正交試驗優(yōu)選膚寧洗劑提取工藝Δ

黃慧，顧衛(wèi)，黃麗雅，翁雪萍（.惠州市中醫(yī)醫(yī)院，廣東惠州5600；.惠州市藥品檢驗所，廣東惠州56003）

正交試驗優(yōu)選膚寧洗劑提取工藝Δ

黃慧1＊，顧衛(wèi)1#，黃麗雅1，翁雪萍2（1.惠州市中醫(yī)醫(yī)院，廣東惠州516001；2.惠州市藥品檢驗所，廣東惠州516003）

目的：優(yōu)選膚寧洗劑的提取工藝。方法：采用水提醇沉法提取，以苦參堿含量為評價指標，以加水量、提取時間、提取次數(shù)、醇沉溶液的pH值為考察因素，采用正交試驗優(yōu)選工藝。結(jié)果：最佳提取工藝為藥材加8倍量水，提取3次，每次提取3 h，醇沉溶液pH值為9.5。結(jié)論：所選工藝簡便、穩(wěn)定，可用于膚寧洗劑的提取。

膚寧洗劑；正交試驗；苦參堿；提取工藝

膚寧洗劑是惠州市中醫(yī)醫(yī)院應用多年的協(xié)定方，由苦參、川椒、百部、白鮮皮等藥味組成，具有清熱解毒、止癢消腫、祛濕殺蟲的功效，用于治療急性皮炎、濕疹等皮膚病。方中苦參主要有效成分為生物堿，具有清熱燥濕、殺蟲等功效，其在中樞神經(jīng)系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等方面都有重要的藥理活性[1]。故筆者選取苦參中苦參堿含量為指標優(yōu)選膚寧洗劑的提取工藝。

1 儀器與試藥

LH-08 B臺式連續(xù)投料中藥粉碎機（新昌縣城關(guān)紅利數(shù)據(jù)制造廠）；AUY-220精密電子天平（廣州儀通興儀表有限公司）；UV1102紫外-可見分光光度計（上海天美科學儀器有限公司）；KQ-500 DB數(shù)控超聲波清洗儀（上海市超聲儀器有限公司，功率：500 W，頻率：50 kHz）。

處方中所有藥材均購于惠州九惠藥業(yè)有限責任公司，經(jīng)惠州市中醫(yī)醫(yī)院主任中藥師顧衛(wèi)鑒定為真品?？鄥A對照品（中國食品藥品檢定研究院，批號：110805-2005508）；水為純化水，其他試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 苦參堿含量測定

2.1.1 對照品溶液的制備精密稱取苦參堿對照品12.5 mg，置10 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，取1 mL轉(zhuǎn)移至25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻，制成每1 mL含0.05 mg的苦參堿對照品溶液。

2.1.2 供試品溶液的制備精密量取膚寧洗劑10mL，置于Δ惠州市科技計劃（醫(yī)療衛(wèi)生）項目（2011 Y066）

＊主管中藥師。研究方向：中藥學。電話：0752-2189809。E-mail：24176741@qq.com

#通訊作者：主任中藥師。研究方向：中藥學。E-mail：hz_zyyyp@ 126.com 100 mL具塞三角瓶中，加水80 mL，超聲30 min，濾過，濾液置100 mL量瓶中，氨水調(diào)pH值為9.0，加水至刻度，搖勻。精密吸取上述溶液3 mL，置10 mL量瓶中，加水定容，搖勻，即得。2.1.3線性關(guān)系考察分別量取苦參堿對照品溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL，置分液漏斗中，加入pH7.8的緩沖液（NH3·H2O與NH4Cl的混合溶劑）10 mL，加入環(huán)己烷10 mL和0.05%溴麝香草酚藍溶液1.0 mL，振搖5 min，靜置分層，取環(huán)己烷層，在413 nm波長處測定吸光度（A）。以苦參堿檢測濃度（c）為橫坐標，A為縱坐標，繪制標準曲線，得苦參堿的回歸方程為A＝177.5 c+0.1663（r＝0.9994）。結(jié)果表明，苦參堿檢測濃度在1.0～5.2 mg·L－1范圍內(nèi)與吸光度呈良好線性關(guān)系。

2.1.4 精密度試驗精密移取對照品溶液1 mL，按“2.1.3”項下方法測定吸光度，連續(xù)測定6次。結(jié)果，RSD＝1.4%（n＝6），表明儀器精密度良好。

2.1.5 加樣回收率試驗精密量取已知含量（苦參堿含量：5.213 mg·mL－1）的樣品1 mL，共9份，分別加入苦參堿對照品5.210 mg，按“2.1.2”項下方法制備供試品溶液，按“2.1.3”項下方法測定吸光度，并計算加樣回收率。結(jié)果，平均回收率為99.5%，RSD＝2.3%（n＝9）。

2.2 正交試驗優(yōu)選提取工藝

2.2.1 試驗設(shè)計根據(jù)筆者經(jīng)驗和預試驗，選取對提取工藝影響較大的加水量（A）、提取時間（B）、提取次數(shù)（C）、醇沉溶液的pH值（D）為考察因素，每個因素設(shè)3個水平，按L9（34）正交表進行試驗。因素水平見表1。

2.2.2 試驗結(jié)果按處方比例稱取各種藥材9份，每份50 g，按表1中因素水平進行試驗[2]。按“2.1”項下方法測定苦參堿含量，以此為評價指標優(yōu)選工藝。正交試驗結(jié)果見表2；方差分析結(jié)果見表3。

表1 因素水平Tab 1Factors and levels

表2 正交試驗結(jié)果Tab 2 Results of orthogonal test

由表2、表3可知，各因素影響提取工藝的主次順序為提取次數(shù)＞提取時間＞醇沉溶液的pH值＞加水量，且提取時間、提取次數(shù)對工藝有顯著性影響（P＜0.05）。最佳工藝為藥材加8倍量水，提取時間3 h，提取3次，醇沉溶液pH值為9.5。

表3 方差分析結(jié)果Tab 3Results of analysis of variance

2.3 工藝驗證試驗

按處方比例稱取各藥材適量，共50 g，按上述最佳工藝提取3次，并測定提取液中苦參堿含量。結(jié)果，3次提取的苦參堿含量分別為5.427、5.418、5.421 mg·g－1，與正交試驗中苦參堿含量最高值相當，說明該工藝穩(wěn)定、可行。

3 討論

考慮到基層醫(yī)院的條件，本試驗選用煎煮法提取生物堿；常用的溶劑有水、酸水、堿水、有機溶劑等，而根據(jù)參考文獻[3]，筆者選用水為溶劑提取苦參中苦參堿，此法操作簡便，成本較低，也比較適合洗劑的特點。

[1]吳智慧，黃繩武，胡錫波.苦參生物堿的藥理研究進展[J].中南藥學，2006，4（5）：380.

[2]李巧如，王娥珍，張鵬，等.正交試驗優(yōu)選泌尿?qū)庮w粒提取工藝[J].中國藥房，2008，19（6）：426.

[3]王英姿，韓春超，孫秀梅.苦參5種提取方法的比較研究

[J].山東中醫(yī)藥大學學報，2011，35（6）：543

Optimization of the Extraction Technology of Funing Lotion

HUANG Hui，GU Wei，HUANG Li-ya（Huizhou Municipal Hospital of Traditional Chinese Medicine，Guangdong Huizhou 516001，China）
WENG Xue-ping（Huizhou Institute for Drug Control，Guangdong Huizhou 516003，China）

OBJECTIVE：To optimize the extraction technology of Funing lotion.METHODS：Water extraction and alcohol precipitation was adopted.The extraction technology was optimized by orthogonal design with water added，extraction time，extraction times and pH value of precipitating solution as factors using the content of matrine as index.RESULTS：The best extraction technology was 8times water，extracting for 3times，lasting for 3h each time，pH value of precipitating solution of 9.5.CONCLUSION：The optimized process is simple and stable for the extraction of Funing lotion.

Funing lotion；Orthogonal test；Matrine；Extraction technology

R284.2；R283.6

A

1001-0408（2012）27-2522-02

2012-03-05

2012-04-17）

DOI10.6039/j.issn.1001-0408.2012.27.09