重復(fù)使用戊巴比妥對比格犬麻醉劑量的影響＊

吳海雄，郁 豆，毛小泉△

（1.海南省農(nóng)墾三亞醫(yī)院口腔科 572000；2.中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院附屬?？卺t(yī)院口腔中心，海南?？?70208）

戊巴比妥為巴比妥類藥物的衍生物，對中樞神經(jīng)系統(tǒng)有廣泛抑制作用，隨劑量不同而產(chǎn)生鎮(zhèn)靜、催眠和抗驚厥效應(yīng)，一定劑量時則產(chǎn)生麻醉作用[1]，是目前國內(nèi)較常用的、效果和安全性也是有所保證的麻醉藥?，F(xiàn)將本研究探討戊巴比妥反復(fù)多次對同一只實驗動物使用后的劑量關(guān)系報道如下。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 選擇36月齡健康雄性比格犬5只（沈陽康平實驗動物研究所提供，合格證號：SCXK（遼）2009－0005），體質(zhì)量13～15 kg。

1.2 實驗藥物 戊巴比妥由中國醫(yī)藥集團上?；瘜W(xué)試劑有限公司生產(chǎn)，批號：69020100。使用前用生理鹽水配制成3%溶液，用過濾法對溶液進行除菌。濾器及所用玻璃容器均經(jīng)高壓蒸汽滅菌，濾器所裝濾膜為雙層，其孔徑依次是0.45μm和0.22μm，過濾時在超凈工作臺中進行。

1.3 麻醉方法 比格犬術(shù)前均禁食12 h，禁水4 h。麻醉前皮下注射阿托品0.05 mg／kg，精確稱量動物體質(zhì)量后，以30 mg／kg的劑量靜脈注射3%戊巴比妥進行全身麻醉。

1.4 麻醉判斷 （1）瞼膜反射消失；（2）頭部及四肢下垂。

1.5 麻醉效果 每只動物麻醉藥總量按體質(zhì)量1 mL／kg進行估算，首次給藥以不超過總量為原則。若在手術(shù)過程中動物出現(xiàn)掙扎，追加醉麻藥，直到瞼膜反射消失。前3次麻醉給藥量在沒有超過總量的前提下，均順利完成手術(shù)，第4次超出麻醉藥總量。

1.6 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料以±s表示，用一般線性模型（General Linear Model）的Repeated Measures過程實現(xiàn)重復(fù)測量資料的方差分析，并用Multivariate過程實現(xiàn)組間的兩兩比較，以P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié) 果

戊巴比妥的使用劑量第1次（0.925 9±0.030 2）mL／kg、第2次（0.922 7±0.056 4）mL／kg、第3次（0.968 0±0.038 9）mL／kg，隨著使用次數(shù)的增加，用藥劑量逐漸增加（P＜0.05），第4次[（1.306 3±0.185 5）mL／kg]用藥劑量比前3次明顯增加（P＜0.05）。

3 討 論

隨著科研的快速發(fā)展，動物資源（尤其是非人靈長類動物）變得越來越缺乏，重復(fù)使用動物是目前迫切需要解決的問題，每只動物至少要利用2次或更多次[2]。多次利用動物有利于適應(yīng)實驗過程，減少動物因興奮或緊張導(dǎo)致實驗的差異[3－4]。

在重復(fù)使用動物的過程中，實驗動物的麻醉是動物實驗相當(dāng)關(guān)鍵的環(huán)節(jié)，對于麻醉方法、麻醉劑量[5]及麻醉效果維持時間的把握將影響整個實驗進程。戊巴比妥作為麻醉藥在實驗動物的麻醉中應(yīng)用較為廣泛，但用量稍大可引起動物死亡[6－7]。如何做到安全有效，防止動物死亡等嚴(yán)重問題，是實行動物實驗關(guān)鍵步驟[8－10]。從本文結(jié)果可知，隨著戊巴比妥使用次數(shù)的增加，藥量逐漸增加，尤其第4次使用時，藥量的增加更加明顯，與前3次相比差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P＜0.05）。原因可能是：（1）巴比妥類藥物可以使血管收縮，腦血流量減少，影響腦代謝，藥物進入腦實質(zhì)細(xì)胞外液量減少[11]。（2）戊巴比妥是一種阻滯Na＋、Ca2＋通道的中效鎮(zhèn)靜催眠藥，Na＋、Ca2＋通道被阻滯[12]，心臟和神經(jīng)興奮性降低，可抑制交感神經(jīng)而使副交感神經(jīng)作用相對增強，麻醉觀察時認(rèn)為麻醉藥物沒有達(dá)到應(yīng)有的劑量而增加藥量。（3）受體阻滯神經(jīng)細(xì)胞膜上藥物轉(zhuǎn)運體的改變，致使細(xì)胞內(nèi)液中藥物量不足，藥物不能有效通過細(xì)胞內(nèi)機制發(fā)揮作用[13]。（4）戊巴比妥被多藥耐藥相關(guān)蛋白逆濃度泵出細(xì)胞，減少細(xì)胞內(nèi)藥物濃度，導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)藥物濃度降低，不能有效發(fā)揮麻醉作用。（5）從能量代謝來看，戊巴比妥麻醉動物后，Hb對O2的親和力降低，動物機體組織氧需要量超過了氧供應(yīng)量，容易使機體出現(xiàn)缺氧狀態(tài)，乳酸亦有不同程度的增加。細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞器p H值的改變，使藥物到達(dá)作用部位的靶位點時濃度減少[14－16]。基于以上幾種原因，使細(xì)胞內(nèi)外藥物濃度降低，尤其是蛋白結(jié)構(gòu)的改變以及體內(nèi)對麻醉藥物逐步耐受，使重復(fù)戊巴比妥藥物量逐漸增加。

綜上所述，戊巴比妥多次麻醉實驗動物后，使動物對麻醉藥產(chǎn)生一定的耐藥性，因此，在動物實驗過程中，除了采取有效、合理、方便的麻醉方法和藥物外，還應(yīng)適量增加麻醉藥物量，以充分保障實驗的順利進行。

[1]汪靜，丁雋，姜瑩，等.兩種麻醉劑對KM小鼠麻醉效果的比較[J].實驗動物與比較醫(yī)學(xué)，2009，29（2）：132－134.

[2]何平，高翔，宋錦璘，等.低強度脈沖超聲波對Beagle犬Ⅱ度根分叉病變的輔助效應(yīng)[J].中國組織工程研究與臨床康復(fù)，2011，15（7）：1219－1223.

[3]白海紅，林纓，李樺，等.比格犬血漿中鹽酸羥考酮和羅通定GC－MS測定法及其在藥代動力學(xué)研究中的應(yīng)用[J].分析化學(xué)，2009，37（A2）：310.

[4]潘東升，范玉明，李波.影響犬和非人靈長類動物臨床病理學(xué)檢測指標(biāo)的因素[J].中國藥事，2011，25（4）：392－395.

[5]黃振興，李宏霞.比格犬和食蟹猴的麻醉搶救[J].浙江畜牧獸醫(yī)，2011，36（4）：33－34.

[6]馬利杰，張英澤，鄭占樂.山羊單純與復(fù)合全身麻醉效果的比較[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2009，19（5）：76－78.

[7]靳洪濤，李萬芳，李慧，等.Beagle犬靜脈注射S（＋）鹽酸氯胺酮和鹽酸氯胺酮急性毒性及毒代動力學(xué)比較研究[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2009，3（10）：18－20.

[8]張闊，田楓，康愛君，等.實驗用比格犬戊巴比妥鈉麻醉并發(fā)癥的觀察及處理[J].實驗動物科學(xué)，2007，24（2）：32－34.

[9]車愛萍，王潔，夏振娜，等.藥物安全藥理學(xué)研究新進展[J].中國新藥雜志，2010，19（15）：1309－1313.

[10]陽海鷹，王青秀，劉雁，等.雙壓力導(dǎo)管植入比格犬體內(nèi)植入手術(shù)的實施及在安全藥理學(xué)研究中的應(yīng)用[J].軍事醫(yī)學(xué)，2011，35（6）：464－468.

[11]周昆，屈彩芹.動物實驗常用麻醉劑的比較與選擇[J].實驗動物科學(xué)，2008，25（2）：41－47.

[12]王德軍，林琳，陳民利，等.不同麻醉方法對大鼠血氣電解質(zhì)及能量代謝的影響[J].中國比較醫(yī)學(xué)雜志，2009，19（8）：51－54.

[13]潘東升，范玉明，李波.影響犬和非人靈長類動物臨床病理學(xué)檢測指標(biāo)的因素[J].中國藥事，2011，25（4）：392－395.

[14]袁進，吳清洪，陳麗，等.西藏小型豬、小獵犬與人血液流變學(xué)指標(biāo)的比較研究[J].南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報，2009，29（7）：1428－1430.

[15]Choi SY，Hwang JS，Kim IH，et al.Basic data on the hematology，serum biochemistry，urology，and organ weights of Beagle dogs[J].Lab Anim Res，2011，27（4）：283－291.

[16]肖衍宇，陳志鵬，劉雯，等.磷酸川芎嗪緩釋制劑在比格犬體內(nèi)的藥動學(xué)和生物等效性研究[J].中國藥學(xué)雜志，2011，22（17）：1344－1348.