有此項(xiàng)適應(yīng)證的ACE抑制劑類(lèi)藥物[5-6]。

本研究采用LC-MS/MS法測(cè)定雷米普利和雷米普利拉的血漿濃度,與文獻(xiàn)報(bào)道方法相比,其分析周期短、成本低、靈敏度高,能達(dá)到良好的分離效果,血漿中內(nèi)源性雜質(zhì)對(duì)雷米普利、雷米普利拉及內(nèi)標(biāo)的測(cè)定均無(wú)干擾,適合于藥動(dòng)學(xué)和生物利用度研究。

對(duì)雷米普利和活性代謝產(chǎn)物雷米普利拉的藥動(dòng)學(xué)研究表明,雷米普利片口服后吸收較為迅速,平均(0.62±0.15)h血藥濃度達(dá)峰值,其活性代謝產(chǎn)物雷米普利拉的達(dá)峰時(shí)間(2.93±1.75)h。由于雷米普利是前藥,治療高血壓和心力衰竭作用主要是通過(guò)其活性代謝產(chǎn)物雷米普利拉發(fā)生的,故建議臨床使用該類(lèi)藥物時(shí),應(yīng)根據(jù)患者的具體情況調(diào)整給藥劑量,以保障臨床用藥的安全性和有效性。

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