雞大腸桿菌病的臨床特征及防控

齊鳳云 孫少麗 （山東省濱州技師學(xué)院 256600）

雞大腸桿菌病的臨床特征及防控

齊鳳云 孫少麗 （山東省濱州技師學(xué)院 256600）

雞大腸桿菌病是由大腸埃希氏菌(EshcecrhaiColi)的某些血清型菌株所引起的一類傳染病的統(tǒng)稱。本病的臨診病型復(fù)雜多樣，包括大腸埃希氏菌性敗血癥、氣囊炎、心包炎、卵黃性腹膜炎、關(guān)節(jié)炎、臍炎、眼炎、腸炎、死胚、腦病、肉芽腫、腫頭綜合征、孵化率低等許多病型。本病常易成為其它疾病的并發(fā)病或繼發(fā)病，各種應(yīng)激特別是環(huán)境衛(wèi)生及飼養(yǎng)管理?xiàng)l件不良，均可加劇本病的發(fā)生。雞大腸桿菌病的存在給養(yǎng)雞業(yè)發(fā)展帶來了巨大的經(jīng)濟(jì)損害。

1 病原學(xué)

革蘭氏陰性無芽孢的直桿菌，大為2～3mm×0.4～0.7mm，兩端鈍圓，散在或成對，大多數(shù)菌株以周生鞭毛運(yùn)動，但也有無鞭毛或丟失鞭毛的無動力變異株。一般均有1型菌毛，少數(shù)菌株兼具性菌毛，對人和動物致病的菌株多數(shù)還常有與毒力相關(guān)的特殊菌毛。除少數(shù)菌株外，通常無可見莢膜，但常有微莢膜，堿性染料對本菌有良好著色性，菌體兩端偶爾略深染。

2 流行病學(xué)

在世界各地均有發(fā)生。80年代以來，本病不斷在我國蔓延，吉林、遼寧、山東、廣東、青海、江蘇、湖南、北京等我國大部分省、市、自治區(qū)都陸續(xù)報(bào)道發(fā)生過本病，流行范圍大，而且發(fā)病率和病死率較高。該病對我國養(yǎng)禽業(yè)造成了很大的經(jīng)濟(jì)損失，己愈來愈多地引起人們的關(guān)注。

2.1 易感性 不同品種和不同年齡的雞群均可感染發(fā)病，本病對3～6周齡的幼雛和中雛危害最大，發(fā)病較早的為4日齡、7日齡和9日齡，通常以1月齡前后的幼雛雞發(fā)病較多，成年雞特別是產(chǎn)蛋雞亦可發(fā)病，常造成產(chǎn)蛋量下降以及嚴(yán)重的死亡和直接的經(jīng)濟(jì)損失。發(fā)病率和死亡率受各種因素的影響差異較大，如菌株血清型和毒力，有無并發(fā)或繼發(fā)病癥，采取措施是否及時(shí)有效等。

2.2 傳染途徑 消化道、呼吸道是主要的感染途徑，本病還可經(jīng)蛋和交配感染。飼料和飲水被污染或帶有大腸桿菌的塵埃被易感雞吸入進(jìn)入下呼吸道后侵入血液而感染以及患本病的公、母雞與易感雞交配等均可引起雞只大批發(fā)病而造成流行。

3 臨床癥狀和病理變化

雞大腸桿菌病的潛伏期為數(shù)小時(shí)至3d，無特征性臨床癥狀，但與雞發(fā)病日齡、病程長短、受侵害的組織器官以及是否并發(fā)其它疾病有很大關(guān)系，病型復(fù)雜，臨床上有以下幾種表現(xiàn)型：急性敗血型、內(nèi)臟型、卵黃性腹膜炎型、生殖型(卵黃性腹膜炎和輸卵管炎)、關(guān)節(jié)炎或足墊腫型、大腸桿菌性肉芽腫、神經(jīng)型(腦炎型。危害最大的是急性敗血型。近幾年神經(jīng)型、眼炎型及生殖型大腸桿菌病時(shí)有發(fā)生，其他類型較少發(fā)生。

3.1 急性敗血型 雛雞和成年雞均可發(fā)生，多發(fā)生于4～8周齡的肉雞，病雞精神沉郁，羽毛松亂，少吃或不吃，嗜睡，發(fā)燒，腹部大，嗦囊內(nèi)充滿食物，臍孔及其周圍皮膚發(fā)紅，水腫，拉黃色稀糞，不愿活動，病后2～3d內(nèi)死亡，死亡率為5%～20%，有時(shí)高達(dá)50%。

3.2. 眼球炎型 可為單側(cè)性或雙側(cè)性，病雞眼瞼封閉，腫大突出。開始時(shí)眼瞼腫脹，流淚，怕光，逐漸瞳孔混濁，以后眼房液及角膜混濁，視網(wǎng)膜脫落，失明，眼球萎縮。病雞懶動，采食減少，羽毛松亂，消瘦。剖檢見眼結(jié)膜潮紅腫脹，眼前房液和角膜渾濁，有膿性或干酪樣滲出物。鏡下顯示全眼都有異染性細(xì)胞和單核細(xì)胞浸潤，脈絡(luò)膜充血、視網(wǎng)膜充血壞死。

3.3. 神經(jīng)型(腦炎型) 主要發(fā)生于蛋雞，而肉雞特別是肉雛雞較少發(fā)生，以癱瘓、昏睡、斜頸，歪頭轉(zhuǎn)圈，共濟(jì)失調(diào)，抽搐，伸脖，張口呼吸，采食減少，拉稀，生長受阻，產(chǎn)蛋顯著下降為主要癥狀。剖檢病變集中于腦部，可見腦膜充血。點(diǎn)狀出血，腦脊髓液增加，腦膜易于剝離，額骨內(nèi)骨板呈土黃色，骨質(zhì)疏松，腦實(shí)質(zhì)水腫、軟化，其他臟器病變不明顯。

3.4 卵黃性腹膜炎和輸卵管炎 主要發(fā)生于產(chǎn)蛋雞，常通過交配或人工授精時(shí)感染。多呈慢性經(jīng)過，并伴發(fā)卵巢炎、子宮炎。大多數(shù)病雞不下蛋，腹下垂，能在腹部摸到硬殼或軟殼蛋，精神沉郁、消瘦、腹瀉，糞便呈黃白色或綠色，具惡臭味，污染肛門附近的羽毛，產(chǎn)蛋率下降10%～15%左右，一般3～5d死亡，即使不死也失去產(chǎn)蛋能力。

4 診斷

雞大腸桿菌缺乏特征性臨床表現(xiàn)，可根據(jù)流行病學(xué)特點(diǎn)，臨床癥狀、剖檢變化綜合分析，作出初步診斷，但其他病原微生物感染也會出現(xiàn)類似的剖檢變化，還要考慮有無混合感染的問題，所以確診還要通過病原分離培養(yǎng)，染色鏡檢、生化試驗(yàn)、致病性試驗(yàn)及血清型鑒定

4.1 病原學(xué)診斷

4.1.1 病料的采集和處理 病料從新鮮尸體或死胚中無菌采集，根據(jù)癥狀和病變的不同，急性敗血癥病雞無菌采取心血、肝臟、脾、腎、和肺等，腸毒血癥無菌采取小腸前斷勃膜，腸炎型無菌操作采取發(fā)炎的腸勃膜，其它也可用棉拭子從心包腔、氣囊、關(guān)節(jié)腔、輸卵管、卵黃囊等處取樣。病程長的病例可采集骨髓作為細(xì)菌分離樣品。直接涂片鏡檢或進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)鑒定試驗(yàn)。

4.1.2 分離培養(yǎng)和鑒定 將病料如肝、脾、心包液、氣囊滲出物等可直接用鉑金耳釣取少許的病料分別接種于普通肉湯、普通瓊脂斜面、血液瓊脂平板、伊紅美藍(lán)瓊脂和麥康凱培養(yǎng)基上進(jìn)行分離培養(yǎng)。37℃培養(yǎng)24h后，在普通瓊脂上形成圓形，中等大小，光滑，半透明，邊緣整齊，灰白色的菌落；在普通肉湯中呈均勻混濁生長，形成菌膜，管底有粘性沉淀；在麥康凱培養(yǎng)基上可長出中央凹直徑1～2mm的粉紅色菌落；在伊紅美藍(lán)瓊脂上產(chǎn)生紫黑色帶金屬光澤的菌落，在血液瓊脂平板上呈典型的p型溶血，在菌落周圍有一完全透明的溶血環(huán)。

4.1.3 生化試驗(yàn) 用純化培養(yǎng)菌落進(jìn)行生化試驗(yàn)。作糖發(fā)酵試驗(yàn)，靛基質(zhì)試驗(yàn)，構(gòu)椽酸鹽利用試驗(yàn)等，在37℃培養(yǎng)24～48h之后觀察變化。本菌生化反應(yīng)活躍，能分解葡萄糖、乳糖、麥芽糖、甘露醇產(chǎn)酸產(chǎn)氣，不分解蔗糖，不產(chǎn)生硫化氫， VP試驗(yàn)陰性，不能利用構(gòu)緣酸鹽，不液化明膠，靛基質(zhì)試驗(yàn)、MR試驗(yàn)陽性，動力試驗(yàn)不定。

4.1.4 動物接種試驗(yàn) 經(jīng)上述步驟鑒定的大腸桿菌制成大腸桿菌懸液常用其24h肉湯培養(yǎng)物注射小雞或小白鼠，即可測知其致病力。接種后小白鼠和雛雞均于12～48h左右發(fā)病死亡，癥狀和剖檢變化與大腸桿菌自然發(fā)病一致。無菌采心血及實(shí)質(zhì)臟器作涂片鏡檢和接種培養(yǎng)基進(jìn)行分離培養(yǎng)，根據(jù)病原菌的形態(tài)、染色、培養(yǎng)、生化特性加以鑒定。

4.2 血清學(xué)診斷

4.2.1 間接血凝試驗(yàn)(IHA) 是檢測大腸桿菌抗體的一種敏感方法，其原理是紅細(xì)胞容易吸附大腸桿菌的O抗原，在相應(yīng)細(xì)菌抗體存在時(shí)，紅細(xì)胞就發(fā)生凝集。此法比常規(guī)的細(xì)菌直接凝集反應(yīng)更敏感、快速、穩(wěn)定，易于觀察。

4.2.2 直接免疫熒光抗體染色(IAF) 直接檢查糞便懸液中的大腸桿菌抗原，Park等應(yīng)用熒光標(biāo)記抗體直接染色，可在2h內(nèi)完成，但特異性欠佳。

4.3 分子生物學(xué)方法

4.3.1 PCR 將編碼H抗原的Flci基因完整序列經(jīng)PCR擴(kuò)增，Rasl酶切，凝膠電泳分析譜型有4種，認(rèn)為有助于鑒別O157：H7和其他大腸桿菌。

4.3.2 DNA探針 用于檢查EHEC的CVD419質(zhì)粒。此質(zhì)粒經(jīng)Hindm酶切而得3.4Kb的cvD419，經(jīng)標(biāo)記后用分子雜交法檢查，另一種探針以編碼葡萄糖醛酸酶的vidA等位基因作探針，也有較高的特異性，DNA探針己用于檢測細(xì)菌毒力的基因構(gòu)成。

5 防制

（1）控制本病以預(yù)防為主。選好場址應(yīng)建在地勢高燥、水源充足、水質(zhì)良好、排水方便、遠(yuǎn)離居民區(qū)和其他禽場、屠宰或畜產(chǎn)品加工廠。搞好禽舍環(huán)境衛(wèi)生加強(qiáng)消毒管理空氣通暢，降低雞舍內(nèi)氨氣等有害氣體的濃度和塵埃，并定期消毒。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理淘汰處理病雞，采精、輸精嚴(yán)格消毒，每雞使用一個(gè)消毒的輸精管。保持營養(yǎng)平衡，保證飼料、墊料、飲水無污染，做好滅鼠工作。（2）藥物防治。雖然很多藥物如氨節(jié)青霉素、金霉素、新霉素、慶大霉素、蔡綻酸、土霉素、多勃菌素B、壯觀霉素、鏈霉素及磺胺類藥物等對大腸桿菌病均有一定的治療作用，但大腸桿菌致病性菌株多，對藥物敏感性不一致，經(jīng)常使用一種藥物極易產(chǎn)生耐藥性，尤其是那些長時(shí)間廣泛使用的藥物。盲目使用藥品不僅效果不佳，而且會使養(yǎng)殖成本增加，效益降低。因此，選擇藥物時(shí)必須先進(jìn)行藥敏試驗(yàn)，以免應(yīng)用無效的藥物。（3）疫苗免疫。目前已研制出針對主要致病血清型02：Kl和078：K80等的多價(jià)滅活疫苗。但鑒于大腸桿菌血清型較多，不同血清型抗原性不同，菌株之間缺乏完全保護(hù)，不可能對所有養(yǎng)禽場流行的致病血清型具有免疫作用，因此這種疫苗具有一定的局限性。目前較為普遍使用的方法是，在常發(fā)病的養(yǎng)禽場，可從本場病禽中分離出致病性的大腸桿菌，選擇幾個(gè)有代表性的菌株制成自家(或優(yōu)勢菌株)多價(jià)滅活疫苗。

S858.31

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1007-1733(2012)06-0036-02

2012–02–23）

衛(wèi)生檢疫