電感耦合等離子質(zhì)譜法(ICP－MS)法測定茵梔黃注射液中有害元素鉛、砷、鎘、汞、銅的含量

王 勇，陳民輝，曹 玲

(1.江蘇省食品藥品檢驗(yàn)所，江蘇南京210008;2.中國藥科大學(xué)天然藥化教研室，江蘇 南京210009)

電感耦合等離子質(zhì)譜法(ICP－MS)法測定茵梔黃注射液中有害元素鉛、砷、鎘、汞、銅的含量

王 勇1，2，陳民輝1，曹 玲1

(1.江蘇省食品藥品檢驗(yàn)所，江蘇南京210008;2.中國藥科大學(xué)天然藥化教研室，江蘇 南京210009)

建立了電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP－MS)測定茵梔黃注射液中Pb、As、Cd、Hg、Cu 5種元素的方法。樣品經(jīng)微波消解后，直接用ICP－MS同時(shí)測定上述5種元素，結(jié)果5種元素的檢出限分別在5～1250 ng/L之間;線性良好，線性相關(guān)系數(shù)均為r≥0.999;精密度RSD＜3.5%;回收率在95.7% ～107.5%之間。方法操作簡便、分析速度快、靈敏度高，各項(xiàng)分析性能指標(biāo)均達(dá)到要求，適用于茵梔黃注射液中有害元素的測定。

微波消解;ICP－MS;茵梔黃注射液;有害元素鉛、砷、鎘、汞、銅

茵梔黃注射液主要由茵陳提取物、梔子提取物、黃芩甙、金銀花提取物組成，具有清熱，解毒，利濕，退黃的功效。臨床主要用于肝膽濕熱，面目悉黃，胸脅脹痛，惡心嘔吐，小便黃赤。急性、遷延性、慢性肝炎的治療［1］。近年來中藥注射劑臨床運(yùn)用十分廣泛，同時(shí)相關(guān)的不良反應(yīng)也時(shí)有發(fā)生，所以有關(guān)中藥注射劑安全性的研究引起了越來越廣泛的關(guān)注。在中藥注射劑安全性的研究中，中藥注射劑中有害元素的測定是十分重要的組成部分。但是，目前對各元素的測定，往往采用單一元素測定法，手續(xù)繁瑣，分析時(shí)間長。微波消解－電感耦合等離子體質(zhì)譜(ICP－MS)法同時(shí)測定中藥注射劑中的Pb、As、Cd、Hg、Cu，操作簡單、快速、基體干擾少，準(zhǔn)確度、靈敏度高，結(jié)果可靠，已成為近年來元素分析的重要手段。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器和試劑

Angilent 7500cx電感耦合等離子體質(zhì)譜儀;Mars高壓微波消解儀(美國CEM公司)。硝酸(優(yōu)級醇，南京化學(xué)試劑有限公司);銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號：6001);鉛單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號：6001);砷單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號：6041);汞單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號：7111);鎘單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號：6001);銦單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(100 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號：7001);鍺單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液(1000 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號：07007);水中鉍(100 μg/mL，國家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)研究中心，批號：7121);水中金(0.1 g/L，上海計(jì)量測試技術(shù)研究院，批號：0908);水為經(jīng) Millipore Milli－Q水處理系統(tǒng)處理后的去離子水。

1.2 儀器工作參數(shù)

表1 ICP－MS儀器工作參數(shù)

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 內(nèi)標(biāo)溶液的制備

精密量取鍺、銦、鉍單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用水稀釋制成每1 mL各含1 μg的混合溶液，即得。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)金溶液的制備

精密量取水中金標(biāo)準(zhǔn)溶液適量用水稀釋制成每1 mL含1 μg的溶液，即得。

1.3.3 供試品溶液的制備

精密加入茵梔黃注射液2 mL，置微波消解罐中，加入硝酸5 mL，置微波消解儀中消解至完全，冷卻，取出，精密加入標(biāo)準(zhǔn)金溶液0.2 mL，用水稀釋至50 mL，搖勻，即得。同時(shí)同法做試劑空白。

1.3.4 標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密量取鉛;砷;鎘元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液及銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成每1 mL含鉛，砷 0 ng、1 ng、5 ng、10 ng、20 ng，含鎘 0ng、0.5 ng、2.5 ng、5 ng、10 ng，含銅 0 ng、50 ng、100 ng、200 ng、500 ng的系列濃度混合溶液。

精密量取汞元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量，用10%硝酸溶液稀釋制成每1 mL分別含汞0 ng、0.2 ng、0.5 ng、1 ng、2 ng、5 ng 的溶液。

內(nèi)標(biāo)溶液與標(biāo)準(zhǔn)溶液同時(shí)注入儀器，依次測定，以測量值為縱坐標(biāo)，濃度為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性方程：結(jié)果見表2

表2 標(biāo)準(zhǔn)曲線測定結(jié)果

結(jié)果顯示：鉛在0～20 ng/mL;砷在0～20 ng/mL;鎘在0～10 ng/mL;銅在0～500 ng/mL;汞在0～5 ng/mL濃度范圍內(nèi)線性良好。

1.3.5 檢出限

檢出限(見表2)測定方法：以樣品空白溶液所產(chǎn)生信號響應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)偏差(δ)3倍所對應(yīng)的待測元素濃度表示檢出限：檢出限(ng/L)=3δ

1.3.6 進(jìn)樣精密度試驗(yàn)

選取每1 m含鉛、砷、鎘、銅分別為5 ng、5 ng、2.5 ng、100 ng及含汞1 ng的標(biāo)準(zhǔn)溶液及含汞1 ng，重復(fù)進(jìn)樣5次，記錄測量值，分別計(jì)算RSD為0.7%(Pb);0.6%(As);0.4%(Cd);0.7%(Cu);1.2%(Hg)。結(jié)果表明，儀器進(jìn)樣精密度良好。

1.3.7 加樣回收率及重復(fù)性

分別精密加入茵梔黃注射液2 mL，置微波消解罐中，分別精密加入鉛元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液1.2 mL，鎘元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.3 mL，銅單元素標(biāo)準(zhǔn)溶液0.2 mL，汞元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液0.4 mL，加入硝酸5 mL，置微波消解儀中消解至完全，冷卻，取出，精密加入標(biāo)準(zhǔn)金溶液0.2 mL，用水稀釋至50 mL，搖勻，即得。同時(shí)同法做試劑空白，平行做5份樣。

分別精密加入茵梔黃注射液1 mL，置微波消解罐中，精密加入砷元素標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液10 μL，加入硝酸5 mL，置微波消解儀中消解至完全，冷卻，取出，精密加入標(biāo)準(zhǔn)金溶液0.2 mL，用水稀釋至50 mL，搖勻，即得。同時(shí)同法做試劑空白，平行做5份樣。

測定法。將內(nèi)標(biāo)溶液與樣品溶液同時(shí)注入儀器，依次測定，記錄測量值，從標(biāo)準(zhǔn)曲線上讀出各元素的含量，并計(jì)算各元素的測得量，根據(jù)各元素的加入量以及注射液中各元素的已知含量計(jì)算回收率及RSD(%)。結(jié)果見表3

表3 樣品加樣回收率測定結(jié)果

結(jié)果表明：鉛、砷、鎘、銅、汞的平均回收率分別為107.5%;95.7%;102.6%;98.6%;95.8%，RSD分別為1.5%;3.5%;1.1%;4.2%;0.5%。表明該方法測定茵梔黃注射液中鉛、砷、鎘、銅、汞含量的結(jié)果準(zhǔn)確，重復(fù)性較好。

2 樣品的測定

按上述的測定方法，用ICP－MS分別測定了3個(gè)廠家市售131批茵梔黃注射液中中鉛、砷、鎘、銅、汞元素含量，鉛：均小于檢出限;砷：0.010 6～0.137 mg/kg;鎘：0.000 0116～0.002 29 mg/kg;銅：0.000 223～0.013 7 mg/kg;汞：均小于檢出限。

3 討論

隨著臨床使用的增加，中藥注射劑的安全性也越來越受到關(guān)注，鉛、鎘、砷、汞為代表的重金屬及有害元素是中藥注射劑中最為重要的外源性污染物之一。其毒性主要表現(xiàn)為慢性中毒，砷、鎘有明確的致癌、致畸、致突變作用。而且中藥注射劑不經(jīng)消化道直接進(jìn)入體液，風(fēng)險(xiǎn)更大，所以對中藥注射劑中重金屬及有害元素進(jìn)行限量檢查具有十分重要的意義。

本實(shí)驗(yàn)采用目前痕量分析領(lǐng)域中最先進(jìn)的電感耦合等離子體質(zhì)譜法(ICP－MS)測定茵梔黃注射液中的 Pb、As、Cd、Hg、Cu，操作簡單、快速、基體干擾少，準(zhǔn)確度、靈敏度高，結(jié)果可靠且可同時(shí)完成多元素的測定，具有極高的檢測效率。

本文的研究結(jié)果不僅為茵梔黃注射液中的Pb、As、Cd、Hg、Cu5種元素的測定提供了科學(xué)的方法，也為其質(zhì)量控制及重金屬及有害元素限度制定提供了數(shù)據(jù)支持。

［1］ 國家藥典編委會(huì).中國藥典(一部)［S］.北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：871.

Determination of Harmful Elements Pb，As，Cd，Hg，Cu in Yinzhihuang Injection by Inductively Coupled Plasma－MS Spectrometry

Wang Yong1，2，Chen Minhui1，Cao Ling1
(1.Jiangsu Institute of Food and Drug Control，Nanjing 210008，China;2.Department of Phytochemistry，China Pharmaceutical University，Nanjing 210009，China)

A method for determination of Pb，As，Cd，Hg，Cu in Yinzhihuang injection by ICP － MS was established.The five elements were detected simultaneously after the samples digested by microwave digestion.The detection limits of these elements range from 5 ng/L to 1250 ng/L，linear correlation r≥0.999.The precision was ＜3.5%，and recoveries of samples were of the range 95.7% ～107.5% .This method is simple，fast，high sensitivity，which can meet the demand for harmful element analysis in Yinzhihuang injection

microwave digestion;ICP － MS;Yinzhihuang injection;harmful elements Pb，As，Cd，Hg，Cu

R917

A

1006－9690(2012)03－0026－03

10.3969/j.issn.1006－9690.2012.03.008

2011－10－18

王勇(1982－)，男，在讀博士，主要從事天然藥物研究與開發(fā)與質(zhì)量控制。E－mail：wangyong06@hotmail.com