HK和GOD法檢測(cè)口服葡萄糖耐量試驗(yàn)結(jié)果的差異研究

李立和，常玉芝，李 錚，劉 冰，魏志斌

(1.天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院檢驗(yàn)科，天津 301800;2.天津醫(yī)科大學(xué)檢驗(yàn)學(xué)院，天津 300203)

口服葡萄糖耐量試驗(yàn)(oral glucose tolerance test，OGTT)是檢查人體血糖調(diào)節(jié)功能的一種方法。臨床上對(duì)癥狀不明顯的患者可采用OGTT來判斷有無糖代謝異常。OGTT的意義在于其能發(fā)現(xiàn)哪些空腹或餐后血糖高于正常而達(dá)不到診斷標(biāo)準(zhǔn)的糖尿病患者，可盡早發(fā)現(xiàn)輕型糖尿病患者[1]。

材料和方法

一、研究對(duì)象

2009年10月至2011年3月天津醫(yī)科大學(xué)寶坻臨床學(xué)院糖尿病門診患者377例，年齡32～65歲，男194例，女183例，其中空腹血糖受損(IFG)80例、糖耐量減低(IGT)64例、糖尿病(DM)109例;非糖尿病(NGT)患者90例，男49例，女41例，年齡32～65歲。診斷標(biāo)準(zhǔn)符合1997年美國糖尿病協(xié)會(huì)(ADA)對(duì)糖尿病的最新診斷標(biāo)準(zhǔn)[2]。

二、試劑

GOD法試劑、HK法試劑分別由浙江伊利康生物技術(shù)有限公司、北京利德曼生化股份有限公司提供，批號(hào)分別為20091012、20100122。葡萄糖注射液由天津大冢制藥有限公司提供，批號(hào)為20110224。口服葡萄糖由華北制藥集團(tuán)有限公司提供，批號(hào)為20100512。高、低質(zhì)控血清由上海復(fù)興長(zhǎng)征醫(yī)學(xué)科學(xué)有限公司提供，批號(hào)分別為403UE、582UN。

三、儀器

日本OLYMPUS AU2700全自動(dòng)生化分析儀;托盤天平由上海分析儀器二廠生產(chǎn)。

四、方法

將進(jìn)行OGTT的患者分為3組。(1)A組:將75 g葡萄糖溶于300 mL溫開水中，令受檢者一次服下;(2)B組:口服150 mL 0.5 g/mL葡萄糖注射液，令受檢者一次服下;(3)C組:將75 g葡萄糖溶于300 mL溫開水中，放置過夜，令受檢者一次服下。3組分別于空腹及服用后30、60、120、180 min各抽血1次，分離血清分別用HK法和GOD法測(cè)定患者血糖濃度，同時(shí)測(cè)定質(zhì)控血清。比較2種葡萄糖測(cè)定方法在2組中各時(shí)段血糖結(jié)果的差異。

五、統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

應(yīng)用NOSA V2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件統(tǒng)計(jì)，HK法和GOD法測(cè)定同一組血糖比較用配對(duì)t檢驗(yàn)。

結(jié) 果

一、HK法和GOD法測(cè)定的質(zhì)控血清均在控，其變異系數(shù)(CV)見表1。

二、HK法和 GOD法測(cè)定 A、B、C 3組患者OGTT結(jié)果比較見表2～4。A組中，空腹血糖2種方法測(cè)定結(jié)果無明顯差異(P＞0.05)，而在30、60、120、180 min時(shí)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＜0.05)。在 B、C組中，各時(shí)段 HK法和 GOD法測(cè)定結(jié)果之間差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。

表1 HK法和GOD法測(cè)定室內(nèi)質(zhì)控血清的結(jié)果

表2 HK法和GOD法測(cè)定A組患者OGTT結(jié)果

表3 HK法和GOD法測(cè)定B組患者OGTT結(jié)果

表4 HK法和GOD法測(cè)定C組患者OGTT結(jié)果

討 論

國際上已建立5種血清葡萄糖參考方法，分別為德國臨床化學(xué)會(huì)(DGKL)[3]、NIST[4]和比利時(shí)根特大學(xué)[5-6]建立的3種同位素稀釋-氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜(ID-GC/MS)法以及美國疾病控制中心[7]和日本臨床化學(xué)會(huì)(JSCC)使用的 HK法。臨床實(shí)驗(yàn)室常使用GOD法和HK法測(cè)定葡萄糖，文獻(xiàn)[3]報(bào)道HK法和GOD法測(cè)定葡萄糖呈良好相關(guān)性。

從表1結(jié)果得知，2種葡萄糖測(cè)定方法測(cè)定質(zhì)控結(jié)果均在控。因此，本研究結(jié)果可靠。從表2～4結(jié)果上看，HK法和GOD法測(cè)定OGTT時(shí)，B、C組中2種方法差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)，這與文獻(xiàn)報(bào)道一致;而在A組中空腹血糖2種方法無明顯差異(P＞0.05)，服用葡萄糖后30、60、120、180 min 結(jié)果存在明顯差異(P ＜0.05)。2種方法測(cè)定B組和A組出現(xiàn)不同的測(cè)定結(jié)果，A組中GOD法測(cè)定結(jié)果偏低。其原因可能在于A組中新配置的葡萄糖溶液中約36%為α型葡萄糖、64%為β型葡萄糖。葡萄糖的完全氧化需α型到β型變旋反應(yīng)，這一過程需12 h以上。GOD對(duì)β-D型葡萄糖高度特異[3]，因此在C組中，HK法和GOD法測(cè)定OGTT各時(shí)段血糖結(jié)果差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。而HK法通過葡萄糖磷酸化反應(yīng)進(jìn)行測(cè)定，不受α型葡萄糖影響。故在2種方法測(cè)定B組和A組出現(xiàn)不同的測(cè)定結(jié)果，GOD法測(cè)定葡萄糖受α型葡萄糖影響而使測(cè)定結(jié)果偏低。

HK法為國際上推薦的葡萄糖測(cè)定方法，不受內(nèi)源性還原性物質(zhì)干擾和α型葡萄糖影響。而我國臨床實(shí)驗(yàn)室推薦使用GOD法，OGTT推薦采用口服75 g葡萄糖，應(yīng)注意α型葡萄糖影響。

[1]歐小虹，楊金奎.不同糖耐量及肥胖人群中血漿apelin水平及相關(guān)因素分析[J].中國糖尿病雜志，2010，8(2):109-111.

[2]徐向進(jìn)，潘長(zhǎng)玉，田 慧，等.WHO及美國糖尿病學(xué)會(huì)糖尿病診斷標(biāo)準(zhǔn)在老年人群中應(yīng)用的分析和評(píng)估[J].中華內(nèi)分泌代謝雜志，2002，18(5):357-361.

[3]White E，Welch VM，Sun T，et al.The accurate determination of serum glucose by isotope dilution mass spectrometry-two methods[J].Biomed Mass Spectrom，1982，9(3):395-405.

[4]張?zhí)鞁?，張傳寶，張江濤，?同位素稀釋液相色譜串聯(lián)質(zhì)譜法測(cè)定血清葡萄糖[J].中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志，2010，33(1):75-80.

[5]Thienpont LM，Leenheer AP，St?ckl D，et al.Candidate reference methods for determining target values for cholesterol，creatinine，uric acid，and glucose in external quality assessment and internal accuracy control.Ⅱ.Method transfer[J].Clin Chem，1993，39(6):1001-1006.

[6]Thienpom LM，Van Nieuwenhove B，St?ckl D，et al.Determination of reference method values by isotope dilution-gas chromatograph/mass spectrometry:a five years'experience of two European reference laboratories[J].Eur J Clin Chem Clin Biochem，1996，34(10):853-860.

[7]Neeae JW，Duncan P，Bayse D，et al.Development and evaluation of a hexokinase/glucose-6-phosphate dehy-drogenase procedure for use a national glucose reference method[S].HEW Pub No.(CDC)77-8330，USPHS，1976.