血栓調(diào)節(jié)蛋白和纖維蛋白原在原發(fā)性腎病綜合征中的相關(guān)性研究

王玉路，褚以德，胡文博

（1.青海大學醫(yī)學院，西寧810001；2.青海省人民醫(yī)院腎內(nèi)科，西寧810007）

原發(fā)性腎病綜合征（idiopathic nephrotic syndrome，INS）是腎病綜合征中最常見的類型，主要的病理類型有微小病變腎?。╩inimal change disease，MCD）、系膜增生型腎小球腎炎（mesangial proliferative glomerulonephritis，MsPGN）、系膜毛細血管性腎小球腎炎（mesangiocapillary glomerulonephritis，MCGN）、膜性腎病（membranous nephropathy，MN）、局灶性節(jié)段性腎小球硬化（focal segmental glomerularsclerosis，F(xiàn)SGS）5種。各種病理類型均可引起腎小球血管內(nèi)皮細胞的損傷，其常見的并發(fā)癥是血栓和栓塞，而血栓的形成是引起腎小球硬化的主要因素［1］。血栓調(diào)節(jié)蛋白（thrombomodulin，TM）是血管內(nèi)皮細胞膜上的糖蛋白，當血管內(nèi)皮細胞受損時加速斷裂或脫落進入血循環(huán)中，依其濃度的變化可以評估患者血管內(nèi)皮細胞損傷及疾病的嚴重程度，是反映血管內(nèi)皮細胞損傷的敏感指標［2］。纖維蛋白原（fibrinogen，F(xiàn)G）即凝血因子Ⅰ，是由肝臟合成的一種急性時相血漿糖蛋白，F(xiàn)G能刺激血管內(nèi)皮細胞和平滑肌細胞合成和分泌內(nèi)皮素并抑制一氧化氮合酶和一氧化氮的生成，造成血管損傷，發(fā)揮促凝作用［3］。血清TM（serum TM，sTM）與FG在不同病理類型INS是否存在相關(guān)性尚未見報道，本研究探討不同病理類型INS患者sTM表達水平是否存在差異，及其與FG表達水平是否存在相關(guān)性，并為INS并發(fā)血栓和栓塞形成的觀察指標提供依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2011年1～9月在青海省人民醫(yī)院行腎活檢，組織經(jīng)HE、PAS、PASM特殊染色、Masson染色及免疫組化染色檢測明確診斷病理類型的INS患者60例。其中，男33例，女27例；年齡14～64歲，平均（32.39±13.16）歲；病理活檢分型：MCD 9例、MsPGN 26例、MCGN 7例、MN 13例、FSGS 5例；健康對照30例，其中，男19例，女11例，年齡16～65歲，平均（33.54±14.43）歲，均來自青海省人民醫(yī)院體檢中心，發(fā)病年齡及男女比例比較，差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05）。

1.2 sTM檢測方法 所有患者均于腎活檢當日靜脈采血5mL，自然存放1～2h后，再3 000r／min離心15min，取上清液置于－20℃低溫冰箱保存待測，1個月內(nèi)測定sTM，檢測采用人類CD141酶標記免疫吸附測定法，定量測定人血清中CD141蛋白（TM）。試劑盒購自上海亞培生物科技有限公司，嚴格按說明書操作。

1.3 FG的測定 清晨空腹采取外周血，用3.8%枸櫞酸鈉抗凝，1h內(nèi)離心（3 000r／min）血漿10min，在血凝分析儀上用比濁法定量測定。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS16.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，結(jié)果用±s表示，顯著性檢驗采用方差分析，兩兩比較采用SNK－q檢驗，指標相關(guān)性分析采用簡單相關(guān)性及直線回歸，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結(jié) 果

2.1 各種分型的INS的sTM及FG水平 不同分型INS的sTM水平均高于健康對照組，MN組sTM水平低于INS其他各組、FG水平高于INS其他各組，見表1。

表1 不同病理類型INS患者sTM、FG與健康對照組檢測結(jié)果比較（±s）

表1 不同病理類型INS患者sTM、FG與健康對照組檢測結(jié)果比較（±s）

＊：P＜0.05，與健康對照組比較；＃：P＜0.05，與 MN組比較；△：P＜0.05，與MN組比較；－：表示此項無數(shù)據(jù)。

組別 n sTM（ng／mL） FG（g／L）健康對照組30 0.399±0.035 4 －MCD組 9 1.143±0.079 0 3.170±0.652 0 MsPGN組 26 1.117±0.096 8＊ 2.953±0.567 5＊MCGN組 7 1.169±0.073 6＊＃ 3.270±0.536 5＊＃MN組 13 0.805±0.221 4 3.970±0.544 8 FSGS組 5 1.230±0.137 3＊△ 3.200±0.729 2＊＃△F－ 268.048 15.451 P－＜0.05 ＜0.05

2.2 INS各種病理類型血清sTM水平與FG的相關(guān)性分析

MCD組、MCGN組、FSGN組血清sTM與FG無顯著相關(guān)性（P＞0.05），MsPGN組、MN組血清sTM與FG呈負相關(guān)（P＜0.05），隨FG的增加而表達降低，見表2。

表2 INS各種病理類型血清中sTM與FG的相關(guān)分析

3 討 論

TM是1982年首次由Esmon從兔肺中分離提取的一種具有重要抗凝作用的細胞膜蛋白，大多出現(xiàn)在動脈、靜脈、毛細血管和和淋巴血管的內(nèi)皮細胞表面，主要是作為凝血酶受體發(fā)揮生物學效應(yīng)［3］。其凝血功能主要通過兩個方面發(fā)揮作用：（1）促進蛋白C（PC）的活化，形成活化后的蛋白C（APC）。（2）是與凝血酶形成復合物，使凝血酶促凝性質(zhì)改變［4－5］。TM也是細胞間黏附分子的一種，參與腫瘤細胞的產(chǎn)生、增殖和轉(zhuǎn)移［6］。TM通常在體內(nèi)細胞膜表面和血漿中穩(wěn)定表達，當人體內(nèi)正常內(nèi)皮細胞病變和損傷時，常發(fā)生TM在細胞膜表面和血漿中表達水平的變化［7］。由于TM特異分布于血管內(nèi)皮細胞，故已被作為血管內(nèi)皮損傷的一個分子標記物廣泛用于微血管病變、腦血管、原發(fā)性高血壓、腫瘤、系統(tǒng)性紅斑狼瘡、糖尿病腎病、慢性腎衰竭等臨床研究［8－13］。FG即凝血因子Ⅰ，血漿中的FG含量正常范圍是2～4g／L，現(xiàn)在研究發(fā)現(xiàn)FG水平升高就會增加血管中血液的黏度、使血小板的聚集，促進血栓形成［14］。腎病綜合征并發(fā)血栓和栓塞的發(fā)生率約占10%～42%，以MN發(fā)生率最高，約為29%～60%，主要與INS的嚴重程度、腎小球疾病的種類有關(guān)，但監(jiān)測手段的敏感性也影響血栓和栓塞的發(fā)現(xiàn)［1］。本研究顯示，sTM可以作為血管內(nèi)皮損傷的一個分子標記物，不同分型INS的sTM水平均高于健康對照組，MN組的sTM水平低于INS其他各組、FG水平高于INS其他各組；病理類型為MN的sTM較其他INS病理分型表達水平低，也說明了MN較其他類型INS患者更容易發(fā)生血栓和栓塞，病理類型為MsPGN和MN的sTM與FG表達呈負相關(guān)，說明了此兩種病理類型INS可以用FG間接反映血管內(nèi)皮細胞損傷的程度。病理類型為MCD、MCGN、FSGN的sTM與FG表達無顯著相關(guān)性，具體原因有待進一步研究。

本研究提示，sTM水平不僅可以作為腎小球血管內(nèi)皮細胞損傷的敏感指標，而且與FG在MsGPN、MN組中有負相關(guān)性，可以為MsGPN、MN類型的INS并發(fā)血栓和栓塞的臨床觀察指標提供一定的指導依據(jù)。

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