梔子苷的藥代動力學(xué)研究進(jìn)展*

李 丹，閻 姝

(1.天津中醫(yī)藥大學(xué)，天津 300073;2.天津市南開醫(yī)院，天津 300073)

梔子苷是茜草科植物梔子(Gardenia jasminoiaes Ellis)的干燥成熟果實(shí)中含有的一種環(huán)烯醚萜苷類化合物，京尼平是其苷元。梔子苷分子式為C17H24O11，分子量為404.5，是梔子的主要藥效成分，具有抗炎、解熱、利膽和輕瀉等藥理作用，臨床應(yīng)用廣泛［1］。其藥理作用及其作用機(jī)制的研究已取得很大進(jìn)展，但在動物及人體內(nèi)的藥物代謝動力學(xué)研究直到近年來才日益深入。本文就梔子苷的藥代動學(xué)研究做一綜述，為其進(jìn)一步研究提供思路。

1 研究對象

目前梔子苷的藥動學(xué)研究有動物實(shí)驗(yàn)和人體實(shí)驗(yàn)。動物實(shí)驗(yàn)主要有SD大鼠(體重200～300 g)［2］、小鼠(體重 20 ～ 30 g)［3］、家兔(體重 2.5 ～ 3 kg)［4］、Beagle犬(體重5～7 kg)［5］。一般要求實(shí)驗(yàn)動物健康成年，所需數(shù)量因考查目的不同而異，一般血藥濃度－時間曲線的每個采樣點(diǎn)不少于5個。另外，實(shí)驗(yàn)動物的性別通過不同的機(jī)理影響藥物的吸收、分布、代謝和排泄［6］。近些年梔子苷的藥代動力學(xué)研究，家兔多為雌雄兼并，鼠、犬多用雄性。

人體實(shí)驗(yàn)則以健康男性青年志愿者為研究［7］。

2 方法學(xué)研究

生物樣品(血漿、組織等)中藥物含量少，干擾物質(zhì)多，如果沒有合適的前處理方法和檢測手段，很有可能對組分的藥代動力學(xué)行為做出錯誤的判斷。所以，方法學(xué)是藥代動力學(xué)研究的基礎(chǔ)，至關(guān)重要。

2.1 生物樣品的處理方法 目前生物樣品中梔子苷的處理方法有兩種:蛋白沉淀法［8］和固相萃取法［9］。蛋白沉淀法操作簡便、快速，但雜質(zhì)去除不徹底，易對質(zhì)譜檢測器造成污染;固相萃取法相對去除雜質(zhì)徹底，但成本高，速度慢。蛋白沉淀法所用的試劑主要有:乙腈［10］、甲醇［11］、甲醇與乙腈的混合溶劑［12］，也可加入酸，如 0.01 mol/L 冰醋酸溶液［13］、6% 高氯酸［14］、0.2 mol/L鹽酸［15］進(jìn)行沉淀。江莉等［16］參考沸水水浴血漿處理法［17］，先在血液樣品中加入濃度為2 mol/L鹽酸80μl，渦旋混勻1 min，然后放入70℃恒溫水浴鍋中水浴15 min，于10 000 r/min離心10 min，取上清液進(jìn)樣，取得了良好的分離效果。

2.2 生物樣品中梔子苷的檢測方法 生物樣品中梔子苷的測定是利用其物理、化學(xué)及光學(xué)性質(zhì)，主要包括高效液相色譜－紫外法和色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法，其中以高效液相色譜法最為常用。

2.2.1 高效液相色譜 －紫外法(HPLC－UV) 高效液相色譜法是最常用的多組分分離手段，該方法具有靈敏度高、專屬性強(qiáng)、分析速度快及應(yīng)用范圍廣等優(yōu)點(diǎn)，是目前較常用的含量測定方法。梔子苷的最大紫外吸收波長為238 nm，通常采用反相高效液相色譜法(RP－HPLC)可以將梔子苷和其他組分實(shí)現(xiàn)良好的分離，流動相多采用0.01%磷酸水溶液 －乙腈(87∶13)，兩相的比例可以依情況上下浮動，線性關(guān)系良好［18］。

2.2.2 色譜－質(zhì)譜聯(lián)用法 隨著檢測技術(shù)的不斷發(fā)展，多譜聯(lián)用已經(jīng)成為分析成分復(fù)雜樣品的重要工具。色譜和質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)綜合了色譜的高分離效能和質(zhì)譜的高靈敏度等優(yōu)點(diǎn)，可以有效克服常規(guī)檢測方法所存在的缺陷。Xiaorong Ran等［19］以高效液相與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)檢測大鼠血漿中梔子苷和其他組分，穩(wěn)定性好，分離度高。

3 梔子苷的藥代動力學(xué)研究

近年來，隨著檢測手段的提高，各種在體、離體技術(shù)的發(fā)展，梔子苷的藥代動力學(xué)研究有了新的進(jìn)展。

3.1 吸收 不同的給藥方法和實(shí)驗(yàn)對象，以及單一成分給藥和復(fù)方給藥的差別，均會對梔子苷的吸收造成影響。楊明等［20］研究了梔子苷經(jīng)4種不同途徑(灌胃、滴鼻、肌注、尾靜脈)給藥后在大鼠體內(nèi)的藥動學(xué)過程。灌胃和肌注給藥符合一室模型，滴鼻給藥符合二室模型，尾靜脈給藥符合三室模型，且無明顯蓄積現(xiàn)象。藥時曲線圖顯示，口服吸收血藥濃度出現(xiàn)明顯的雙峰現(xiàn)象，說明可能存在肝腸循環(huán)，而且口服生物利用度低(F=9.74%)，其可能的原因是梔子苷水溶性大，且存在首過效應(yīng)。滴鼻給藥的生物利用度接近50%，由于鼻腔與腦部的獨(dú)特聯(lián)系，可實(shí)現(xiàn)鼻－腦直接傳遞給藥，對腦部疾病進(jìn)行定性與定位的治療具有很大優(yōu)勢。比較藥動學(xué)參數(shù)，滴鼻給藥的吸收速度最快，與灌胃及肌注之間存在差異。滴鼻與肌注的半衰期及達(dá)峰時間之間無顯著性差異，但肌注的最大血藥濃度及表觀分布面積明顯大于滴鼻，說明肌注的體內(nèi)吸收優(yōu)于滴鼻。4種給藥途徑的生物利用度的大小順序?yàn)?尾靜脈＞肌注＞滴鼻＞灌胃。結(jié)合梔子苷4種給藥途徑的藥動學(xué)特點(diǎn)，可為梔子苷的臨床使用提供理論依據(jù)。

另外，魏鳳玲等［21］采用NIH系小鼠背部皮膚涂布含梔子苷乳劑，進(jìn)行透皮吸收實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)梔子苷可透皮吸收。對于梔子苷的吸收，也有采用大鼠在體腸吸收模型進(jìn)行研究［22］，發(fā)現(xiàn)藥物濃度對梔子苷在大鼠小腸中的吸收速率有影響，說明梔子苷在大鼠小腸吸收具有飽和現(xiàn)象，提示其在體內(nèi)的吸收機(jī)制除了被動吸收過程，可能存在主動轉(zhuǎn)運(yùn)和易化擴(kuò)散。

梔子苷在人體內(nèi)的藥動學(xué)行為研究較少，僅局限于血藥濃度的監(jiān)測［23］。10名健康受試者靜脈滴注腦血寧注射液后，梔子苷在人體內(nèi)的藥動學(xué)行為符合一室模型，其主要藥物動力學(xué)參數(shù)如下:達(dá)峰時間為(1.15±0.24)h;最大血藥濃度為(3.261 ±0.947)μg/ml;半衰期為(0.56 ±0.25)h。

3.2 分布 藥物在體內(nèi)的分布多數(shù)是不均勻的，且處于動態(tài)平衡中，隨著其吸收和消除不斷變化著。藥物在全身分布的規(guī)律決定著藥物在靶器官的濃度，從而決定著其藥理作用的強(qiáng)度及持續(xù)時間。吳歡等［24］采用單劑量大鼠灌胃給藥(60 mg/kg)，從分布的結(jié)果來看，血漿中藥物濃度最高;組織中藥物濃度由高到低依次為腎、肝、脾和腦。荊海英［25］以舒絡(luò)粉針劑對正常大鼠進(jìn)行尾靜脈注射，得到梔子苷主要臟器分布規(guī)律為:腎＞肝＞心＞脾＞睪丸，但腦組織未見分布。

3.3 代謝 質(zhì)譜可以對未知結(jié)構(gòu)的化合物提供大量的結(jié)構(gòu)信息，但目前利用質(zhì)譜研究梔子苷在體內(nèi)代謝產(chǎn)物及代謝途徑的報道并不多。梔子苷是環(huán)烯醚萜類化合物的氧糖苷，在人腸內(nèi)菌群作用下，大部分發(fā)生生物轉(zhuǎn)化，主要生成梔子素A、梔子素B和梔子寧［26］。文獻(xiàn)研究表明［27，28］，梔子苷在體內(nèi)可能的代謝途徑如圖1，圖中m/z 404.5為梔子苷在其分析條件下的分子離子峰。另外結(jié)合梔子苷的結(jié)構(gòu)信息，推測m/z 241.5為梔子苷在體內(nèi)β－葡萄糖苷酶作用下所產(chǎn)生的代謝產(chǎn)物梔子素。使用高效液相聯(lián)合質(zhì)譜檢測時，不同的檢測條件下得到的代謝產(chǎn)物略有差異，但基本的代謝途徑是一致的:先去糖基化，再與葡萄糖醛酸酶作用，發(fā)生一系列的生物轉(zhuǎn)化。

圖1 梔子苷可能的代謝途徑

3.4 排泄 張麗茹［29］以50 mg/kg劑量灌胃給予梔子苷后，測定不同時間段大鼠尿樣及糞樣中的梔子苷含量。結(jié)果給藥后48 h內(nèi)，尿中原形藥物的累積排泄量為12.1%，糞中未檢出原形。灌胃24 h后，尿中排泄原形藥物約占血漿中原形藥物總量的100%。

梔子苷在人體內(nèi)的排泄情況也有相關(guān)研究。吳秀君等［23］根據(jù)尿中濃度數(shù)據(jù)和記錄的尿液體積，發(fā)現(xiàn)腦血寧注射液給藥后10 h內(nèi)，人體內(nèi)梔子苷大部分以原形由腎臟排出，約占總劑量的70%，給藥后2 h內(nèi)以原形排除的藥量占給藥量的52%，給藥后4 h內(nèi)排除給藥量的63%，該研究結(jié)果提示以原形從腎臟清除是靜脈滴注后人體內(nèi)梔子苷的主要排泄途徑。

4 小結(jié)與展望

綜上所述，梔子苷的藥代動力學(xué)研究仍處于探索階段，不同的實(shí)驗(yàn)對象、不同的給藥途徑等均會影響梔子苷在體內(nèi)的藥動學(xué)行為。梔子苷在體內(nèi)的分布以腎和肝為主，以原形從腎臟清除是其主要排泄途徑。這為設(shè)計(jì)及優(yōu)化給藥方案、科學(xué)制藥提供了重要的理論依據(jù)。

雖然梔子苷的藥代動力學(xué)研究已經(jīng)取得了很大的進(jìn)展，但仍然在許多方面存在著問題需要解決。首先要解決方法學(xué)問題。中藥有效成分含量低，尤其是進(jìn)入體內(nèi)后的血藥濃度很難檢測，這就需要進(jìn)一步的優(yōu)化檢測條件，同時采用多方法、多指標(biāo)的研究相結(jié)合，以得出更為準(zhǔn)確的結(jié)果;其次，目前關(guān)于梔子苷代謝產(chǎn)物的研究還較少，今后應(yīng)該對其代謝物的結(jié)構(gòu)、代謝途徑及藥理作用進(jìn)行更深入的研究，以闡明梔子苷發(fā)揮療效的真正物質(zhì)基礎(chǔ)。這些問題的解決對于梔子苷的新藥研發(fā)、臨床合理使用有著重要意義。

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