注射用凱西萊在不同輸液中穩(wěn)定性研究＊

楊 輝，覃志高，陳建琴，莫 迎 ，許凱柔

(1.廣西壯族自治區(qū)南寧食品藥品檢驗(yàn)所，廣西 南寧 530001;2.廣西中醫(yī)學(xué)院2006級實(shí)習(xí)生，廣西 南寧 530001)

凱西萊(tiopronin)化學(xué)名為N－(2－巰基丙?；?－甘氨酸，為20世紀(jì)60年代日本研制的一種甘氨酸衍生物，其側(cè)鏈上的游離巰基被認(rèn)為是人體新陳代謝的保護(hù)劑[1]。1998年在我國上市，主要作為化療及放療保護(hù)劑、保肝劑及重金屬解毒劑應(yīng)用于臨床。隨著其臨床的廣泛應(yīng)用，不良反應(yīng)的報(bào)道也逐漸增多，國內(nèi)報(bào)道的不良反應(yīng)發(fā)生率為3.5% ～17%[2]，目前，其不良反應(yīng)機(jī)理尚不清楚。本試驗(yàn)旨在通過考察凱西萊與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液及氯化鈉注射液配伍后，在各時(shí)間點(diǎn)對其外觀、pH、不溶性微粒數(shù)及含量等變化情況進(jìn)行分析，從藥品質(zhì)量方面評價(jià)凱西萊與不良反應(yīng)發(fā)生的關(guān)系，為規(guī)范臨床操作及保證臨床安全用藥提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

LC－20AB型高效液相色譜儀(日本島津公司);威瑪色譜數(shù)據(jù)工作站;AE240電子天平(梅特勒－托利多儀器＜上海＞有限公司;FE20實(shí)驗(yàn)室pH計(jì)(梅特勒－托利多儀器＜上海＞有限公司;ZWF－J6型激光注射劑微粒分析儀(天津天河醫(yī)療儀器有限公司);HH－S6型數(shù)顯恒溫水浴鍋(金壇市醫(yī)療儀器廠)。注射用凱西萊及專用溶劑(河南省新誼藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格為0.1 g/支，批號(hào)為091103－2);5%碳酸氫鈉注射液(河南省新誼藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格為2 mL/支，pH=8.5，批號(hào)為090808);5%葡萄糖注射液(安徽豐原藥業(yè)股份有限公司，規(guī)格為100 mL∶5 g，批號(hào)為090425134)、10%葡萄糖注射液(廣西南寧百會(huì)藥業(yè)集團(tuán)有限公司，規(guī)格為100 mL∶10 g，批號(hào)為0908002);氯化鈉注射液(廣西科宏藥業(yè)有限公司，規(guī)格為500mL∶4.5g，批號(hào)為09092703);甲醇為色譜純，高純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 樣品溶液配制

為便于比較，按注射用凱西萊使用說明書要求，均配制為每250 mL含0.1 g的臨床常用質(zhì)量濃度。取注射用凱西萊3支，分別加入隨藥附帶的專用溶劑(5%碳酸氫鈉注射液，pH=8.5)2 mL溶解，然后分別加入到250 mL的5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液中，充分搖勻，經(jīng)微孔濾膜(0.45 μm)過濾后制成A，B，C配伍溶液，備用。

2.2 外觀觀察

分別取在 10，15，20，25，30，35，40 ℃條件下配制的配伍溶液A，B，C 適量，以配伍的相應(yīng)溶劑為空白溶液，分別于 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 時(shí)觀察其外觀。結(jié)果配伍、空白溶液均透明澄清、無顏色變化、無沉淀、無氣體生成。

2.3 不溶性微粒測定

分別取在 10，15，20，25，30，35，40 ℃條件下配制的配伍溶液A，B，C 適量，以配伍的相應(yīng)溶劑為空白溶液，分別于 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 時(shí)取各空白、配伍溶液，翻轉(zhuǎn) 20 次，使溶液混勻，立即小心開啟容器，先倒出部分供試液沖洗開啟口及取樣杯，將供試液倒入取樣瓶中，超聲處理(80～120 W)30 s脫氣或靜置于取樣器中，依法測定[3]。結(jié)果配伍液放置不同時(shí)間、溫度與空白溶液不溶性微粒無顯著性差異。

2.4 pH 測定

取5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液及配伍溶液 A，B，C 適量，在 10，20，30，40 ℃條件下，測定各自在 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 時(shí)的 pH。結(jié)果見表 1，配伍溶液的 pH隨著時(shí)間、溫度的升高逐漸增大。

表1 配伍溶液放置不同時(shí)間、不同溫度對pH值的影響(n=3)

2.5 含量測定

鄒雪等[4]的研究表明，用高效液相色譜法測定注射用凱西萊中的凱西萊，質(zhì)量濃度線性范圍在0.1～1.0 mg/mL。而本研究僅考察凱西萊在不同溶劑的含量隨著時(shí)間、溫度而變化的情況，故試驗(yàn)擬訂開始時(shí)的含量為100%，而后各時(shí)間點(diǎn)的峰面積與該點(diǎn)峰面積的比值即得出各時(shí)間點(diǎn)樣品溶液中凱西萊的相對百分含量。

色譜條件:色譜柱為 Phenomenex C18柱(150 mm×4.6 mm，5 μm);流動(dòng)相為甲醇 － 水(5 ∶95)，用磷酸調(diào) pH 至 2.5;柱溫30 ℃;檢測波長 205 nm;流速 1.0 mL/min;進(jìn)樣量 20 μL。理論板數(shù)按凱西萊峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000。

測定:取配伍溶液 A，B，C 適量，在 10，15，20，25，30，35，40 ℃條件下，測定各自在 0，0.5，1.0，3.0，6.0，12.0 h 時(shí)的峰面積。結(jié)果見表2。配伍溶液A，B，C中凱西萊在不同溶劑、同一檢測點(diǎn)，隨著時(shí)間延長和溫度升高，其含量發(fā)生顯著變化，表明注射用凱西萊隨著溫度的升高和時(shí)間的延長水解或氧化反應(yīng)越嚴(yán)重。

3 討論

由試驗(yàn)結(jié)果可知，臨床采用5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液配伍溶劑對凱西萊進(jìn)行配伍擴(kuò)容，在相同條件下，其配伍溶液之間的外觀、不溶性微粒、pH及含量等均無顯著性差異，說明臨床采用5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液配伍溶劑是合理可靠的。

凱西萊含有巰基、羧基，為酸性化合物，較容易被氧化[5]。在臨床應(yīng)用上，其治療方案也復(fù)雜繁多，對于藥物穩(wěn)定性的研究一般限于6 h或8 h內(nèi)，但因?yàn)閯P西萊的療程往往有4周，時(shí)常會(huì)出現(xiàn)先滴注用凱西萊配伍溶液一段時(shí)間，然后換成其他輸液，最后再換回注射用凱西萊配伍溶液的治療方案，大大延長了注射用凱西萊配伍溶液的使用時(shí)間，有時(shí)甚至超過12 h，故本次研究時(shí)間設(shè)為12 h。從表2可以看出，隨著配伍后存放時(shí)間的延長，配伍液中凱西萊的含量明顯下降。筆者認(rèn)為，導(dǎo)致凱西萊含量迅速降低的原因，可能與該藥發(fā)生水解或氧化反應(yīng)有關(guān)，反應(yīng)所生成的物質(zhì)化學(xué)結(jié)構(gòu)不明，在本試驗(yàn)條件下并未檢測到雜質(zhì)峰。但從凱西萊結(jié)構(gòu)分析，其分解產(chǎn)物可能是小分子的物質(zhì)。因此，配伍溶液在放置不同溫度和時(shí)間后在外觀上無明顯改變，不溶性微粒數(shù)也未見明顯增加。試驗(yàn)結(jié)果顯示，凱西萊與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液配伍后存在一定的不穩(wěn)定性，提示臨床使用該藥時(shí)，應(yīng)現(xiàn)配現(xiàn)用，最好控制在1 h內(nèi)滴完。同時(shí)建議，國家食品藥品監(jiān)督管理部門對現(xiàn)行的藥品使用說明書重新考察和修訂，對配伍溶液的使用時(shí)間加以警示，給予規(guī)范，以確保臨床用藥的安全、有效。

表2 配伍溶液放置不同時(shí)間和溫度對凱西萊含量的影響(相對百分含量，%)

本次研究設(shè)置了不同的溫度點(diǎn)進(jìn)行考察，根據(jù)化學(xué)反應(yīng)的有關(guān)反應(yīng)速度原理[6]，溫度每升高10℃，反應(yīng)速度則增加2～4倍。從表3看，隨著溫度升高，注射用凱西萊配伍溶液的氧化分解速度會(huì)進(jìn)一步增大，并在試驗(yàn)中得以證實(shí)。提示臨床使用時(shí)，應(yīng)注意環(huán)境溫度的影響，在溫度較高的地區(qū)和季節(jié)，配伍溶液的使用時(shí)間的控制就顯得更為重要。

綜上所述，凱西萊與5%葡萄糖注射液、10%葡萄糖注射液、氯化鈉注射液配伍后，隨著放置時(shí)間的延長，溫度的升高，含量迅速下降，導(dǎo)致藥物療效降低，發(fā)生不良反應(yīng)的概率增大，試驗(yàn)結(jié)果對臨床安全合理使用凱西萊具有一定的參考價(jià)值。

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