• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    UPLC-MS/MS檢測(cè)柑桔不同組織中的檸檬苦素

    2012-10-24 09:02:12李新生吳三橋
    食品工業(yè)科技 2012年14期
    關(guān)鍵詞:苦素柑桔檸檬

    江 海,李新生,*,吳三橋,劉 新,韓 豪,高 玥,彭 浩

    (1.陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院,陜西漢中 723000;2.陜西省資源生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西漢中 723000)

    UPLC-MS/MS檢測(cè)柑桔不同組織中的檸檬苦素

    江 海1,2,李新生1,2,*,吳三橋1,劉 新1,韓 豪1,高 玥1,彭 浩1,2

    (1.陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院,陜西漢中 723000;2.陜西省資源生物重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,陜西漢中 723000)

    目的:檢測(cè)柑桔果皮、果肉、桔絡(luò)以及桔籽中檸檬苦素的含量,分析柑桔加工中苦味物質(zhì)的來源。方法:用UPLC-MS/MS法檢測(cè),色譜柱:waters ACQUITY BEH C18(50mm×2.5mm,1.9μm);流動(dòng)相:A為乙腈,B為純水,采用梯度洗脫:A:10%(0min)-50%(3min)-10%(4min)-10%(5min);流速:0.3mL/min;柱溫:40℃;進(jìn)樣量:5μL;檢測(cè)時(shí)間:5min;正離子模式(ESI+)質(zhì)譜檢測(cè)器:檸檬苦素母離子m/z=471.1,子離子m/z=425.3,m/z=161.1。結(jié)果:在檢測(cè)色譜-質(zhì)譜條件下檸檬苦素檢測(cè)效果良好,柑桔中檸檬苦素含量依次為:桔籽>桔絡(luò)>桔皮>桔肉。結(jié)論:柑桔加工中盡量選用無籽品種,采用手工剝皮,同時(shí)剔除桔絡(luò)能有效地避免產(chǎn)品的苦味。

    UPLC-MS/MS,測(cè)定分析,柑桔,組織,檸檬苦素

    柑桔是世界第一大水果,在全球140個(gè)國家和地區(qū)均有種植,全球柑桔常年總產(chǎn)量為6000~10000萬t,其中柑桔產(chǎn)量居世界前3位的分別為巴西、美國和中國[1-3]。2007年我國柑桔種植面積達(dá)191×104hm2,約占世界柑桔種植總面積的25%,產(chǎn)量達(dá)2059×104t,占世界總產(chǎn)量的17%,我國柑桔種植面積和產(chǎn)量均居世界首位[4]。柑桔是果汁生產(chǎn)的主要原料,柑桔汁產(chǎn)量約占世界果汁總量的67%[5],但我國缺乏柑桔加工優(yōu)勢(shì)企業(yè),柑桔多為鮮食,柑桔加工率不足10%,常有柑桔豐產(chǎn)滯銷現(xiàn)象。柑桔滯銷已成困擾柑桔業(yè)發(fā)展的難題。解決我國柑桔滯銷問題,最可行的辦法就是發(fā)展柑桔深加工。但是,柑桔加工(特別是果汁生產(chǎn))過程中所出現(xiàn)的苦味問題成為制約我國柑桔加工業(yè)發(fā)展的瓶頸。柑桔苦味主要來自檸檬苦素類(Limonins)和柚皮苷類物質(zhì)(Naringin)。檸檬苦素類似物廣泛存在于柑桔屬植物中,其中含量的高低直接影響柑桔的品質(zhì)。柑桔通常鮮食無苦味,但經(jīng)榨汁、殺菌等加工處理后就表現(xiàn)出苦味,這種現(xiàn)象稱之為“延遲苦味”。據(jù)報(bào)道,柑桔汁出現(xiàn)“延遲苦味”的原因主要是在酸性條件和檸檬苦素D環(huán)內(nèi)酯水解酶的催化下,果實(shí)中所存在的非苦味的檸檬苦素A-環(huán)內(nèi)酯轉(zhuǎn)變成了具有強(qiáng)烈苦味的檸檬苦素[6-10]。檸檬苦素含量的高低直接影響柑桔及其產(chǎn)品的品質(zhì),測(cè)定檸檬苦素的含量可用于控制柑桔及其相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量。已報(bào)道的檸檬苦素檢測(cè)方法很多,主要有Davis法、分光光度法、薄層色譜法(TLC)、高效液相色譜法(HPLC)等[11-14],但因檸檬苦素類似物配糖體極性強(qiáng),在提取液中常與許多雜質(zhì)共存,因而對(duì)其檢測(cè)及純化都很困難,多數(shù)檢測(cè)方法效果不佳。這里采用UPLC-MS/MS檢測(cè)了柑桔果皮、果肉、桔絡(luò)以及桔籽不同組織中檸檬苦素的含量,分析柑桔加工中苦味物質(zhì)的來源,旨在為柑桔的深加工提供一些參考。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器

    柑桔樣品 2010年11月采于陜西省城固縣郭家山泛亞柑桔種植基地;桔皮樣品 手工剝皮,經(jīng)烘箱60℃烘干、粉粹,過60目分樣篩,備用;桔籽樣品 從桔子中剔除桔籽,烘箱60℃烘干、粉粹,過60目分樣篩,備用;桔絡(luò)樣品 桔瓤外白色的網(wǎng)狀筋絡(luò)通常被稱之桔絡(luò),手工撕下桔絡(luò),烘箱60℃烘干、粉粹,過60目分樣篩,備用;桔肉樣品 將去皮,去籽,剔除桔絡(luò)的柑桔60℃烘干,粉碎,備用;檸檬苦素 純度99.8%,天津一方科技有限公司;乙腈 色譜純,Burdick and Jackson公司;甲醇、石油醚、丙酮 分析純,天津市登峰化學(xué)試劑廠;超純水 娃哈哈廣元純水公司。

    ACQUITY UPLC型超高效液相色譜、ACQUITY TQD型三重四級(jí)桿質(zhì)譜儀配MassLynxTMMS軟件 美國Waters公司;水浴鍋 北京科偉永興儀器有限公司;SHIMADZU AUW 220D型十萬分之一電子天平、SHIMADZU AUY220型萬分之一電子天平 日本島津公司;SK 1200H型超聲波清洗機(jī) 無錫市興邦基業(yè)電子有限公司;BM 252C型榨汁機(jī) 美的公司。

    1.2 實(shí)驗(yàn)方法

    1.2.1 色譜條件 Waters ACQUITY BEH C18(50mm× 2.5mm,1.9μm),柱溫40℃,流速0.3m L/m in,進(jìn)樣5μL。流動(dòng)相為:水:乙腈梯度洗脫,乙腈梯度為10%(0m in)-50%(3m in)-10%(4m in)-10%(5m in)。

    1.2.2 質(zhì)譜條件 毛細(xì)管電壓3.2kV,錐孔電壓40kV,離子源溫度110℃,脫溶劑氣溫度400℃,錐孔氣流量50L/h,脫溶劑氣流量800L/h。離子化模式為大氣壓電噴霧離子源正離子模式(ESI+),碰撞池電壓(collision V)30V,碰撞氬氣流速0.14m L/m in。采用多反應(yīng)監(jiān)測(cè)(MRM),檸檬苦素母離子m/z=471.1,子離子m/z=425.3、m/z=161.1。

    1.2.3 標(biāo)準(zhǔn)品溶液的制備 精密稱取檸檬苦素標(biāo)準(zhǔn)品2.85mg,用10m L乙腈溶解,超純水定容至25.0m L。制得檸檬苦素114mg/L的標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照母液。

    1.2.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線制備 取檸檬苦素標(biāo)準(zhǔn)母液0.05、0.1、0.5、1.0、2.0m L,用50%的乙腈水溶液定容于10m L容量瓶。得到檸檬苦素0.57、1.14、5.70、11.40、22.80mg/L的標(biāo)準(zhǔn)工作溶液。在儀器設(shè)定的色譜-質(zhì)譜條件下,通過0.22μm濾膜過濾,進(jìn)標(biāo)準(zhǔn)梯度樣品各5μL,以檸檬苦素母離子m/z=471.1進(jìn)行選擇,m/z=425.3為定性離子,m/z=161.1為定量離子。

    1.2.5 定量限實(shí)驗(yàn) 將檸檬苦素0.57μg/m L的標(biāo)準(zhǔn)溶液逐級(jí)稀釋,在液相質(zhì)譜分析條件下進(jìn)樣分析,以S/N=10,確定檸檬苦素的定量限。

    1.2.6 樣品溶液制備 稱取干燥的桔皮、桔籽、桔絡(luò)、桔肉各3.0g于250m L的圓底燒瓶中,量取50.0m L石油醚(30~60℃)于40℃超聲脫脂30min,抽濾,棄去濾液;向?yàn)V渣中加入50.0m L丙酮,40°C超聲提取30m in,過濾;濾液揮干,用50%乙腈-水(V∶V)溶液定容至50.0m L。過0.22μm有機(jī)微孔濾膜后在設(shè)定的液相-質(zhì)譜條件下檢測(cè)。

    2 結(jié)果與分析

    2.1 線性范圍

    標(biāo)樣色譜圖見圖1。以濃度為橫坐標(biāo),峰面積為縱坐標(biāo)擬合標(biāo)準(zhǔn)工作曲線,檸檬苦素線性回歸方程為:Y=62.7883X+11.245,r=0.99954。該檢測(cè)條件下,檸檬苦素在2.85~114ng之間線性關(guān)系良好。

    圖1 檸檬苦素標(biāo)準(zhǔn)品色譜-質(zhì)譜圖Fig.1 The limonin’s chromatogram of standard

    2.2 定量限確定

    經(jīng)實(shí)驗(yàn),在液相-質(zhì)譜分析條件下進(jìn)樣分析得到S/N=10,計(jì)算得檸檬苦素的定量檢測(cè)限為2.8ng/m L。

    2.3 重復(fù)性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    取桔籽樣品,按1.2.6方法制備樣品,在色譜-質(zhì)譜條件下平行測(cè)定5次,每次進(jìn)樣5μL,測(cè)定檸檬苦素的峰面積,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差。其中檸檬苦素的峰面積分別為850.2、845.6、878.3、866.7、835.5,RSD=2.00%(n=5),結(jié)果表明方法的重復(fù)性良好。

    2.4 穩(wěn)定性實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    取桔籽樣品,按1.2.6方法制備,在色譜-質(zhì)譜條件下,分別在0.5、1、6、12、24h進(jìn)樣5μL檢測(cè)檸檬苦素的峰面積,分別為866.4、895.3、875.8、832.9、885.3,計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差,求得RSD為2.75%(n=5)。結(jié)果表明在該方法條件下,檸檬苦素穩(wěn)定。

    2.5 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果

    精密量取已測(cè)定檸檬苦素為218.49mg/kg的桔肉3.0g,加入5.70mg檸檬苦素標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),按1.2.6方法制備樣品條件平行制備3份,在色譜-質(zhì)譜條件下測(cè)定,計(jì)算檸檬苦素的回收率,結(jié)果如表1所示。

    表1 回收率測(cè)定結(jié)果Table 1 Themeasurement results of recovery

    從表1可知,檸檬苦素的平均回收率為99.53%,RSD=2.91%(n=3)。同樣的方法計(jì)算桔籽的平均回收率為99.32%,RSD=2.15%(n=3);桔絡(luò)的平均回收率為101.54,RSD=2.54%(n=3);桔皮的平均回收率為100.85%;RSD=3.14%(n=3)。結(jié)果表明方法準(zhǔn)確可靠。

    2.6 柑桔中不同組織檸檬苦素質(zhì)量濃度的測(cè)定結(jié)果

    依樣品制備方法和測(cè)定條件,對(duì)桔籽、桔絡(luò)、桔肉、桔皮樣品中的檸檬苦素質(zhì)量濃度測(cè)定,色譜-質(zhì)譜圖見圖2,結(jié)果見表2。

    圖2 桔籽中檸檬苦素色譜-質(zhì)譜圖Fig.2 The limonin’s chromatogram of citrus seeds

    表2 樣品測(cè)定結(jié)果(n=3)Table 2 Themeasurement results of samples

    柑桔中各個(gè)部分均含有檸檬苦素,其中桔籽、桔絡(luò)中檸檬苦素含量較高,桔肉中含量最低。柑桔的含水率在95%左右,將桔肉中檸檬苦素含量換算為柑桔汁中的檸檬苦素含量大概為10mg/kg左右,與直接利用桔子汁進(jìn)行檢測(cè)結(jié)果基本相吻合。

    3 結(jié)論與討論

    在實(shí)驗(yàn)分析過程中,就實(shí)驗(yàn)樣品的處理進(jìn)行了多次實(shí)驗(yàn)。檸檬苦素在桔肉中含量較低,為了與桔籽、桔絡(luò)、桔皮檢測(cè)干燥樣品相比較,我們采用將桔肉烘干的辦法。但桔肉檢測(cè)的最終結(jié)果通過含水率換算后,比直接采用桔汁檢測(cè)大15%左右,這可能與桔子汁的后苦效應(yīng)有關(guān),同時(shí)也與桔肉樣品處理步驟增多,增加結(jié)果檢測(cè)誤差有關(guān)。如要測(cè)定桔汁的檸檬苦素含量,最好直接采用桔汁提取后檢測(cè)。在色譜條件的選擇上曾使用HPLC結(jié)合VWD(紫外-可見吸收)檢測(cè),因檢測(cè)波長(zhǎng)在203nm,分析基線噪音很大,結(jié)果不理想,同時(shí)HPLC分析時(shí)間較長(zhǎng)。采用UPLC后,分離效率明顯提高;采用DAD(二極管陣列)檢測(cè),檢測(cè)效果較VWD好,但檢出限較高,重復(fù)性較差,對(duì)低含量檸檬苦素?zé)o法檢測(cè)。采用UPLC-MS/MS分析,分離效果好,檢出限低,實(shí)驗(yàn)結(jié)果重復(fù)性、穩(wěn)定性良好,為實(shí)驗(yàn)所選擇。柑桔中的檸檬苦素主要存在于桔籽和桔絡(luò)中,柑桔皮除含有檸檬苦素,還含有柚皮苷類致苦物質(zhì),在桔汁加工中清除桔皮,桔籽和桔絡(luò)能有效避免苦味物質(zhì)的產(chǎn)生。但在實(shí)際工業(yè)加工中,桔子去皮可通過工藝改進(jìn)實(shí)現(xiàn),去籽和去桔絡(luò)則難度太大,暫無有效方法。鑒于此,建議桔汁加工原料盡量選用無籽和桔絡(luò)較少的柑桔品種。為利于柑桔加工,柑桔種植基地可進(jìn)行無籽、少桔絡(luò)柑桔品種的育種和推廣。

    [1]Morton CM,GrantM,Blackmore S.Phylogenetic relationships of the aurantioideae inferred from chloroplast DNA sequence data[J].American Journal of Batany,2003,90(10):1463-1469.

    [2]鄧秀新.國內(nèi)外柑桔產(chǎn)業(yè)發(fā)展趨勢(shì)與柑桔優(yōu)勢(shì)區(qū)域規(guī)劃[J].廣西園藝,2004,15(4):6-10.

    [3]陳仕俏,趙文紅,白衛(wèi)東.我國柑桔的發(fā)展現(xiàn)狀與展望[J].農(nóng)產(chǎn)品加工學(xué)刊,2008(3):21-25.

    [4]單楊.中國柑桔工業(yè)的現(xiàn)狀、發(fā)展趨勢(shì)與對(duì)策[J].中國食品學(xué)報(bào),2008,8(1):1-8.

    [5]吳厚玖,孫志高,王華.從國際柑桔加工業(yè)發(fā)展趨勢(shì)看我國柑桔加工業(yè)發(fā)展方向[J].中國果業(yè)信息,2006(2):1-4.

    [6]孫志高,黃學(xué)根,焦必寧,等.柑桔果實(shí)主要苦味成分的分布及橙汁脫苦技術(shù)研究[J].食品科學(xué),2005,26(6):146-148.

    [7]Ribeiromhl,Silveirad,F(xiàn)erreiradiass.Selective adsorption of limonin and naringin from orange juice to natural and synthetic adsorbents[J].European Food Research and Technology,2002,215(6):462-471.

    [8]Miller EG,Gonzales,Sanders A P.Inhibition ofhamsterbuccal pouch carcinogenesis by limonin 17-beta-D-glucopyranoside[J]. Nutr Cancer,1992,17(1):1-7.

    [9]Wada K,YagiM,Kurihara T,etal.Studies on the constituents of edible and medicinal plants.Ⅲ:effects of seven limonoids on the sleeping time induced inmice by anesthetics[J].Chem Pharm Bull:Tokyo,1992,40(11):3079-3080.

    [10]Serit M,Ishida M,Kim M,et al.Antifeedants from citrus natsudaidai hayata againes termite reticulitermes speratus kolbe [J].Agric Biol Chem,1991,55:2381-2385.

    [11]孫崇德,陳昆松,陳青俊,等.柑桔果實(shí)中天然檸檬苦素和諾米林的提取、鑒別與檢測(cè)[J].中國食品學(xué)報(bào),2004,4(1):6-11.

    [12]田慶國,丁霄霖.測(cè)定桔核中檸檬苦素類似物的分光光度法[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào),1999,18(5):45-46.

    [13]陳靜,高彥祥,吳偉莉,等.高效液相色譜法測(cè)定柑桔汁中的檸檬苦素和柚皮苷[J].色譜,2006,24(2):157-160.

    [14]劉亮,戚向陽,董緒燕,等.高效液相色譜法測(cè)定柑桔中的檸檬苦素類似物[J].食品與發(fā)酵工業(yè),2007,33(4):130-133.

    Detection of limonin in citrus with different tissue by UPLC-MS/MS

    JIANG Hai1,2,LIXin-sheng1,2,*,WU San-qiao1,LIU Xin1,HAN Hao1,GAO Yue1,PENG Hao1,2
    (1.School of Biological Science&Engineering,ShaanxiUniversity of Technology,Hanzhong 723000,China;2.Shaanxi Key Laboratory of Resource Biology,Hanzhong 723000,China)

    Ob jec tive:Determ ined the contents of Limonin in citrus peel,citrus flesh,d ried tangerine fibre and citrus seed.Analysis of the source of citrus bitterness substances in p rocessing.Methods:The column was waters ACQUITY BEH C18(50mm×2.5mm,1.9μm)by UPLC-MS/MS,mobile phase:using g rad ient elution,A was acetonitrile and B was water,A:10%(0m in)-50%(3m in)-10%(4m in)-10%(5m in),the velocity of flow was 0.3m L/m in,column temperature was 40℃,injection quantity was 5μL,detection time was 5m in,ESI(+)scan,the limonin’s parents were m/z=471.1,daughter were m/z=425.3 and m/z=161.1.Results:Limonin could be detected in the chromatog raphy-mass spectrum cond itions.The limonin contents discretion order in citrus was citrus seed>d ried tangerine fibre>citrus peel>citrus flesh.Conc lusion:In citrus p rocessing,tried to choose seed less varieties.Using manualskinning,and elim inate d ried tangerine fibre could avoid the bitter.

    UPLC-MS/MS;determ ination;c trus;tissue;limonin

    TS255.1

    A

    1002-0306(2012)14-0087-03

    2011-12-13 *通訊聯(lián)系人

    江海(1977-),男,碩士,實(shí)驗(yàn)師,研究方向:生物資源開發(fā)利用。

    陜西省教育廳科研項(xiàng)目(2011GJ21,11JS033);陜西理工學(xué)院科研資助項(xiàng)目(SLG0814)。

    猜你喜歡
    苦素柑桔檸檬
    檸檬
    黑曲霉發(fā)酵粗酶液去除柚汁中檸檬苦素研究
    巧制檸檬片
    中老年保健(2021年3期)2021-12-03 02:32:25
    小檸檬
    檸檬苦素對(duì)DDP耐藥胃癌細(xì)胞化療敏感性的影響
    酸漿苦素B的研究進(jìn)展
    中成藥(2018年7期)2018-08-04 06:04:14
    柑橘籽中檸檬苦素及類似物的生物活性研究進(jìn)展
    柑桔無公害栽培技術(shù)研討
    柑桔樹青苔病的發(fā)生與防治
    柑桔園冬季管理技術(shù)
    一个人看视频在线观看www免费| 成年免费大片在线观看| 亚洲欧洲国产日韩| 国产精品久久久久久久电影| 久热久热在线精品观看| 亚洲成人久久爱视频| 免费观看的影片在线观看| 秋霞在线观看毛片| 99热全是精品| 日韩一区二区三区影片| 国产精品三级大全| 男女下面进入的视频免费午夜| 亚洲熟女精品中文字幕| 又爽又黄a免费视频| 久久国内精品自在自线图片| 亚洲精品影视一区二区三区av| 久久国内精品自在自线图片| 日韩免费高清中文字幕av| 超碰av人人做人人爽久久| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 国产精品福利在线免费观看| 中文字幕av成人在线电影| 国产黄色免费在线视频| 成人毛片a级毛片在线播放| 色吧在线观看| 在线观看美女被高潮喷水网站| 有码 亚洲区| 精品人妻偷拍中文字幕| kizo精华| videos熟女内射| av女优亚洲男人天堂| 久久久久精品性色| 亚洲av成人精品一区久久| 精品酒店卫生间| 亚洲第一区二区三区不卡| 国产高潮美女av| 91精品国产九色| 午夜老司机福利剧场| 国产成年人精品一区二区| 国产黄频视频在线观看| 男的添女的下面高潮视频| 国产成人91sexporn| 精品久久国产蜜桃| 国产精品爽爽va在线观看网站| 精品一区二区免费观看| 3wmmmm亚洲av在线观看| 亚洲天堂av无毛| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 在线天堂最新版资源| 少妇人妻 视频| 国产精品女同一区二区软件| 一本久久精品| 人妻少妇偷人精品九色| 少妇猛男粗大的猛烈进出视频 | av一本久久久久| 午夜福利在线在线| 亚洲国产高清在线一区二区三| 精品国产一区二区三区久久久樱花 | 亚洲国产精品999| 国产黄片美女视频| 国产有黄有色有爽视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 高清午夜精品一区二区三区| 女人久久www免费人成看片| 亚洲无线观看免费| 赤兔流量卡办理| 精品酒店卫生间| 中文天堂在线官网| 久久人人爽av亚洲精品天堂 | 午夜精品一区二区三区免费看| 嫩草影院精品99| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 极品教师在线视频| 国产色爽女视频免费观看| 成人欧美大片| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产亚洲一区二区精品| 国产亚洲一区二区精品| 一级av片app| 女人被狂操c到高潮| 成人鲁丝片一二三区免费| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 熟妇人妻不卡中文字幕| 久久久久精品性色| 晚上一个人看的免费电影| 成年免费大片在线观看| 精品人妻熟女av久视频| 成人漫画全彩无遮挡| 国产男人的电影天堂91| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲一级一片aⅴ在线观看| 欧美精品国产亚洲| 国产伦精品一区二区三区视频9| 久久久亚洲精品成人影院| 制服丝袜香蕉在线| 天天一区二区日本电影三级| 看免费成人av毛片| 老司机影院毛片| 亚洲成色77777| 久久这里有精品视频免费| 丝瓜视频免费看黄片| 国产大屁股一区二区在线视频| 国产精品久久久久久久久免| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 一二三四中文在线观看免费高清| 亚洲精品国产色婷婷电影| 啦啦啦在线观看免费高清www| 高清av免费在线| 亚洲国产欧美人成| 亚洲国产精品专区欧美| 精品国产乱码久久久久久小说| 国产伦精品一区二区三区视频9| 久久精品久久久久久噜噜老黄| 亚洲自拍偷在线| 欧美日韩综合久久久久久| 插逼视频在线观看| 女人久久www免费人成看片| 国产午夜福利久久久久久| 亚洲av欧美aⅴ国产| 久久久久久九九精品二区国产| 久久久午夜欧美精品| 午夜福利在线在线| 最近最新中文字幕免费大全7| 亚洲伊人久久精品综合| 七月丁香在线播放| 激情 狠狠 欧美| 国产精品女同一区二区软件| 深爱激情五月婷婷| 久久99热这里只频精品6学生| 深爱激情五月婷婷| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产精品久久久久久av不卡| 校园人妻丝袜中文字幕| 精品久久国产蜜桃| 青青草视频在线视频观看| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 六月丁香七月| 在线 av 中文字幕| 国产免费一区二区三区四区乱码| av国产精品久久久久影院| 午夜免费鲁丝| 国产黄色视频一区二区在线观看| 国产精品久久久久久久久免| 丝瓜视频免费看黄片| 免费观看在线日韩| 欧美日韩视频高清一区二区三区二| 亚洲国产成人一精品久久久| 欧美xxⅹ黑人| 久久99热这里只有精品18| 国产精品爽爽va在线观看网站| 97在线视频观看| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 欧美国产精品一级二级三级 | 又爽又黄无遮挡网站| 亚洲av成人精品一区久久| 国产黄色免费在线视频| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久久久性生活片| 亚洲人成网站高清观看| tube8黄色片| 亚洲av中文字字幕乱码综合| 国产成人精品福利久久| 制服丝袜香蕉在线| 男人舔奶头视频| 国产精品人妻久久久影院| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 身体一侧抽搐| 搡老乐熟女国产| 久久精品夜色国产| 在线观看美女被高潮喷水网站| 国产亚洲91精品色在线| 97超视频在线观看视频| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 搡老乐熟女国产| 国产 精品1| 狂野欧美白嫩少妇大欣赏| 狂野欧美激情性bbbbbb| 国产精品一区www在线观看| 少妇 在线观看| 亚洲国产精品国产精品| 人妻夜夜爽99麻豆av| 一边亲一边摸免费视频| 午夜免费鲁丝| 丰满少妇做爰视频| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 插阴视频在线观看视频| 午夜激情福利司机影院| 真实男女啪啪啪动态图| 亚洲av二区三区四区| 91aial.com中文字幕在线观看| 丰满人妻一区二区三区视频av| 丰满人妻一区二区三区视频av| 欧美精品国产亚洲| 深爱激情五月婷婷| 久久久久网色| 国产爽快片一区二区三区| 伊人久久国产一区二区| 国产色爽女视频免费观看| 伊人久久国产一区二区| 国产探花在线观看一区二区| 亚洲精华国产精华液的使用体验| 国产高潮美女av| 一区二区av电影网| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 26uuu在线亚洲综合色| 亚洲av福利一区| av国产精品久久久久影院| 日本欧美国产在线视频| 特大巨黑吊av在线直播| 久久人人爽人人片av| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲,欧美,日韩| 日本熟妇午夜| 国产永久视频网站| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 国产国拍精品亚洲av在线观看| 观看美女的网站| 国产精品久久久久久av不卡| 亚洲精品456在线播放app| 男人添女人高潮全过程视频| 黄色一级大片看看| 人体艺术视频欧美日本| 中文天堂在线官网| 亚洲精品乱久久久久久| 男女国产视频网站| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 午夜精品国产一区二区电影 | 久久人人爽人人片av| 日日啪夜夜爽| 五月开心婷婷网| 国产黄频视频在线观看| 欧美另类一区| 69av精品久久久久久| 国产人妻一区二区三区在| 丝瓜视频免费看黄片| 久久久欧美国产精品| 欧美日韩在线观看h| 91精品伊人久久大香线蕉| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 人妻一区二区av| h日本视频在线播放| 2022亚洲国产成人精品| 日本与韩国留学比较| 色哟哟·www| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 深爱激情五月婷婷| 国模一区二区三区四区视频| 99热这里只有精品一区| 高清视频免费观看一区二区| 少妇丰满av| 高清欧美精品videossex| 99热这里只有是精品50| 我的老师免费观看完整版| 免费播放大片免费观看视频在线观看| 一级毛片 在线播放| 69av精品久久久久久| 青春草国产在线视频| 亚洲三级黄色毛片| 在线精品无人区一区二区三 | 亚洲精品亚洲一区二区| 最后的刺客免费高清国语| 精品少妇黑人巨大在线播放| 亚洲av福利一区| 久久久久精品性色| 国产爽快片一区二区三区| 秋霞伦理黄片| 97超碰精品成人国产| 你懂的网址亚洲精品在线观看| 亚洲欧美日韩无卡精品| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 国产中年淑女户外野战色| 色5月婷婷丁香| 免费看a级黄色片| 老司机影院成人| 波野结衣二区三区在线| 一级二级三级毛片免费看| 亚洲国产成人一精品久久久| 内射极品少妇av片p| 成年女人看的毛片在线观看| 国产一区二区在线观看日韩| 最近中文字幕高清免费大全6| 美女高潮的动态| 精品视频人人做人人爽| 国产又色又爽无遮挡免| 搞女人的毛片| 大话2 男鬼变身卡| 精品久久久久久电影网| 校园人妻丝袜中文字幕| 男人狂女人下面高潮的视频| 国产伦在线观看视频一区| 久久久久久伊人网av| 美女高潮的动态| 久久久亚洲精品成人影院| 国产黄片视频在线免费观看| 国产精品久久久久久精品古装| 人妻一区二区av| 久久久久久久久久人人人人人人| 亚洲精品,欧美精品| 18禁在线播放成人免费| 日韩一区二区三区影片| 欧美变态另类bdsm刘玥| 免费观看在线日韩| 久久久久久伊人网av| 国模一区二区三区四区视频| 成人亚洲精品一区在线观看 | 国产精品偷伦视频观看了| 少妇裸体淫交视频免费看高清| 一本一本综合久久| 老师上课跳d突然被开到最大视频| 国产成人freesex在线| 免费高清在线观看视频在线观看| 亚洲精品色激情综合| 免费观看的影片在线观看| 成人午夜精彩视频在线观看| 久久久成人免费电影| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | 亚洲av欧美aⅴ国产| 国产亚洲91精品色在线| 国产老妇伦熟女老妇高清| 18+在线观看网站| 国产精品国产三级专区第一集| 在线观看三级黄色| 亚洲精品国产av成人精品| 丝瓜视频免费看黄片| 国产乱人视频| 在线免费十八禁| 国产黄片美女视频| 2018国产大陆天天弄谢| 一级黄片播放器| 建设人人有责人人尽责人人享有的 | 大陆偷拍与自拍| 中文字幕av成人在线电影| 深爱激情五月婷婷| 亚洲精品乱码久久久v下载方式| 亚洲熟女精品中文字幕| 久久精品国产亚洲网站| 精品酒店卫生间| 国产精品一及| 春色校园在线视频观看| 日日啪夜夜爽| 国产精品一区二区在线观看99| 黄片wwwwww| 一本一本综合久久| 久久久久久久亚洲中文字幕| 免费大片黄手机在线观看| 日韩精品有码人妻一区| 婷婷色综合www| 色网站视频免费| 天天躁日日操中文字幕| 成人午夜精彩视频在线观看| 99热国产这里只有精品6| 亚洲最大成人手机在线| 真实男女啪啪啪动态图| 天堂中文最新版在线下载 | 偷拍熟女少妇极品色| 一级黄片播放器| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 干丝袜人妻中文字幕| freevideosex欧美| 麻豆乱淫一区二区| 成人免费观看视频高清| 亚洲国产欧美人成| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| av天堂中文字幕网| 少妇人妻 视频| 2021少妇久久久久久久久久久| 中国美白少妇内射xxxbb| 中文欧美无线码| 黄色怎么调成土黄色| 蜜桃亚洲精品一区二区三区| 三级男女做爰猛烈吃奶摸视频| 亚洲自偷自拍三级| 老女人水多毛片| 爱豆传媒免费全集在线观看| 韩国av在线不卡| 波野结衣二区三区在线| 自拍欧美九色日韩亚洲蝌蚪91 | 国产伦在线观看视频一区| 男女边摸边吃奶| 嫩草影院精品99| 免费黄网站久久成人精品| 亚洲精品aⅴ在线观看| 嫩草影院新地址| 国产成人freesex在线| 久久97久久精品| 久久鲁丝午夜福利片| 成人漫画全彩无遮挡| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产极品天堂在线| 性色avwww在线观看| 亚洲av成人精品一区久久| 国产黄片美女视频| 亚洲精品色激情综合| 国产 精品1| 久久久久国产网址| 九色成人免费人妻av| 麻豆乱淫一区二区| 亚洲av日韩在线播放| 午夜免费鲁丝| 在线播放无遮挡| 97超视频在线观看视频| 人妻系列 视频| 网址你懂的国产日韩在线| 美女主播在线视频| 视频中文字幕在线观看| 久久精品久久久久久久性| 色综合色国产| 一级片'在线观看视频| 蜜桃久久精品国产亚洲av| 九九在线视频观看精品| 91久久精品国产一区二区三区| 黄色欧美视频在线观看| 激情五月婷婷亚洲| 不卡视频在线观看欧美| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 国产成人午夜福利电影在线观看| 国产成人91sexporn| 国产色爽女视频免费观看| 九九在线视频观看精品| 国产男女内射视频| 久久久久久久大尺度免费视频| 国产免费福利视频在线观看| 国产高清有码在线观看视频| 国产免费又黄又爽又色| 亚洲美女视频黄频| 男人狂女人下面高潮的视频| 亚洲欧美一区二区三区黑人 | 大片电影免费在线观看免费| 热re99久久精品国产66热6| av天堂中文字幕网| 综合色丁香网| 亚洲人成网站高清观看| 26uuu在线亚洲综合色| 国产美女午夜福利| 久久久久国产网址| 精品一区二区免费观看| 国产精品一区www在线观看| 亚洲性久久影院| 少妇的逼好多水| 国产大屁股一区二区在线视频| 制服丝袜香蕉在线| 日本猛色少妇xxxxx猛交久久| 成年av动漫网址| 成人黄色视频免费在线看| 免费观看的影片在线观看| 亚洲无线观看免费| av免费在线看不卡| 欧美成人精品欧美一级黄| 午夜日本视频在线| 在线 av 中文字幕| 2021天堂中文幕一二区在线观| 久久99热6这里只有精品| 日韩欧美 国产精品| 嫩草影院入口| 人妻一区二区av| 亚洲自拍偷在线| 久久久色成人| 国产成人精品福利久久| 国产综合精华液| 国产精品不卡视频一区二区| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 国产精品一二三区在线看| 久久久久久久久久人人人人人人| 精品一区在线观看国产| 日本一本二区三区精品| 一边亲一边摸免费视频| 国产色婷婷99| 亚洲第一区二区三区不卡| 嫩草影院入口| 亚洲国产精品999| 亚洲内射少妇av| 涩涩av久久男人的天堂| 日日啪夜夜撸| 在线免费十八禁| 国产老妇女一区| 日本av手机在线免费观看| 成年女人在线观看亚洲视频 | 亚洲精品第二区| 欧美精品一区二区大全| 午夜福利视频精品| 尾随美女入室| 黑人高潮一二区| 国产乱人偷精品视频| 亚洲自拍偷在线| 国产精品一二三区在线看| 中文字幕av成人在线电影| 一本一本综合久久| 亚洲国产高清在线一区二区三| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 日韩电影二区| 少妇被粗大猛烈的视频| 99热这里只有是精品在线观看| 波野结衣二区三区在线| 91在线精品国自产拍蜜月| 在线精品无人区一区二区三 | 少妇人妻 视频| 国产一级毛片在线| 我的老师免费观看完整版| 插阴视频在线观看视频| .国产精品久久| 卡戴珊不雅视频在线播放| 色综合色国产| 午夜福利视频精品| 亚洲av二区三区四区| 欧美zozozo另类| 黄色一级大片看看| 青青草视频在线视频观看| 国产在线男女| 丰满人妻一区二区三区视频av| 国产欧美日韩一区二区三区在线 | 亚洲成人av在线免费| 色播亚洲综合网| 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 男人狂女人下面高潮的视频| 久久精品人妻少妇| 国产老妇伦熟女老妇高清| 成人毛片60女人毛片免费| 又爽又黄无遮挡网站| 男女下面进入的视频免费午夜| 成人鲁丝片一二三区免费| 欧美亚洲 丝袜 人妻 在线| 一级黄片播放器| 男的添女的下面高潮视频| 男插女下体视频免费在线播放| 欧美激情久久久久久爽电影| 成人特级av手机在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 大片电影免费在线观看免费| 一级爰片在线观看| 午夜激情久久久久久久| 天堂网av新在线| 亚洲av福利一区| 免费人成在线观看视频色| 亚洲内射少妇av| 看免费成人av毛片| 久久久久精品性色| 日韩不卡一区二区三区视频在线| 波多野结衣巨乳人妻| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 国产精品国产三级专区第一集| 国产日韩欧美亚洲二区| 超碰av人人做人人爽久久| 成年女人看的毛片在线观看| 午夜爱爱视频在线播放| 久久精品人妻少妇| 99热这里只有是精品在线观看| 黄片无遮挡物在线观看| 美女视频免费永久观看网站| 国产亚洲5aaaaa淫片| 一级黄片播放器| 国产永久视频网站| 国产美女午夜福利| 1000部很黄的大片| 亚洲综合精品二区| 国产高清不卡午夜福利| 久久久久九九精品影院| 九九在线视频观看精品| 国产精品.久久久| 精品少妇黑人巨大在线播放| 日韩三级伦理在线观看| 日韩一区二区三区影片| 久久99蜜桃精品久久| 国产乱来视频区| 自拍偷自拍亚洲精品老妇| 99热这里只有是精品在线观看| 亚洲av中文av极速乱| 狂野欧美激情性bbbbbb| 久久99精品国语久久久| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 精品人妻熟女av久视频| 久久热精品热| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 日韩一区二区三区影片| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 日韩亚洲欧美综合| 国产高清不卡午夜福利| 最近手机中文字幕大全| 交换朋友夫妻互换小说| 久久久久网色| 在线看a的网站| 国产 精品1| 国内少妇人妻偷人精品xxx网站| 免费黄色在线免费观看| av播播在线观看一区| 午夜精品一区二区三区免费看| 丝袜美腿在线中文| 2022亚洲国产成人精品| 国产成人a区在线观看| 搡老乐熟女国产| 99久久九九国产精品国产免费| 欧美性猛交╳xxx乱大交人| 97精品久久久久久久久久精品| 中文欧美无线码| 欧美成人午夜免费资源| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | 亚洲三级黄色毛片| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 看十八女毛片水多多多| av又黄又爽大尺度在线免费看| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 永久免费av网站大全| 国产美女午夜福利| 日本与韩国留学比较| 成年av动漫网址| 高清av免费在线| 大陆偷拍与自拍| 特大巨黑吊av在线直播| 激情 狠狠 欧美| 午夜福利网站1000一区二区三区| 国产乱人偷精品视频| 亚洲色图综合在线观看| 国产极品天堂在线|