肝復(fù)康膠囊對(duì)氨基半乳糖所致小鼠肝損傷的療效研究

劉彥雙，楊貴真

（河北醫(yī)科大學(xué)，河北 石家莊 050200）

肝復(fù)康膠囊對(duì)氨基半乳糖所致小鼠肝損傷的療效研究

劉彥雙，楊貴真

（河北醫(yī)科大學(xué)，河北 石家莊 050200）

目的 探討肝復(fù)康膠囊對(duì)氨基半乳糖所致小鼠肝損傷的療效。方法 將肝復(fù)康膠囊灌胃給予，腹腔注射氨基半乳糖致小鼠肝損傷。用半自動(dòng)生化分析儀測(cè)小鼠血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）活性，取小鼠肝臟做病理形態(tài)學(xué)觀察。結(jié)果 給予肝復(fù)康膠囊（0.9、1.8、3.6 g/kg·d）可顯著降低氨基半乳糖肝損傷小鼠血清ALT和AST活性，并使肝病理損傷有不同程度減輕。結(jié)論 肝復(fù)康膠囊對(duì)小鼠急性肝損傷有明顯治療作用。

肝復(fù)康膠囊；氨基半乳糖；肝損傷

肝復(fù)康膠囊是復(fù)方中草藥制劑，主要由當(dāng)歸、鱉甲、白芍、三七、厚樸、茵陳、豬苓等中草藥組成，具有活血化淤、清熱利濕、扶正祛邪和滋養(yǎng)肝腎之功效。為進(jìn)一步了解肝復(fù)康膠囊的藥理作用和臨床應(yīng)用價(jià)值，我們應(yīng)用氨基半乳糖所致急性肝損傷的動(dòng)物模型，研究本品的護(hù)肝作用。

1 材料

1.1 藥品

肝復(fù)康膠囊，70毫克/粒，由河北醫(yī)科大學(xué)科技總公司提供。聯(lián)苯雙酯滴丸，由北京協(xié)和藥廠生產(chǎn)，1.5毫克/粒。

1.2 動(dòng)物

昆明小鼠60只，雌雄各半，體重18～22 g，由河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供。

1.3 試劑

氨基半乳糖用生理鹽水配成10%溶液。丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（ALT）試劑盒和天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（AST）試劑盒，由石家莊試劑廠生產(chǎn)。

1.4 儀器

可見／紫外分光光度儀，半自動(dòng)生化分析儀，恒溫水浴箱。

2 方法

2.1 氨基半乳糖肝損傷動(dòng)物模型的制備[1，2]

取昆明小鼠60只，隨機(jī)分成空白對(duì)照組、氨基半乳糖肝損傷模型組（簡稱模型組）、肝復(fù)康膠囊3個(gè)劑量組（0.9、1.8、3.6 g/kg·d）、陽性對(duì)照藥聯(lián)苯雙酯組（200 mg/kg·d），每組 10 只。聯(lián)苯雙酯組及肝復(fù)康膠囊3個(gè)劑量組每天灌胃給藥一次，模型組和空白對(duì)照組以等容積自來水灌胃，連續(xù)7天，于末次給藥后1小時(shí)，除空白對(duì)照組外，其余各組均腹腔注射10%氨基半乳糖800 mg/kg（生理鹽水配制），空白對(duì)照組則腹腔注射等量生理鹽水，24小時(shí)后測(cè)定指標(biāo)，摘取眼球取血，分離血清，按試劑盒說明測(cè)定血清ALT和AST活性。采血完畢，斷頭處死小鼠，取肝左葉部位約0.5 cm3固定于Bone氏液中，包埋，修塊，切片，HE染色，做病理形態(tài)學(xué)觀察。小鼠處死前自由飲水，禁食12小時(shí)。

2.2 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用EXCEL軟件處理的兩組間t檢驗(yàn)和方差分析方法。

3 結(jié)果

3.1 病理形態(tài)學(xué)觀察

空白對(duì)照組肝小葉結(jié)構(gòu)清晰，肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)正常，肝細(xì)胞索結(jié)構(gòu)清晰，圍繞中央靜脈呈放射狀排列（見圖1）。模型組可見肝臟正常結(jié)構(gòu)被破壞，肝小葉排列紊亂，肝細(xì)胞邊界不清楚，胞漿疏松，肝竇受壓變窄，肝細(xì)胞大量變性壞死，有氣球樣變或嗜酸性變，匯管區(qū)大量淋巴細(xì)胞浸潤且有大量的膠原纖維增生（見圖2）。肝復(fù)康膠囊大劑量組可見肝小葉結(jié)構(gòu)大致正常，肝細(xì)胞變性壞死情況較輕，與模型組比較肝臟病理改變有顯著改善（見圖3）。

圖1 空白對(duì)照組肝臟病理形態(tài)（HE 染色×160）

圖3 肝復(fù)康膠囊大劑量組肝臟病理形態(tài)（HE染色×160）

3.2 對(duì)血清ALT、AST的影響

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與空白對(duì)照組比較，模型組小鼠的血清ALT和AST活性顯著升高。與模型組比較，肝復(fù)康膠囊3個(gè)劑量組及聯(lián)苯雙酯組小鼠的血清ALT和AST活性均明顯降低（見表1）。

表1 肝復(fù)康膠囊對(duì)氨基半乳糖所致急性肝損傷小鼠血清 ALT、AST 活性的影響（n=10，±s，d）

表1 肝復(fù)康膠囊對(duì)氨基半乳糖所致急性肝損傷小鼠血清 ALT、AST 活性的影響（n=10，±s，d）

注：與模型組比較*P<0.01

劑量（g/kg） ALT（U/L） AST（U/L）空白對(duì)照組模型組聯(lián)苯雙酯組肝復(fù)康膠囊組__0.2 0.9 1.8 3.6 32.1±4.6*195.0±13.2 56.2±6.4*154.8±12.9*140.8±24.1*180.3±15.1*296.4±15.2*367.0±18.2 308.6±17.4*323.2±31.1*320.5±18.4*323.6±16.9*

4 討論

肝損傷是多因素參與的復(fù)雜過程，自由基和脂質(zhì)過氧化反應(yīng)在肝損傷及肝疾病中起十分重要的作用。氨基半乳糖是肝細(xì)胞的磷酸尿嘧啶核苷的干擾劑，進(jìn)入機(jī)體后與磷酸尿苷（UDP）結(jié)合形成UDP-半乳糖胺，致使磷酸尿苷耗竭，從而使依賴其生物合成的核酸、糖蛋白、脂糖等物質(zhì)合成受抑制，限制了細(xì)胞器及酶的生成和補(bǔ)充，細(xì)胞器受損，膜損害，造成肝細(xì)胞變性壞死[3]。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)氨基半乳糖可使小鼠血漿轉(zhuǎn)氨酶活力明顯提高。中醫(yī)認(rèn)為：肝臟疾病毒邪是致病的基本因素，正虛是發(fā)病和邪氣滯留的關(guān)鍵，血淤是病證的主要特點(diǎn)。臨床常見證型是：熱毒熾盛和濕熱熏蒸，氣滯血淤和肝淤氣滯，脾胃不足和肝腎虧虛。治療往往多藥聯(lián)合應(yīng)用。肝復(fù)康膠囊是一種復(fù)方中藥制劑，具有活血化淤，清熱利濕，扶正祛邪之功效。鱉甲既可軟堅(jiān)散結(jié)，又可滋陰潛陽。當(dāng)歸、三七養(yǎng)血活血，行氣祛淤。本實(shí)驗(yàn)同時(shí)證實(shí)聯(lián)苯雙酯有明顯的保肝降酶作用，而肝復(fù)康膠囊具有相似的治療效果，這為肝復(fù)康膠囊的臨床應(yīng)用提供了一定的藥理學(xué)依據(jù)。

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R285.5

B

1671-1246（2012）07-0111-02