淫羊藿有效成分淫羊藿苷的現(xiàn)代研究進(jìn)展

杜婷婷，陳 智

(濟南市第二人民醫(yī)院，山東 濟南 250001)

淫羊藿(Herba epimedii)是小檗科(Berberidaeeae)植物。據(jù)《中國藥典》記載，淫羊藿性味辛、甘、溫，歸肝、腎經(jīng)，具有補腎壯陽、強筋骨、祛風(fēng)除濕的功效，可增強機體免疫力，降壓理氣。其在臨床主要用于治療老年腎虛陽痿、腰膝酸軟、風(fēng)寒濕痹及老年冠心病、神經(jīng)衰弱、高血壓、慢性支氣管炎、病毒性心肌炎、外陰白斑、骨質(zhì)疏松、更年期綜合征、中年健忘等疾病。

淫羊藿苷為箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿、巫山淫羊藿等干燥莖葉的提取物，分子式為C33H40O15，相對分子質(zhì)量676.67，結(jié)構(gòu)上屬于8－異戊烯基黃酮醇苷類化合物［1］?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證明，淫羊藿苷具有抗癡呆、抗衰老、抗缺血性腦損傷以及神經(jīng)保護(hù)作用［2～5］。

1 淫羊藿苷分離提取及含量測定研究

目前，對淫羊藿苷的提取方法常采用醇提法、超聲法、微波法、高壓法等。其中醇提法較水提法不僅提取效率高、提取周期短，而且提取物不易發(fā)霉變質(zhì)，后期處理相對容易。不足之處是提取過程需要乙醇量較多，回收溶劑需要旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀等儀器，經(jīng)濟成本稍高。王欣等［6］以淫羊藿苷提取轉(zhuǎn)移率為考察指標(biāo)，對不同提取方法和提取條件進(jìn)行了考察，結(jié)果發(fā)現(xiàn)最佳提取工藝為滲漉法，即用60% ～75%乙醇為溶媒，收集滲濾液的量為藥材的8倍，淫羊藿苷提取轉(zhuǎn)移率為90%，提取效果較好。超聲提取方法，有效成分提取過程中損失較少，操作也比較簡便，省時省力，提高了檢驗效率。胡道德等［7］以淫羊藿苷的量為質(zhì)量控制指標(biāo)，通過均勻設(shè)計法對淫羊藿苷提取工藝中乙醇體積分?jǐn)?shù)、固液比和超聲提取時間等因素進(jìn)行研究，以考察淫羊藿苷的最佳提取工藝，得出當(dāng)以80%乙醇為溶劑、固液比為1∶20、提取時間為20 min，可使藥材中淫羊藿苷最大限度地浸出。戰(zhàn)佩英［8］采用微波提取法，通過正交試驗對提取溶媒用量、輻射時間、輻射頻率以及提取次數(shù)進(jìn)行考察，得到最佳提取工藝，表明微波提取法可有效提取淫羊藿苷。

對淫羊藿苷含量的測定方法目前主要有薄層法、高效液相法及毛細(xì)管電泳法等，其中高效液相法較為常用。周憶新［9］采用HPLC法測定三子強腎膠囊中的淫羊藿苷含量。結(jié)果淫羊藿苷質(zhì)量濃度線性范圍良好。此方法簡便、準(zhǔn)確、重復(fù)性好，適合淫羊藿苷的質(zhì)量控制。

2 淫羊藿苷的藥理學(xué)研究

2.1 對心、腦血管系統(tǒng)的作用 淫羊藿苷在心血管方面具有較強的藥理作用，表現(xiàn)為抗心肌缺血、促進(jìn)血管生成、抗氧化、抗動脈粥樣硬化(athemsclerosis，AS)等作用。潘志偉等［10］采用體外培養(yǎng)的乳鼠心肌細(xì)胞，制備了缺氧/復(fù)氧損傷和氧化損傷心肌細(xì)胞兩種模型，考察了淫羊藿苷對心肌細(xì)胞損傷的影響，結(jié)果表明淫羊藿苷對心肌細(xì)胞具有明顯的保護(hù)作用。馬一君等［11］通過研究發(fā)現(xiàn)，淫羊藿苷對半胱氨酸(HCY)刺激平滑肌細(xì)胞的增殖作用有顯著的抑制作用，其影響了增殖平滑肌細(xì)胞的細(xì)胞周期，使S期細(xì)胞數(shù)量減少，促進(jìn)增殖的兔血管平滑肌細(xì)胞凋亡，表明淫羊藿苷具有良好的抗動脈粥樣硬化的作用。

2.2 對體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖、分化的作用 淫羊藿苷可增強成骨細(xì)胞活性，促進(jìn)骨形成，從而起到“健骨”的作用。淫羊藿苷能顯著促進(jìn)人成骨細(xì)胞的增殖和分化，與提高人成骨細(xì)胞的堿性磷酸酶(ALP)比活性，升高人成骨細(xì)胞BMP－2mRNA的表達(dá)有關(guān)［12］。郭海玲等［13］選用淫羊藿苷為代表，采用細(xì)胞學(xué)研究的方法，探討淫羊藿苷促人骨形成能力的可能作用機制，結(jié)果發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷實驗組具有促進(jìn)人成骨細(xì)胞增殖的作用，并呈明顯的量效關(guān)系，即隨著淫羊藿苷濃度的增高，其促人成骨細(xì)胞增殖的能力逐漸增強。于波等［14］也發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷對成骨細(xì)胞的生長增殖有促進(jìn)作用。鮑加榮等［15］通過切除大鼠卵巢建立骨質(zhì)疏松模型，以不同濃度淫羊藿苷喂食大鼠，考察淫羊藿苷對骨影響，結(jié)果表明淫羊藿苷能增強去卵巢骨質(zhì)疏松大鼠抗外力沖擊的能力，可有效抑制卵巢切除大鼠的骨量丟失，防止骨質(zhì)疏松的發(fā)生?，F(xiàn)代藥理學(xué)研究證實淫羊藿苷促進(jìn)成骨細(xì)胞增殖，促進(jìn)骨折傷口愈合，并且對血液流變學(xué)有一定作用［16］。翟遠(yuǎn)坤等［17］通過體外成骨細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)，考察淫羊藿苷對成骨細(xì)胞生長增殖和分化的影響，結(jié)果顯示，不同濃度含藥血清均可提高ALP活性，淫羊藿苷經(jīng)口服后的代謝產(chǎn)物可促進(jìn)成骨性分化，提示其代謝產(chǎn)物是發(fā)揮骨質(zhì)疏松活性的重要成分。劉海江等［18］發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷能促進(jìn)犬骨髓基質(zhì)細(xì)胞(BMSCs)增殖、促進(jìn)BMSCs合成堿性磷酸酶(ALP)從而增強其成骨能力。

2.3 對內(nèi)分泌系統(tǒng)的影響 淫羊藿苷對內(nèi)分泌系統(tǒng)有明顯作用，其可明顯促進(jìn)幼年小鼠附睪及精囊的發(fā)育，對離體培養(yǎng)的大鼠睪丸間質(zhì)細(xì)胞睪酮的基礎(chǔ)分泌和環(huán)磷酸腺苷的生成也有促進(jìn)作用，表現(xiàn)為性激素樣作用。蔣兆健等［19］采用立體平滑肌張力記錄法，觀察了淫羊藿苷對家兔陰莖海綿體平滑肌的舒張效應(yīng)及機制，結(jié)果表明淫羊藿苷的壯陽機制與影響NO－cGMP信號通路有關(guān)，主要通過提高陰莖海綿體平滑肌中cGMP的濃度，從而舒張海綿體，增強陰莖勃起功能。并且有文獻(xiàn)報道，淫羊藿苷可緩解腎陽虛小鼠睪酮及性腺激素受體基因的表達(dá)下調(diào)［20］。

2.4 免疫調(diào)節(jié)作用 趙連梅等［21］通過環(huán)磷酰胺對小鼠骨髓及免疫抑制造成損傷，然后考察淫羊藿苷對其免疫系統(tǒng)影響，實驗結(jié)果表明淫羊藿苷對機體的體液免疫和細(xì)胞免疫都具有良好的促進(jìn)和恢復(fù)作用，并且可以改善骨髓造血，通過造血系統(tǒng)功能的保護(hù)而進(jìn)一步改善小鼠的免疫力。趙連梅等［22］通過觀察淫羊藿苷處理人子宮內(nèi)膜癌耐藥細(xì)胞前后的細(xì)胞增殖和周期的變化，以及CIK細(xì)胞對其殺傷活性和免疫表型的影響發(fā)現(xiàn)不同濃度淫羊藿苷可抑制 B－MD－CI(ADR+/+)細(xì)胞的生長，導(dǎo)致細(xì)胞增殖的抑制，為淫羊藿苷與過繼免疫治療相結(jié)合，為更有效提高惡性腫瘤的治療提供新的手段。汪海東等［23］通過實驗發(fā)現(xiàn)，增齡導(dǎo)致脾CD4+T淋巴細(xì)胞凋亡加速，而淫羊藿苷能夠降低凋亡速率，對維持淋巴細(xì)胞的數(shù)量，重塑失衡的免疫功能穩(wěn)態(tài)，延緩免疫衰老具有積極的意義。

2.5 抗腫瘤作用 王謙等［24］研究表明，淫羊藿苷可明顯抑制HepG 2.2.15細(xì)胞的增殖，抑制作用呈時間依賴關(guān)系;同時可下調(diào)HepG 2.2.15細(xì)胞FasL的表達(dá)。淫羊藿苷處理的T淋巴細(xì)胞凋亡率有明顯下降，在一定程度阻斷了HepG 2.2.15細(xì)胞對T淋巴細(xì)胞通過Fas/FasL途徑的攻擊。因此推斷淫羊藿苷可逆轉(zhuǎn)肝癌細(xì)胞通過Fas/FasL途徑的免疫逃逸作用，并且提高其對免疫效應(yīng)細(xì)胞的殺傷敏感性，這將為抗腫瘤提供新的途徑。

2.6 增強記憶作用 鄧煒等［25］研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷對血管性癡呆大鼠有學(xué)習(xí)記憶保護(hù)作用。劉東華等［26］研究發(fā)現(xiàn)淫羊藿苷可明顯改善快速老化小鼠SAMP8腦線粒體結(jié)構(gòu)和功能。并且淫羊藿苷可明顯改善皮質(zhì)氧化應(yīng)激快速老化小鼠SAMP8 抗氧化能力［27］。

3 淫羊藿苷現(xiàn)代給藥系統(tǒng)的研究

淫羊藿苷的給藥方式有多種，現(xiàn)代主要有口服給藥、經(jīng)皮給藥、黏膜給藥等?？诜o藥是臨床最易被患者所接受的給藥方式，目前中藥及其生物活性成分大部分以傳統(tǒng)粗制劑生產(chǎn)，口服制劑中有效成分如果無法很好地穿透腸膜屏障，將不能發(fā)揮應(yīng)有的療效，甚至加重患者的負(fù)擔(dān)。淫羊藿苷脂溶性過強，口服不易吸收，藥效發(fā)揮不佳。新型給藥系統(tǒng)脂質(zhì)體粒徑一般介于 10 ～500 nm 之間［28，29］，其在改善藥物ADME/Tox特性等方面顯示出獨特的優(yōu)勢，可以將不易穿透腸膜細(xì)胞的有效成分包裹于脂質(zhì)體中。李仁杰等［30］制作了淫羊藿苷元脂質(zhì)體，利用大鼠腸灌流模型，通過骨髓基質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)模型對淫羊藿苷元及脂質(zhì)體的抗骨質(zhì)疏松活性進(jìn)行考察，對脂質(zhì)體和游離藥物腸吸收情況進(jìn)行比較。研究結(jié)果顯示，淫羊藿苷元脂質(zhì)體能顯著促進(jìn)骨髓基質(zhì)細(xì)胞增殖，增強細(xì)胞內(nèi)堿性磷酸酶活性，并在一定程度上抑制脂肪細(xì)胞伴生現(xiàn)象，顯著增加其體內(nèi)消除。

4 小結(jié)

綜上所述，淫羊藿苷的提取分離方法已經(jīng)較為成熟，且藥理作用廣泛，具有多種生物學(xué)效應(yīng)，是極其重要并有很大開發(fā)利用價值的中藥材成分。目前，對淫羊藿的藥理研究由研究淫羊藿總黃酮深入到淫羊藿苷的單體，其研究范圍主要集中在對骨系統(tǒng)、免疫調(diào)節(jié)和延緩衰老、生殖系統(tǒng)、心血管系統(tǒng)等方面。因此有待于進(jìn)一步利用現(xiàn)代科學(xué)的研究方式，探索高效的淫羊藿苷提取分離方法，通過多種途徑在已有研究基礎(chǔ)上改造淫羊藿苷的結(jié)構(gòu)并測定其藥理活性，通過研制不同的淫羊藿苷劑型，共同為淫羊藿屬植物的開發(fā)利用開辟一條新的道路。并且有必要進(jìn)一步探索淫羊藿苷的用量控制和吸收方式以及毒性和保護(hù)作用的確切機制。淫羊藿苷的分離提取工藝以及含量測定、藥理學(xué)等多方面的深入研究將為我們今后開發(fā)新的治療藥物、科學(xué)用藥以及合理用藥提供重要的理論依據(jù)。

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