飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、體組成、血液學(xué)指標(biāo)和肝臟非特異性免疫指標(biāo)的影響

楊 弘 徐起群 樂(lè)貽榮 祝璟琳 肖 煒 李大宇 鄒芝英

(1.中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心，農(nóng)業(yè)部淡水漁業(yè)和種質(zhì)資源利用重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，無(wú)錫 214081;2.南京農(nóng)業(yè)大學(xué)漁業(yè)學(xué)院，無(wú)錫 214081)

尼羅羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus)又稱(chēng)非洲鯽魚(yú)，是隸屬于鱸形目(Perciformes)麗魚(yú)科(Cichlidae)羅非魚(yú)屬(Tilapia)的熱帶魚(yú)類(lèi)，具有生長(zhǎng)快、產(chǎn)量高、繁殖力強(qiáng)、對(duì)環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)等特點(diǎn)，已經(jīng)成為我國(guó)南方地區(qū)(廣東、海南、廣西、福建)的主要養(yǎng)殖品種之一[1-2]。目前關(guān)于尼羅羅非魚(yú)的蛋白質(zhì)需求量已有一些文獻(xiàn)報(bào)道。El-Sayed等[3]研究發(fā)現(xiàn)尼羅羅非魚(yú)對(duì)蛋白質(zhì)的需求量受魚(yú)體規(guī)格的影響，尼羅羅非魚(yú)魚(yú)苗(初始體質(zhì)量為15 mg)的蛋白質(zhì)需求量為45%;Siddiqui等[4]報(bào)道初始體質(zhì)量分別為0.8和40.0 g的尼羅羅非魚(yú)，其蛋白質(zhì)需求量分別為40%和30%;Abdel-Tawwab等[5]發(fā)現(xiàn)規(guī)格為0.4～0.5 g的尼羅羅非魚(yú)的蛋白質(zhì)需求量為45%，高于17～22 g和37～43 g這2種規(guī)格的蛋白質(zhì)需求量(35%)。由于Hanley[6]研究發(fā)現(xiàn)尼羅羅非魚(yú)對(duì)脂質(zhì)的最低需求量為5.1%，上述尼羅羅非魚(yú)對(duì)蛋白質(zhì)的需求量研究結(jié)果都是建立在飼料配方中脂肪水平為5%左右時(shí)，此條件下得出的尼羅羅非魚(yú)蛋白質(zhì)需求量在30%～45%。

蛋白質(zhì)是水產(chǎn)動(dòng)物必需的核心營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)[7]，同時(shí)也是水產(chǎn)飼料中直接影響飼料成本價(jià)格的原料。飼料蛋白質(zhì)水平能直接影響?hù)~(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)，當(dāng)飼料中蛋白質(zhì)水平較低時(shí)，魚(yú)類(lèi)就難以達(dá)到其最佳的生長(zhǎng)速率[5，8-9]，同時(shí)還會(huì)影響?hù)~(yú)類(lèi)的成活率[10-11]。然而，當(dāng)飼料中蛋白質(zhì)水平過(guò)高時(shí)，魚(yú)類(lèi)會(huì)通過(guò)氧化脫氨基作用把過(guò)量的蛋白質(zhì)分解代謝用于能量消耗，會(huì)產(chǎn)生較多的氨氮排泄物，從而導(dǎo)致養(yǎng)殖水體污染加重，不利于魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)和生態(tài)環(huán)境的可持續(xù)發(fā)展[12-16]。因此，提高飼料中非蛋白質(zhì)營(yíng)養(yǎng)素如脂肪的水平，利用其對(duì)蛋白質(zhì)的節(jié)約作用，在不影響?hù)~(yú)類(lèi)生長(zhǎng)的前提下降低飼料蛋白質(zhì)水平和飼料成本，這對(duì)于提高魚(yú)類(lèi)養(yǎng)殖效益、減少環(huán)境脅迫和產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展具有重要意義。

在對(duì)其他品系羅非魚(yú)的研究中發(fā)現(xiàn)，飼料中的脂肪可以起到節(jié)約蛋白質(zhì)的作用。Jauncey[17]對(duì)奧尼羅非魚(yú)(Oreochromis niloticus♀×O.aureus)的研究得出，當(dāng)把飼料中的脂肪水平提高到12%時(shí)，飼料中的蛋白質(zhì)水平可以從40%降低到30%而不會(huì)對(duì)其生長(zhǎng)和飼料利用產(chǎn)生負(fù)面影響。有鑒于此，本試驗(yàn)通過(guò)探討高脂肪水平(9%)條件下尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)對(duì)蛋白質(zhì)的需求量，以及蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、體組成、血液學(xué)指標(biāo)和肝臟非特異性免疫指標(biāo)的影響，以期為生產(chǎn)上配制高能低氮的環(huán)保型尼羅羅非魚(yú)全價(jià)配合飼料提供數(shù)據(jù)參考和科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

試驗(yàn)飼料以魚(yú)粉、棉籽粕、豆粕、菜籽粕、酪蛋白和明膠為蛋白質(zhì)源，以酪蛋白和明膠的不同比例調(diào)整飼料蛋白質(zhì)水平，配制成蛋白質(zhì)水平分別為25%、30%、35%、40%和45%的5種等能飼料。各飼料原料粉碎過(guò)60目篩，微量成分采取逐級(jí)擴(kuò)大法添加，與大宗原料混合均勻后，用制粒機(jī)擠壓成粒徑為2.0 mm的顆粒飼料，風(fēng)干后放入-20℃冰箱中冷凍備用。試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。

1.2 試驗(yàn)分組與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)所用尼羅羅非魚(yú)選自國(guó)家羅非魚(yú)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系研發(fā)中心試驗(yàn)基地，為1999年引進(jìn)的埃及品系尼羅羅非魚(yú)選育以后培育的子代。試驗(yàn)魚(yú)放養(yǎng)在帶有控溫功能的室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中，水源為曝氣自來(lái)水。將試驗(yàn)魚(yú)[初始平均體質(zhì)量為(4.70±0.01)g]隨機(jī)分為5個(gè)組，分別飼喂不同蛋白質(zhì)水平的飼料，每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)20尾魚(yú)，每個(gè)桶為1個(gè)重復(fù)，共用15個(gè)桶，每個(gè)桶的有效體積為475 L。試驗(yàn)魚(yú)適應(yīng)環(huán)境2周后稱(chēng)重，開(kāi)始投喂試驗(yàn)飼料，日投喂率為體質(zhì)量的6%～8%，每天于08:00、12:30和18:00分3次投喂。每2周稱(chēng)重1次，調(diào)整投喂量。每天早上通過(guò)換水清除桶底部的糞便。試驗(yàn)期間水溫為(28±1)℃，pH 7.2～7.8，氨氮含量小于0.05 mg/L，溶氧含量大于5.0 mg/L。飼養(yǎng)時(shí)間為10周。

1.3 測(cè)定指標(biāo)與方法

1.3.1 生長(zhǎng)指標(biāo)

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，記錄每個(gè)桶試驗(yàn)魚(yú)的數(shù)目和總體質(zhì)量，然后每個(gè)桶隨機(jī)抽取3尾魚(yú)進(jìn)行取樣，測(cè)定魚(yú)的體長(zhǎng)、體質(zhì)量、肝臟質(zhì)量、內(nèi)臟質(zhì)量以及取出內(nèi)臟后的魚(yú)體質(zhì)量，以計(jì)算生長(zhǎng)指標(biāo)。

增重率(WGR，%)=[(終末魚(yú)體質(zhì)量+死亡魚(yú)體質(zhì)量-初始魚(yú)體質(zhì)量)/初始魚(yú)體質(zhì)量]×100;

攝食量(FI，g/尾)=投喂量/魚(yú)尾數(shù);

蛋白質(zhì)效率(PER，%)=[(終末魚(yú)體質(zhì)量+死亡魚(yú)體質(zhì)量-初始魚(yú)體質(zhì)量)/蛋白質(zhì)攝入量]×100;

特定生長(zhǎng)率(SGR，%/d)=[(ln終末魚(yú)體質(zhì)量-ln初始魚(yú)體質(zhì)量)/飼養(yǎng)天數(shù)]×100;

飼料系數(shù)(FCR)=攝食量/(終末魚(yú)體質(zhì)量+死亡魚(yú)體質(zhì)量-初始魚(yú)體質(zhì)量);

蛋白質(zhì)沉積率(PDR，%)=[(終末魚(yú)體蛋白質(zhì)含量-初始魚(yú)體蛋白質(zhì)含量)/蛋白質(zhì)攝入量]×100;

成活率(SR，%)=(終末魚(yú)尾數(shù)/初始魚(yú)尾數(shù))×100;

肥滿(mǎn)度(CF，g/cm3)=終末魚(yú)體質(zhì)量/終末魚(yú)體長(zhǎng)3;

肝體比(HSI，%)=(肝臟質(zhì)量/魚(yú)體質(zhì)重)×100;

臟體比(VSI，%)=(內(nèi)臟質(zhì)量/魚(yú)體質(zhì)重)×100。

表1 試驗(yàn)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(飼喂基礎(chǔ))Table1 Composition and nutrient levels of experimental diets(as-fed basis) %

1.3.2 體組成

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，每桶隨機(jī)取6尾魚(yú)作為全魚(yú)樣品分析體組成。其中，水分含量的測(cè)定采用105℃烘干恒重法;灰分含量的測(cè)定采用馬福爐550℃高溫灼燒法;粗蛋白質(zhì)含量的測(cè)定采用凱氏定氮法;粗脂肪含量的測(cè)定采用索氏抽提法。

1.3.3 血液學(xué)指標(biāo)

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，每桶隨機(jī)取6尾魚(yú)于尾靜脈處采血，取全血樣品和血清樣品每重復(fù)各2份，送江蘇省無(wú)錫市江原醫(yī)院檢測(cè)。全血樣品檢測(cè)白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)、血紅蛋白含量以及紅細(xì)胞壓積，血清樣品檢測(cè)肌酐、總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、膽固醇含量以及堿性磷酸酶活性。

1.3.4 肝臟非特異性免疫指標(biāo)

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，每桶隨機(jī)取6尾魚(yú)的肝臟于-80℃冷凍，備測(cè)肝臟中溶菌酶(LZM)、超氧化物歧化酶(SOD)和過(guò)氧化氫酶(CAT)活性以及丙二醛(MDA)含量。上述指標(biāo)的測(cè)定均采用生物素雙抗體夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)，所用試劑盒均購(gòu)自美國(guó)Assay公司(上海朗頓生物技術(shù)有限公司代理)。

1.4 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)與分析

試驗(yàn)數(shù)據(jù)用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用SPSS 18.0統(tǒng)計(jì)軟件的單因素方差分析(one-way ANOVA)進(jìn)行方差分析，并采用Duncan氏法多重比較檢驗(yàn)組間差異的顯著性，P＜0.05即認(rèn)為有顯著差異。

2 結(jié)果與分析

2.1 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

由表2可知，各組試驗(yàn)魚(yú)的終末體質(zhì)量、增重率、特定生長(zhǎng)率隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加呈現(xiàn)上升的趨勢(shì)，但各組之間差異不顯著(P＞0.05)。各組試驗(yàn)魚(yú)的飼料系數(shù)、成活率、肥滿(mǎn)度、肝體比和內(nèi)臟比無(wú)顯著差異(P＞0.05)。飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)蛋白質(zhì)效率和蛋白質(zhì)沉積率有顯著影響(P＜0.05)。尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的蛋白質(zhì)效率隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加而顯著降低(P＜0.05)，以蛋白質(zhì)水平為25%的組最高，蛋白質(zhì)水平為45%的組最低。尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的蛋白質(zhì)沉積率隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢(shì)，蛋白質(zhì)水平為30%的組顯著高于蛋白質(zhì)水平為35%、40%和45%的組(P＜0.05)，蛋白質(zhì)水平為25%和35%的組顯著高于蛋白質(zhì)水平為40%和45%的組(P＜0.05)，但蛋白質(zhì)水平為25%和30%的組之間差異不顯著(P＞0.05)。

表2 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響Table2 Effects of dietary protein level on growth performance of juvenile Nile tilapia，Oreochromis niloticus

2.2 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)體組成的影響

由表3可知，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)粗脂肪含量有顯著影響(P＜0.05)，而對(duì)全魚(yú)水分、粗蛋白質(zhì)和灰分含量無(wú)顯著影響(P＞0.05)。尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)粗脂肪含量隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加變化趨勢(shì)不明顯，以蛋白質(zhì)水平為25%的組最高，顯著高于其他各組(P＜0.05)，其他各組之間差異不顯著(P＞0.05)。

2.3 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)血液學(xué)指標(biāo)的影響

由表4可知，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)全血中血紅蛋白含量有顯著影響(P＜0.05)，而對(duì)全血中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)以及紅細(xì)胞壓積無(wú)顯著影響(P＞0.05)。尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)全血中血紅蛋白含量隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，蛋白質(zhì)水平為40%的組最高，蛋白質(zhì)水平為25%的組最低，這2組之間差異顯著(P＜0.05)，其他組之間差異不顯著(P＞0.05)。飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)血清中肌酐、總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯、膽固醇含量以及堿性磷酸酶活性均無(wú)顯著影響(P＞0.05)。

表3 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)體組成的影響(濕重基礎(chǔ))Tabe 3 Effects of dietary protein level on body composition of juvenile Nile tilapia，Oreochromis niloticus(wet weight basis)

表4 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)血液學(xué)指標(biāo)的影響Table4 Effects of dietary protein level on hematological indexes of juvenile Nile tilapia，Oreochromis niloticus

2.4 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)肝臟非特異性免疫指標(biāo)的影響

由表5可知，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)肝臟中溶菌酶、過(guò)氧化氫酶活性以及丙二醛含量有顯著影響(P＜0.05)。肝臟中溶菌酶活性以蛋白質(zhì)水平為45%的組為最高，顯著高于蛋白質(zhì)水平為25%的組(P＜0.05)，但與蛋白質(zhì)水平為30%、35%和40%的組相比無(wú)顯著差異(P＞0.05)。肝臟中過(guò)氧化氫酶活性隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，以蛋白質(zhì)水平為25%的組最低，顯著低于蛋白質(zhì)水平為35%和45%的組(P＜0.05);以蛋白質(zhì)水平為35%的組最高，顯著高于其他各組(P＜0.05)。肝臟中丙二醛含量隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加呈現(xiàn)先下降后上升的趨勢(shì)，蛋白質(zhì)水平為30%的組最低，蛋白質(zhì)水平為45%的組最高，顯著高于其他各組(P＜0.05)，其他各組之間差異不顯著(P＞0.05)。飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)肝臟中超氧化物歧化酶活性無(wú)顯著影響(P＞0.05)，但隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加肝臟中超氧化物歧化酶活性呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，蛋白質(zhì)水平為45%的組最低，蛋白質(zhì)水平為30%的組最高。

表5 飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)肝臟非特異性免疫指標(biāo)的影響Table5 Effects of dietary protein level on hepatic non-specific immune indexes of juvenile Nile tilapia，Oreochromis niloticus

3 討論

大量的研究表明魚(yú)類(lèi)的生長(zhǎng)和對(duì)飼料的利用效率受飼料蛋白質(zhì)水平影響[18-20]。然而，本試驗(yàn)結(jié)果表明，以增重率、特定生長(zhǎng)率、成活率為指標(biāo)，在本試驗(yàn)設(shè)計(jì)的飼料蛋白質(zhì)水平范圍(25%～45%)內(nèi)，當(dāng)飼料脂肪(魚(yú)油和豆油的等量混合物)水平為9%(分析值為9.52%)時(shí)，尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能不受飼料蛋白質(zhì)水平的影響，飼料中蛋白質(zhì)水平為25%(分析值為24.83%)即可滿(mǎn)足尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)需要，同時(shí)蛋白質(zhì)效率和蛋白質(zhì)沉積率均較高。本試驗(yàn)得出的尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的蛋白質(zhì)需求量低于 Hafedh[19]和 Abdel-Tawwab等[5]報(bào)道的結(jié)果(35% ～45%)，這可能與本試驗(yàn)設(shè)計(jì)的飼料脂肪水平較高有關(guān)。本試驗(yàn)設(shè)計(jì)的飼料脂肪水平為9%(分析值為9.52%)，高于尼羅羅非魚(yú)對(duì)脂肪的最低需求量(5.1%)，得出的蛋白質(zhì)需求量相對(duì)較低，表明通過(guò)提高飼料中脂肪水平，可以在不影響生長(zhǎng)的情況下起到降低尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)蛋白質(zhì)需求量的作用。在大西洋鮭魚(yú)[21-23]和鯰魚(yú)[24]上的研究也得出提高飼料中脂肪水平可以降低魚(yú)類(lèi)對(duì)蛋白質(zhì)的需求量，即脂肪可以對(duì)蛋白質(zhì)起到節(jié)約作用。

本試驗(yàn)中，尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)全魚(yú)粗脂肪含量受飼料蛋白質(zhì)水平的影響顯著，其中蛋白質(zhì)水平為25%的組全魚(yú)粗脂肪含量顯著高于其他各組;而全魚(yú)的水分、粗蛋白質(zhì)和灰分含量各組間差異不顯著。本試驗(yàn)設(shè)計(jì)的各試驗(yàn)飼料是保持等脂水平的，高蛋白質(zhì)飼料含有較低的淀粉水平(表1);相反，低蛋白質(zhì)飼料含有較高的淀粉水平。在對(duì)其他魚(yú)類(lèi)的研究中發(fā)現(xiàn)，飼料可消化淀粉水平較高會(huì)引起糖原在肝臟中積累，造成肝體比升高[25-27]。同時(shí)，Yang 等[28]對(duì)銀鱸的研究發(fā)現(xiàn)，腸系膜脂肪含量和肝體比會(huì)伴隨著飼料淀粉水平的減少而降低。然而，本試驗(yàn)中肝體比各組間不存在顯著差異，由此推斷攝食低蛋白質(zhì)飼料的尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)能夠有效利用過(guò)多的糖原轉(zhuǎn)化成魚(yú)體脂肪，即具有高效利用飼料中淀粉的能力。

本試驗(yàn)中，隨著飼料蛋白質(zhì)水平的增加，尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)全血中血紅蛋白含量呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，這與Kim等[29]報(bào)道的牙鲆全血中血紅蛋白含量伴隨著飼料蛋白質(zhì)水平的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)相同。本試驗(yàn)中，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)全血中白細(xì)胞計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞計(jì)數(shù)以及紅細(xì)胞壓積均無(wú)顯著影響，這與Welker等[30]報(bào)道的相同規(guī)格健康羅非魚(yú)血液學(xué)指標(biāo)相似，由此可知，25%的飼料蛋白質(zhì)水平已經(jīng)可以滿(mǎn)足血液細(xì)胞的形成和發(fā)育。由于血紅蛋白含量、紅細(xì)胞壓積和紅細(xì)胞計(jì)數(shù)同魚(yú)類(lèi)的非特異性免疫功能具有一定的相關(guān)性，能夠反映魚(yú)類(lèi)健康狀況，高含量的血紅蛋白被認(rèn)為是動(dòng)物健康的表現(xiàn)[31]。因此，在本試驗(yàn)中，血紅蛋白的上升趨勢(shì)表明飼料蛋白質(zhì)水平較高時(shí)對(duì)魚(yú)類(lèi)的健康具有促進(jìn)作用。

正常情況下，魚(yú)類(lèi)血清生化成分含量受神經(jīng)和內(nèi)分泌調(diào)節(jié)保持相對(duì)穩(wěn)定，可以作為機(jī)體健康狀況的評(píng)價(jià)指標(biāo)。本試驗(yàn)中，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)血清中肌酐、總蛋白、白蛋白、球蛋白、甘油三酯和膽固醇含量以及堿性磷酸酶活性均無(wú)顯著影響，且這些血液生化指標(biāo)的含量都在健康范圍[32]之內(nèi)。由此可見(jiàn)，25%的飼料蛋白質(zhì)水平即可滿(mǎn)足尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)機(jī)體正常的生理代謝需求。

魚(yú)體中的溶菌酶是一類(lèi)有溶菌活性的堿性蛋白，在水產(chǎn)動(dòng)物抵抗病原微生物感染中具有重要作用[33-34]，其活性的高低是衡量機(jī)體免疫狀態(tài)的指標(biāo)之一。丙二醛是脂質(zhì)過(guò)氧化物的最終分解產(chǎn)物之一，具有很強(qiáng)的生物毒性，其含量能直接反映機(jī)體脂質(zhì)過(guò)氧化程度，并間接反映機(jī)體抗氧化能力和細(xì)胞損傷程度。本試驗(yàn)中，蛋白質(zhì)水平為25%的組試驗(yàn)魚(yú)肝臟中溶菌酶活性顯著低于其他各組，而在其他各組間不存在顯著差異。同時(shí)，蛋白質(zhì)水平為25%的組試驗(yàn)魚(yú)肝臟中丙二醛含量較高，顯著高于蛋白質(zhì)水平為45%的組。超氧化物歧化酶是生物機(jī)體內(nèi)重要的抗氧化酶之一，可以減弱活性氧自由基對(duì)機(jī)體的損傷。本試驗(yàn)中，飼料蛋白質(zhì)水平對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)肝臟中超氧化物歧化酶活性未產(chǎn)生顯著影響。過(guò)氧化氫酶能催化H2O2等生成H2O和O2[35]，防止自由基對(duì)細(xì)胞的毒害，是機(jī)體內(nèi)活性氧自由基的天然清除劑。肝臟中過(guò)氧化氫酶活性隨飼料蛋白質(zhì)水平的增加呈現(xiàn)先上升后下降的趨勢(shì)，其中蛋白質(zhì)水平為25%的組試驗(yàn)魚(yú)肝臟中過(guò)氧化氫酶活性顯著低于蛋白質(zhì)水平為35%和45%的組。上述結(jié)果說(shuō)明尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的非特異性免疫功能在一定程度上受到了飼料蛋白質(zhì)水平的影響，適當(dāng)提高飼料蛋白質(zhì)水平可提高機(jī)體抗病能力。

4 結(jié)論

①當(dāng)飼料脂肪水平為9%(分析值為9.52%)時(shí)，飼料蛋白質(zhì)水平(25% ～45%)對(duì)尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能、體組成和血液學(xué)指標(biāo)影響不大，25%的飼料蛋白質(zhì)水平即可滿(mǎn)足體質(zhì)量為(4.70±0.01)g的尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)需求。

②適當(dāng)提高飼料蛋白質(zhì)水平可在一定程度上提高尼羅羅非魚(yú)幼魚(yú)的非特異性免疫功能，主要表現(xiàn)在提高肝臟溶菌酶和過(guò)氧化氫酶活性上。

[1]楊弘.我國(guó)羅非魚(yú)產(chǎn)業(yè)現(xiàn)狀及產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系建設(shè)[J].中國(guó)水產(chǎn)，2010(9):6-10.

[2]楊弘，祝璟琳，單航宇.我國(guó)羅非魚(yú)產(chǎn)業(yè)發(fā)展和思考[J].海洋與漁業(yè)，2011(11):47-50.

[3]EL-SAYED A F M，GARLING D L，Jr.Carbohydrate-to-lipid ratios in diets for tilapia fingerlings[J].Aquaculture，1988，73:157-163.

[4]SIDDIQUI A Q，HOWLANDER M S，ADAM A A.Effects of dietary protein levels on growth，diet conversion and protein utilization in fry and young Nile tilapia，Oreochromis niloticus[J].Aquaculture，1988，70:63-73.

[5]ABDEL-TAWWAB M，AHMAD M H，KHATTAB Y A E，et al.Effect of dietary protein level，initial body weight，and their interaction on the growth，feed utilization，and physiological alterations of Nile tilapia，Oreochromis niloticus(L.)[J].Aquaculture，2010，298:267-274.

[6]HANLEY F.Effects of feeding supplementary diets containing varying levels of lipid on growth，food conversion，and body composition of Nile tilapia，Oreochromis niloticus(L.)[J].Aquaculture，1991，93:323-334.

[7]NRC.Nutrient requirements of poultry[S].Washington，D.C.:National Academy Press，1993.

[8]BRECKA B J，KOHLER C C，WAHL D H.Effects of dietary protein concentration on growth，survival，and body composition of muskellunge Esox musquinongy and tiger muskellunge Esox masquinongy×E.luscius fingerlings[J].Journal of the World Aquaculture Society，1995，26:416-425.

[9]SHIAU S Y，LAN C W.Optimum dietary protein level and protein to energy ratio for growth of grouper(Epinephelus malabaricus)[J].Aquaculture，1996，145:259-266.

[10]PéRES A，ZAMBONINO INFANTE J L，CAHU C L.Dietary regulation of activities and mRNA levels of trypsin and amylase in sea bass(Dicentrarchus labrax)larvae[J].Fish Physiology and Biochemistry，1998，19:145-152.

[11]EGUIA R V，KAMARUDIN M S，SANTIAGO C B.Growth and survival of river catfish Mystus nemurus(Cuvier and Valenciennes)larvae fed isocaloric diets with different protein levels during weaning[J].Journal of Applied Ichthyology，2000，16:104-109.

[12]CHAKRABORTY S C，ROSS L G，ROSS B.The effect of dietary protein level and ration level on excretion of ammonia in common carp，Cyprinus carpio[J].Comparative Biochemistry and Physiology Part A:Physiology，1992，103:801-808.

[13]ENGIN K，CARTER C G.Ammonia and urea excretion rates of juvenile Australian short-finned eel(Anguilla australis australis)as influenced by dietary protein level[J].Aquaculture，2001，194:123-136.

[14]SUN L，CHEN H，HUANG L.Growth，faecal production，nitrogenous excretion and energy budget of juvenile yellow grouper(Epinephelus awoara)relative to ration level[J].Aquaculture，2007，264:228-235.

[15]YANG S D，LIOU C H，LIU F G.Effects of dietary protein level on growth performance，carcass composition and ammonia excretion in juvenile silver perch(Bidyanus bidyanus)[J].Aquaculture，2002，213:363-372.

[16]TIBBETTS S，LALL S P，ANDERSON D M.Dietary protein requirement of juvenile American eel(Anguilla rostrata)fed practical diets[J].Aquaculture，2000，186:145-155.

[17]JAUNCEY K.Nutritional requirement[M]//BEVERIDGE M C M，MCANDREW B J.Tilapias:biology and exploitation.London:Kluwer Academic Press，2000:327-375.

[18]董曉慧，耿旭，郭云學(xué)，等.奧尼羅非魚(yú)仔稚魚(yú)飼料中適宜蛋白質(zhì)水平的研究[J].中國(guó)飼料，2009(7):29-35.

[19]HAFEDH Y S A.Effects of dietary protein on growth and body composition of Nile tilapia，Oreochromis niloticus L.[J].Aquaculture Research，1999，30(5):385-393.

[20]CHOU R L，SU M S，CHEN H Y.Optimal dietary protein and lipid levels for juvenile cobia(Rachycentron canadum)[J].Aquaculture，2001，193:81-89.

[21]EINEN O，ROEM A J.Dietary protein/energy ratios for Atlantic salmon in relation to fish size:growth，feed utilization and slaughter quality[J].Aquaculture Nutrition，1997，3:115-126.

[22]REFSTIE S，STOREBAKKEN T，BAEVERFJORD G，et al.Long-term protein and lipid growth of Atlantic salmon(Salmo salar)fed diets with partial replacement of fish meal by soy proteins products at medium or high lipid level[J].Aquaculture，2001，193:91-106.

[23]GRISDALE-HELLAND B，SHEARER K D，GATLIN D M，et al.Effects of dietary protein and lipid levels on growth，protein digestibility，feed utilization and body composition of Atlantic cod(Cadus morhua)[J].Aquaculture，2008，283:156-162.

[24]KIM L O，LEE S M.Effects of the dietary protein and lipid levels on growth and body composition of bagrid catfish，Pseudobagrus fulvidraco[J].Aquaculture，2005，243:323-329.

[25]DANIELS W H，ROBINSON E H.Protein and energy requirements of juvenile red drum(Sciaenops ocellatus)[J].Aquaculture，1986，53:243-252.

[26]HIDALGO F，ALLIOT E.Influence of water temperature on protein requirement and protein utilization in juvenile sea bass，Dicentrachus labrax[J].Aquaculture，1988，72:115-129.

[27]BROWN M L，NEMATIPOUR G R，GATLIN D M.Dietary protein requirement of juvenile sunshine bass at different salinities[J].The Progressive Fish-Culturist，1992，54:148-156.

[28]YANG S D，LIOU C H，LIU F G.Effects of dietary protein level on growth performance，carcass composition and ammonia excretion in juvenile silver perch(Bidyanus bidyanus)[J].Aquaculture，2002，213:363-372.

[29]KIM K W，WANG X J，CHOI S M，et al.Evaluation of optimum dietary protein-to-energy ratio in juvenile olive flounder Paralichthys olivaceus(Temminck et Schlegel)[J].Aquaculture Research，2004，35(3):250-255.

[30]WELKER T L，LIM C，YILDIRIM-AKSOY M，et al.Growth，immune function，and disease and stress resistance of juvenile Nile tilapia(Oreochromis niloticus)fed graded levels of bovine lactoferrin[J].Aquaculture，2007，262(1):156-162.

[31]BALDI A，BONTEMPO V，DELL’ORTO V，et al.Effects of dietary chromium-yeast in weaning-stressed piglets[J].Canadian Journal of Animal Science，1999，79(3):369-374.

[32]聶國(guó)興，明紅，鄭俊林，等.木聚糖酶對(duì)尼羅羅非魚(yú)血液生理生化指標(biāo)的影響[J].大連水產(chǎn)學(xué)院學(xué)報(bào)，2009，22(5):361-365.

[33]HIKIMA S，HIKIMA J，ROJTINNAKORN J，et al.Characterization and function of kuruma shrimp lysozyme possessing lytic activity against Vibrio species[J].Gene，2003，316:187-195.

[34]HOFFMANN J A，KAFATOS F C，JANEWAY C A，et al.Phylogenetic perspectives in innate immunity[J].Science，1999，284:1313-1318.

[35]REYES-BECERRIL M，TOVAR-RAMíREZ D，ASCENCIO-VALLE F，et al.Effects of dietary live yeast Debaryomyces hansenii on the immune and antioxidant system in juvenile leopard grouper Mycteroperca rosacea exposed to stress[J].Aquaculture，2008，280(1/2/3/4):39-44.The results indicate that 25%dietary protein level can meet the requirement of growth for juvenile Nile tilapia in the condition of 9%dietary fat level，and properly increasing dietary protein level can improve the hepatic non-specific immune function to some extent.[Chinese Journal of Animal Nutrition，2012，24(12):2384-2392]