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    高效液相色譜法測定濕毒清膠囊中黃芩苷的含量

    2012-10-19 05:54:08天津市大港藥檢所300270董憲鳳
    首都食品與醫(yī)藥 2012年16期
    關(guān)鍵詞:附表黃芩甲醇

    天津市大港藥檢所(300270)董憲鳳

    濕毒清膠囊為常用復(fù)方制劑,是治療皮膚瘙癢癥的良藥。由地黃、當(dāng)歸、丹參、黃芩、蟬蛻、苦參、白蘚皮、甘草、土茯苓等9味中藥材組成。為了更加有效地控制產(chǎn)品的質(zhì)量,對處方黃芩中黃芩苷的含量,利用HPLC法進行含量測定,方法操作簡便易行,具有分離好、靈敏度高、穩(wěn)定性強等優(yōu)點。

    1 儀器與試藥

    島津高效液相色譜儀 LC-2010AHT,島津高效液相色譜儀工作站LC-Solution,Diamonsil C18柱(250mm×4.6mm,5μm);黃芩苷對照品(批號:110715-200514,中國藥品生物制品檢定所提供);濕毒清膠囊(廣西玉林制藥有限責(zé)任公司生產(chǎn),批號為261200、261016、261025);甲醇和磷酸為色譜純,水為純化水。

    附表1 回收率試驗測定結(jié)果

    附表2 濕毒清膠囊中黃芩苷的含量

    2 方法和結(jié)果[1]

    2.1 色譜條件[2][3][4]色譜柱為Diamonsil C18柱,流動相:甲醇-水-磷酸(52∶48∶0.2),流速為0.8ml/min,柱溫30℃,檢測波長為276nm,進樣量10ul。

    2.2 對照品溶液的制備及標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制精取黃芩苷對照品10.24mg置50ml棕色量瓶中,加50%甲醇溶解稀釋至刻度,作為對照品溶液,精取1ml置10ml容量瓶中,加50%甲醇溶解稀釋至刻度。進樣量分別為6ul、8ul、10ul、12ul、14ul、16ul,以峰面積對進樣量回歸,結(jié)果黃芩苷在1.23~3.28ug范圍內(nèi)呈線性,回歸方程:f(x)=1.1x+1.9×105,r=0.9999。

    2.3 樣品溶液的制備 取本品20片,除去糖衣,精密稱定,研細(xì),混勻,精取約0.5g,精密加入50%甲醇50ml,稱定重量,超聲處理30min,放冷,稱定重量,用50%甲醇補足重量,搖勻,濾過,取續(xù)濾液備用。

    2.4 精密度試驗 精密吸取濃度為20ug/ml的對照品溶液,按上述色譜條件進樣量為10μL,連續(xù)進樣5次,測得黃芩苷峰面積的平均值為1931354,RSD=1.1%。

    2.5 重現(xiàn)性試驗 取同批號(261200)的樣品0.5g,按樣品配制方法制備5份,進樣量為10μL測定黃芩苷的含量,RSD=1.4%(n=5)。

    2.6 穩(wěn)定性試驗 精密吸取同一濃度的供試品溶液于不同時間測定,結(jié)果表明在24小時內(nèi)穩(wěn)定。

    2.7 回收率試驗 精密稱取6份已測得黃芩苷含量的樣品,分別加入黃芩苷對照品按樣品測定方法進行測定(見附表1)。

    2.8 樣品測定 取3批樣品,按供試品溶液制備方法制備樣品溶液,按所給色譜條件分別測定峰面積,用外標(biāo)法計算含量(見附表2)。

    2.9 陰性干擾試驗 按處方工藝制備陰性對照液,同法測定對照品溶液、樣品溶液與陰性對照溶液的色譜圖,結(jié)果表明,在此色譜條件下,黃芩苷可與其他成分基線分離,陰性組分無干擾。

    3 討論

    本文對樣品流動相進行了探索,甲醇-水-磷酸(52∶48∶0.2)、甲醇-水-冰醋酸(60∶40∶1)、甲醇-水-冰醋酸(54∶46∶0.2)、甲醇-0.4%磷酸(47∶53),試驗結(jié)果證實,選用上述流動相分離效果好。同時還發(fā)現(xiàn),經(jīng)測定黃芩苷在波長為276nm處有最大吸收峰。雖然此方法簡便、易操作,具有分離好、靈敏度高、穩(wěn)定性強等優(yōu)點,但由于產(chǎn)地、采收時間等因素的影響,致使?jié)穸厩迥z囊黃芩中黃芩苷含量的測定結(jié)果存在有一定的差異,故還應(yīng)嚴(yán)格控制原料藥的質(zhì)量。

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