洛伐他汀煙酸緩釋片中洛伐他汀釋放度檢測(cè)研究

蔣艷霞，呂治紅，秦晶晶

（山西康寶生物制品股份有限公司，山西 長(zhǎng)治046011）

洛伐他汀煙酸緩釋片是新開(kāi)發(fā)的血脂調(diào)節(jié)藥，是煙酸緩釋片與洛伐他汀速釋片的雙層片劑，綜合了煙酸和洛伐他汀的優(yōu)勢(shì)，具備對(duì)LDL和VLDL的強(qiáng)力療效，且療效有相互增強(qiáng)作用。作者在此建立了洛伐他汀煙酸緩釋片中洛伐他汀釋放度的檢測(cè)方法。

1 實(shí)驗(yàn)

1.1 試藥、試劑與儀器

洛伐他汀煙酸緩釋片供試品，規(guī)格：洛伐他汀20mg、煙酸500mg，批號(hào)：111101、111102、111103，山西康寶生物制品有限公司；洛伐他汀、煙酸對(duì)照品，中國(guó)藥品生物制品檢定所。

乙腈（色譜級(jí)），天津科密歐化學(xué)試劑有限公司；磷酸（分析純），天津凱通化學(xué)試劑有限公司；十二烷基硫酸鈉（分析純）、磷酸二氫鈉（分析純），天津北聯(lián)精細(xì)化學(xué)品開(kāi)發(fā)有限公司。

AE240型電子分析天平，梅特勒－托利多儀器（上海）有限公司；安捷倫1260型高效液相色譜儀，美國(guó)安捷倫公司；C18色譜柱（150mm×4.6mm，5μm）。

1.2 溶液的配制

（1）對(duì)照品溶液的配制 精密稱取洛伐他汀對(duì)照品22mg置于100mL量瓶中，加10mL甲醇使溶解，加0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖溶液（取1.38g磷酸二氫鈉和5.0g十二烷基硫酸鈉溶于900mL水中，用1mol·L－1氫氧化鈉溶液調(diào)pH值至7.0，補(bǔ)水至1000mL）定容，超聲10min，搖勻，精密量取5.0mL置于50mL量瓶中，加0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽溶液定容，作為對(duì)照品溶液。

（2）供試品溶液的配制 取洛伐他汀對(duì)照品22mg置于100mL量瓶中，按處方量加入相應(yīng)輔料，加10mL甲醇使溶解，加0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖溶液定容，超聲10min，搖勻，精密量取5.0mL置于50mL量瓶中，加0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽溶液定容，作為供試品溶液。

1.3 洛伐他汀釋放度測(cè)定方法

采用《中國(guó)藥典》（2000年版）二部附錄XC第一法進(jìn)行洛伐他汀煙酸緩釋片中洛伐他汀的溶出，以900mL 0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖溶液作為溶出介質(zhì)。

按照《中國(guó)藥典》（2010年版）二部附錄VD選擇高效液相色譜法［1］測(cè)定洛伐他汀含量。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性

色譜條件：C18色譜柱（150mm×4.6mm，5μm），以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，乙腈－0.5%磷酸溶液（4∶1）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為238nm。理論板數(shù)按洛伐他汀峰計(jì)算不低于2000，洛伐他汀峰與相鄰雜質(zhì)峰之間的分離度符合要求。

取0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖溶液適量，濾過(guò)，取20μL，進(jìn)樣，記錄色譜圖。結(jié)果表明，緩沖溶液對(duì)洛伐他汀的含量測(cè)定無(wú)干擾。

2.2 線性范圍

精密稱取干燥至恒重的洛伐他汀對(duì)照品20mg，置于100mL量瓶中，加入10mL甲醇使溶解，加0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖溶液溶解并稀釋至刻度；分別精密量取0.5mL、1.0mL、4.0mL、7.5mL、5.0mL、5.0mL，各置于200mL、100mL、100mL、100mL、50mL、25mL量瓶中，加0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖溶液稀釋至刻度。分別取上述溶液進(jìn)樣20μL，測(cè)定不同洛伐他汀濃度下的峰面積，結(jié)果見(jiàn)表1 。

表1 洛伐他汀峰面積與濃度關(guān)系Tab.1 The relationship of peak area and concentration for lovastatin

以峰面積（y）為縱坐標(biāo)、洛伐他汀濃度（x）為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，擬合線性回歸方程為：y＝594695x＋25529，R2＝0.9999。表明洛伐他汀在濃度為0.59～40.18μg·mL－1范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好。

2.3 溶出轉(zhuǎn)速及洛伐他汀取樣時(shí)間

分別采用50r·min－1、75r·min－1、100r·min－1的轉(zhuǎn)速進(jìn)行洛伐他汀煙酸緩釋片中洛伐他汀的溶出，并于10min、20min、30min、45min、60min取樣，測(cè)定洛伐他汀的溶出量，結(jié)果見(jiàn)表2 。

表2 不同轉(zhuǎn)速下不同時(shí)間的洛伐他汀溶出量／%Tab.2 The lovastatin elution amount at different times with different rotation speeds／%

由表2 可知，轉(zhuǎn)速為100r·min－1時(shí)洛伐他汀能夠較好地溶出，洛伐他汀在45min時(shí)釋放度與國(guó)外文獻(xiàn)[2］基本一致。因此，確定溶出轉(zhuǎn)速為100r·min－1，取樣時(shí)間為45min。

2.4 重復(fù)性

按洛伐他汀溶出度測(cè)定方法操作，于45min取樣。連續(xù)進(jìn)樣6次，峰面積分別為11 712 168、11 741 808、11 779 796、11 731 662、11 794 378、11 724 485，平均峰面積為11 747 383，RSD為0.28%，表明實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性較好。

2.5 溶液穩(wěn)定性

按洛伐他汀溶出度測(cè)定方法操作，于0h、2h、4h、6h、8h時(shí)取20μL進(jìn)樣，記錄液相色譜圖，峰面積分別為：11 712 168、11 775 193、11 753 307、11 785 618、11 720 135，平 均 峰 面 積 為 11 749 284，RSD 為0.28%，表明樣品在溶出介質(zhì)中放置8h仍穩(wěn)定。

2.6 回收率

用外標(biāo)法計(jì)算3種不同濃度供試品溶液的回收率，結(jié)果見(jiàn)表3。

表3 回收率實(shí)驗(yàn)結(jié)果Tab.3 The determination results of recovery experiment

由表3可知，樣品的回收率在99.0%～101.0%之間，平均回收率為99.8%、相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）為0.71%，均符合規(guī)定。

2.7 均一性

取洛伐他汀煙酸緩釋片6片（分別編號(hào)1?！?＃），采用100r·min－1的轉(zhuǎn)速進(jìn)行溶出，分別于10min、20min、30min、45min、60min取樣5mL，濾過(guò)，同時(shí)補(bǔ)充0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖溶液5 mL；另按照1.2方法（調(diào)整超聲時(shí)間為15min）制得對(duì)照品溶液；分別取兩溶液各20μL，進(jìn)樣，按外標(biāo)法計(jì)算每片的溶出量，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 3批樣品洛伐他汀釋放度均一性實(shí)驗(yàn)結(jié)果／%Tab.4 The results of lovastatin dissolution homogeneity experiment／%

由表4可知，不同批號(hào)洛伐他汀煙酸緩釋片在不同時(shí)間的釋放度測(cè)試結(jié)果一致性良好，RSD在2.0%～11.8%之間，且限度為標(biāo)示量的70%，符合規(guī)定。

3 結(jié)論

取洛伐他汀煙酸緩釋片，按照《中國(guó)藥典》洛伐他汀溶出度測(cè)定法進(jìn)行溶出，以0.5%十二烷基硫酸鈉磷酸鹽緩沖溶液為溶劑，轉(zhuǎn)速為100r·min－1，45min時(shí)取樣，進(jìn)行高效液相色譜測(cè)定。色譜條件為：C18色譜柱（150mm×4.6mm，5μm），以乙腈－0.5%磷酸溶液（4∶1）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)238nm，進(jìn)樣量20μL。洛伐他汀濃度在0.59～40.18μg·mL－1范圍內(nèi)與峰面積線性關(guān)系良好，回收率在99.0%～101.0%之間，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.71%。該方法重復(fù)性好、穩(wěn)定性高，適合洛伐他汀煙酸緩釋片中洛伐他汀釋放度的測(cè)定。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中國(guó)藥典二部（2010年版）[M］.北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：29－31，87－88.

[2]美國(guó)藥典委員會(huì).美國(guó)藥典－國(guó)家處方集，USP35－NF30[M］.2012：3154－3155.