金蒿抗流感滴丸制備工藝及其含量測(cè)定＊

薛桂蓬，顧政一，張潔，邢建國(guó)，王云飛，于寧

(新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所，新疆烏魯木齊830004)

金蒿抗流感滴丸制備工藝及其含量測(cè)定＊

薛桂蓬，顧政一，張潔，邢建國(guó)，王云飛，于寧

(新疆維吾爾自治區(qū)藥物研究所，新疆烏魯木齊830004)

目的研究金蒿滴丸的最佳制備工藝及含量測(cè)定方法。方法采用單因素及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)，以滴丸的圓整度、硬度、溶散時(shí)限、丸重差異為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選滴丸成型的藥液溫度、滴速、滴距等工藝條件;采用高效液相色譜法測(cè)定滴丸中一枝蒿酮酸的含量。結(jié)果確定最優(yōu)滴丸成型工藝為藥粉與PEG4000配比1∶2，藥液溫度85℃，滴速40滴/min，滴距8 cm;一枝蒿酮酸質(zhì)量濃度在9;72～77;76 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，r=0;999 3，平均加樣回收率為99;10%，RSD為0;56%(n=9)。結(jié)論優(yōu)選的滴丸制備工藝穩(wěn)定，含量測(cè)定方法準(zhǔn)確簡(jiǎn)便。

金蒿滴丸;制備工藝;聚乙二醇;正交試驗(yàn);一枝蒿酮酸

金蒿抗流感滴丸由新疆一枝蒿Artemsia rupestris L;和貫葉金絲桃pencum perforatum兩味藥組方，具有解毒、抗過(guò)敏、抗菌、抗病毒等功效。筆者將兩味藥材經(jīng)過(guò)大孔吸附樹脂純化后，濃縮干燥成干浸膏粉，然后加入聚乙二醇4000制備成滴丸。滴丸劑具有生產(chǎn)周期短、溶出快、生物利用度高等特點(diǎn)。本試驗(yàn)中采用單因素及正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)對(duì)其成型工藝進(jìn)行研究［1-2］，并對(duì)滴丸中一枝蒿酮酸的含量進(jìn)行了測(cè)定，報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

DWJ-2000S型自動(dòng)滴丸機(jī)(煙臺(tái)百藥泰中藥科技發(fā)展有限公司);ZB-1C型智能崩解儀(天津大學(xué)精密儀器廠);LibrorAEG-200型電子天平電子恒溫水浴鍋(北京永光明醫(yī)療器械廠)。金蒿滴丸提取物(新疆藥物研究所自制，批號(hào)為080701);一枝蒿酮酸對(duì)照品(中國(guó)科學(xué)院新疆理化技術(shù)研究所制，批號(hào)為070401);聚乙二醇4000、聚乙二醇6000(PEG4000，PEG6000，北京海淀會(huì)友精細(xì)化工有限公司，批號(hào)分別為070110，070228);液體石蠟(北京海淀會(huì)友精細(xì)化工有限公司，批號(hào)為071124);二甲基硅油100(天津大茂化學(xué)試劑廠)。

2 方法與結(jié)果

2．1 制備方法

按處方比例稱取藥粉(100目)與基質(zhì)(PEG4000或PEG 6000)適量，混勻，置燒杯中水浴加熱，并不斷攪拌使熔融，然后將藥液加入滴灌，保溫10 min。待冷凝溫度、藥液溫度等達(dá)到要求時(shí)，進(jìn)行滴制。用濾紙吸去丸表面的冷卻液，即得金蒿抗流感滴丸。

2．2 基質(zhì)種類及藥物與基質(zhì)配比考察[3]

采用不同的基質(zhì)與藥粉配比(2∶1)，制備滴丸，以滴制情況、硬度、圓整度、溶散時(shí)限為評(píng)價(jià)指標(biāo)，考察基質(zhì)種類。結(jié)果見表1?？梢?，采用PEG4000物料的流動(dòng)性要比用PEG6000的流動(dòng)性要好，滴制較容易。因此基質(zhì)種類選擇PEG4000。在此基礎(chǔ)上進(jìn)一步對(duì)藥物與基質(zhì)的配比進(jìn)行篩選。結(jié)果見表2?？梢?，當(dāng)藥液與基質(zhì)配比為1∶2和1∶2;5時(shí)，均較易滴制，從減少服用量和節(jié)約成本的角度考慮，選用藥物與基質(zhì)配比為1∶2。

表1 不同基質(zhì)與藥物配比對(duì)滴丸成型的影響

表2 藥物與基質(zhì)不同配比對(duì)滴丸成型的影響

2．3 正交試驗(yàn)[4]

通過(guò)上述試驗(yàn)，確定了藥粉∶PEG4000為1∶2，在此基礎(chǔ)上，對(duì)影響滴丸成型的料液溫度(因素A)、滴速(因素B)和滴距(因素C)3個(gè)因素安排正交試驗(yàn)，每個(gè)因素選取3個(gè)水平，以丸重變異系數(shù)［2005年版《中國(guó)藥典(一部)》附錄ⅠK滴丸劑項(xiàng)下重量差異檢查法檢查］和外觀質(zhì)量(大小均勻，色澤一致，圓整。丸與丸之間不粘連，常溫下不軟化，滿分為10分)為評(píng)價(jià)指標(biāo)，優(yōu)選最佳工藝條件。因素水平見表3。按照表3所列的因素水平進(jìn)行正交試驗(yàn)安排，選擇L9(34)正交試驗(yàn)表，結(jié)果見表4。方差分析結(jié)果見表5和表6。

表3 因素水平表

表4 正交試驗(yàn)表L9(34)

表5 丸重變異系數(shù)方差分析表

表6 外觀質(zhì)量方差分析表

由直觀分析可知，影響丸重變異系數(shù)效果的因素順序?yàn)锳＞B=C，以藥液溫度影響最大，由于丸重變異系數(shù)越小越好，故結(jié)果為A2B2C2。經(jīng)方差分析可知，藥液溫度對(duì)丸重變異系數(shù)有顯著性影響，滴速和滴距無(wú)顯著性差異，故選擇A2B1C1;影響丸外觀質(zhì)量的因素順序?yàn)锳＞B＞C，以藥液溫度影響最大，結(jié)果A2B3C3。經(jīng)方差分析知，藥液溫度對(duì)外觀質(zhì)量有顯著性影響，滴速和滴距無(wú)顯著性差異，故選擇A2B1C1。確定最優(yōu)滴丸成型工藝為藥粉與PEG4000配比1∶2，藥液溫度85℃，滴速40滴/min，滴距8 cm。

2．4 驗(yàn)證試驗(yàn)

按照優(yōu)選出的工藝條件，進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，所得的滴丸圓整度好，溶散時(shí)限和丸重差異符合［2005年版《中國(guó)藥典(一部)》附錄ⅠK］滴丸劑項(xiàng)下規(guī)定。驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果見表7。

表7 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果表

2．5 滴丸含量測(cè)定[5－6]

2;5;1 色譜條件

色譜柱:Shimpack C18柱(250 mm×4;6 mm，5 μm);流動(dòng)相:甲醇-0;4%磷酸(50∶50);檢測(cè)波長(zhǎng):241 nm;柱溫:35℃;流速: 1;0 μg/mL;進(jìn)樣量:10 μL。

2;5;2 溶液制備

用減重法精密稱取一枝蒿酮酸對(duì)照品4;86 mg，置25 mL量瓶中，用甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，即制得一枝蒿酮酸對(duì)照品貯備液(194;4 μg/mL)。取本品20丸，精密稱定，研細(xì)，取0;2 g，置25 mL量瓶中，無(wú)水乙醇稀釋至刻度，超聲處理20 min，濾過(guò)，濾液作為供試品溶液。

2;5;3 方法學(xué)考察

標(biāo)準(zhǔn)曲線制備:精密吸取對(duì)照品貯備液(194;4 μg/mL)0;5，1;0，1;5，2;0，4;0 mL，置10 mL量瓶中，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，制成含一枝蒿酮酸為9;72，19;44，29;16，38;88，77;76 μg/mL的對(duì)照品溶液。從中分別精密吸取10 μL，注入液相色譜儀，記錄峰面積，以進(jìn)樣質(zhì)量濃度C(μg/mL)為橫坐標(biāo)、峰面積A為縱坐標(biāo)進(jìn)行線性回歸，得標(biāo)準(zhǔn)曲線方程A=30 125 C+28 541，r=0;999 3(n=5)。結(jié)果表明，一枝蒿酮酸質(zhì)量濃度在9;72～77;76 μg/mL范圍內(nèi)與峰面積具有良好線性關(guān)系。

精密度試驗(yàn):取同一份對(duì)照品溶液，重復(fù)進(jìn)樣6次。結(jié)果的RSD為0;63%(n=6)。

重復(fù)性試驗(yàn):取同一批樣品6份，依法制備供試品溶液并測(cè)定峰面積，計(jì)算一枝蒿酮酸的含量。結(jié)果的RSD為1;51%(n=6)。

加樣回收試驗(yàn):精密稱取已知一枝蒿酮酸含量的樣品粉末10份，第1份為空白，其余分3組，每組3份，精密加入一定量一枝蒿酮酸對(duì)照品，制成高、中、低3種質(zhì)量濃度，依法制備供試品溶液，測(cè)定峰面積，計(jì)算回收率。結(jié)果一枝蒿酮酸的平均加樣回收率為98;98%，RSD為1;11%(n=9)。

3 討論

采用可量化指標(biāo)的丸重變異系數(shù)，以及對(duì)包括滴制圓整度、硬度、拖尾在內(nèi)的外觀質(zhì)量來(lái)評(píng)定工藝的優(yōu)劣，結(jié)果更可靠、合理。

預(yù)試驗(yàn)中，曾先后比較了甲醇-水、甲醇-磷酸系統(tǒng)對(duì)一枝蒿酮酸分離度及含量高低的影響，結(jié)果表明在甲醇-水系統(tǒng)下一枝蒿酮酸分離不是很理想(峰形不好、分離度較差且耗時(shí)太長(zhǎng))。因此最終確定了在甲醇-0;4%磷酸(50∶50)的流動(dòng)相條件下測(cè)定一枝蒿酮酸，取得了較好效果;檢測(cè)波長(zhǎng)是根據(jù)一枝蒿酮酸的紫外最大吸收光譜來(lái)設(shè)定的，λmax=241 nm時(shí)，能夠保證一枝蒿酮酸含量測(cè)定的靈敏度，結(jié)果精密度、重復(fù)性和回收率均較好，可以很好地控制其質(zhì)量。

本試驗(yàn)中篩選出的抗流感金蒿滴丸工藝簡(jiǎn)便、可行，評(píng)價(jià)指標(biāo)可靠、合理，符合2005年版《中國(guó)藥典》對(duì)滴丸制劑的要求。

［1］國(guó)家藥典委員會(huì);中華人民共和國(guó)藥典(一部)［M］;北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2005:附錄10;

［2］王顯輝，馬文學(xué)，喬俊纏，等;線葉菊黃酮滴丸制劑工藝研究［J］;中國(guó)名族醫(yī)藥雜志，2011，17(2):73-75;

［3］李楊秋，崔升淼，邢占磊;穿心蓮內(nèi)酯滴丸的制備工藝研究［J］;時(shí)珍國(guó)醫(yī)國(guó)藥，2010，21(9):2 381-2 383;

［4］譚桂蓮，武佳;槐米滴丸制備工藝及其含量測(cè)定［J］;中國(guó)試驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2011，17(5):49-51;

［5］劉明華;RP-HPLC測(cè)定愈風(fēng)寧心滴丸中葛根素的含量［J］;中國(guó)中醫(yī)藥咨訊報(bào)，2010，2(12):176-177;

［6］賈獻(xiàn)慧，劉漢清;薊貞滴丸的制備及溶出度研究［J］;時(shí)珍國(guó)醫(yī)藥，2008，19(2):471-472;

Preparation and Determination of Jinhao Drop Pills

Xue Guipeng，Gu Zhengyi，Zhang Jie，Xing Jianguo，Wang Yunfei，Yu Ning
(Xinjiang Uygur Autonomous Region Institute of Meteria Medica，Urumqi，Xinjiang，China830004)

ObjectiveTo study the preparation of Jinhao Drop Pills and establish the content determination method;MethodsSingle experiment and orthogonal design were used to optimize the temperature of drug，drop distance and drop rate;The hardness，weight variation，resolving time and grain roundness were used as criteria for evaluation;The orthogonal experiment was used to determine the optimum preparation according to the hardness of drop pills，appearance and weight variation;HPLC was used to determinate the concentrition of rupestric acid;ResultsThe optimum preparation condition was PEG4000-drug 2∶1，the temperature of drug was 85℃，drop rate was 40 drops/min，the drop distance was 8 cm;The linear relationship of rupestric acid was found in the range of 9;72-77;76 μg/mL(r=0;999 3)and the average recovery was 99;10%(RSD=0;56%);ConclusionThis process is feasible;The methord is accurate and simple;

Jinhao Drop Pills;preparation;PEG;orthogonal experiment;rupestric acid

TQ461;R284．2;R286

A

1006-4931(2012)13-0039-03

薛桂蓬(1978-)，女，大學(xué)本科，助理研究員，主要從事中藥新型給藥系統(tǒng)與中藥新藥研究工作，(電話)0991-2318172(電子信箱)667889116xue@163;com。

2011-08-09)

＊新疆維吾爾自治區(qū)科技支疆項(xiàng)目，項(xiàng)目編號(hào):200991134。