不同水平的蚯蚓和蚯蚓糞對(duì)草魚肌肉品質(zhì)的影響

程 靜 茅沈麗 梁日深 鄒 青 曾運(yùn)丁 鄒記興

（華南農(nóng)業(yè)大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院，廣東廣州 510642）

蚯蚓隸屬于環(huán)節(jié)動(dòng)物門寡毛綱，是一種常見的環(huán)節(jié)陸生動(dòng)物，在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中有改土肥田的作用。研究表明，蚯蚓是優(yōu)質(zhì)蛋白飼料，具有適口性好、誘食性強(qiáng)的特點(diǎn)，可提高飼養(yǎng)動(dòng)物生長(zhǎng)發(fā)育以及抗病害能力[1-3]。目前，已有許多關(guān)于蚯蚓和蚯蚓糞在水產(chǎn)動(dòng)物、畜禽、反芻動(dòng)物以及一些特種經(jīng)濟(jì)動(dòng)物生產(chǎn)上應(yīng)用的相關(guān)報(bào)道[4-5]。

本實(shí)驗(yàn)首次將添加了不同濃度的蚯蚓和蚯蚓糞的飼料飼喂草魚，研究蚯蚓和蚯蚓糞對(duì)草魚肌肉品質(zhì)的影響，為蚯蚓和蚯蚓糞在草魚飼料中的應(yīng)用提供一定的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)用魚

實(shí)驗(yàn)草魚平均體重為(54.03±0.15)g，規(guī)格整齊，體質(zhì)健壯。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)蚯蚓

赤子愛勝蚓(Eisenia foetida)，取自增城飼養(yǎng)基地。體色暗紅、健康，體長(zhǎng)4～8 cm。

1.1.3 實(shí)驗(yàn)飼料

實(shí)驗(yàn)蚯蚓預(yù)先利用20mg/kg高錳酸鉀消毒2 min。各組實(shí)驗(yàn)飼料均在韶關(guān)市可利鮮生物科技有限公司加工制作。各實(shí)驗(yàn)組飼料組成及營養(yǎng)水平見表1。

表1 飼料配方組成和主要營養(yǎng)水平

1.2 實(shí)驗(yàn)方法

1.2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

本實(shí)驗(yàn)共設(shè)7個(gè)試驗(yàn)組，分別為對(duì)照組（不添加蚯蚓和蚯蚓糞）、5%蚯蚓組、7.5%蚯蚓組、10%蚯蚓組、2%蚯蚓糞組、4%蚯蚓糞組和6%蚯蚓糞組。每組3個(gè)平行，每個(gè)平行放養(yǎng)25尾草魚，池塘網(wǎng)箱規(guī)格：2 m×2 m×1.5 m，網(wǎng)箱水位1 m左右，飼養(yǎng)地點(diǎn)：廣州市白云區(qū)耀昌水產(chǎn)繁育場(chǎng)。

1.2.2 日常管理

每天投喂2次（10:00，16:00），并根據(jù)天氣和攝食情況適當(dāng)調(diào)節(jié)投喂量，一般為魚體重的2%～6%。實(shí)驗(yàn)養(yǎng)殖期從2010年8月17日至2010年12月4日，共109 d，期間因臺(tái)風(fēng)因素停飼9 d，實(shí)際投喂100 d。

1.2.3 樣品收集與測(cè)定

生長(zhǎng)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后,從每個(gè)網(wǎng)箱隨機(jī)抽取草魚5尾,取背部肌肉，-80℃冰箱保存。

水分采用真空冷凍干燥法測(cè)定；粗蛋白采用凱氏定氮儀（Kjeltec 2300）進(jìn)行測(cè)定；粗脂肪采用Tecator脂肪測(cè)定儀測(cè)定；粗灰分采用馬福爐灼燒法測(cè)定；氨基酸含量采用氨基酸自動(dòng)分析儀測(cè)定。

1.2.4 氨基酸營養(yǎng)評(píng)價(jià)

根據(jù)FAO/WHO1973年建議的氨基酸評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)模式和全雞蛋蛋白的氨基酸模式[6-7]，分別按以下公式計(jì)算氨基酸評(píng)分（AAS）、化學(xué)評(píng)分（CS）和必需氨基酸指數(shù)（EAAI）：

式中：aa——實(shí)驗(yàn)樣品某種氨基酸含量(mg/g N)；

AA（FAO/WHO）——FAO/WHO評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)模式中同種氨基酸含量（mg/g N）；

AA（Egg）——全雞蛋蛋白質(zhì)中同種氨基酸含量(mg/g N)；

n——比較的氨基酸個(gè)數(shù)；

A、B、…,I——魚肌肉蛋白質(zhì)的必需氨基酸含量(mg/g N)；

AE、BE…IE——全雞蛋蛋白質(zhì)的必需氨基酸含量（mg/g N）。

1.2.5 數(shù)據(jù)分析與處理

實(shí)驗(yàn)所得數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)”表示，采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件的One-way ANOVA程序進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，結(jié)果顯著者采用Duncan's法做多重比較，顯著水平為 0.05。

2 結(jié)果

2.1 蚯蚓和蚯蚓糞對(duì)草魚常規(guī)營養(yǎng)的影響（見表2）

表2 各實(shí)驗(yàn)組草魚肌肉常規(guī)營養(yǎng)指標(biāo)(%，濕重)

從表2可知，添加蚯蚓和蚯蚓糞可顯著提高草魚肌肉中粗蛋白的含量（P＜0.05），以添加 7.5%～10%蚯蚓和6%蚯蚓糞為最好；對(duì)水分、粗脂肪和粗灰分均無顯著影響（P＞0.05）。

2.2 蚯蚓和蚯蚓糞對(duì)草魚肌肉氨基酸組成的影響(見表3)

表3 各組草魚肌肉氨基酸組成（%）

由表3可知，在氨基酸總量方面，除去添加2%蚯蚓糞實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比無顯著差異外(P＞0.05),其余各實(shí)驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組,并以添加7.5%蚯蚓實(shí)驗(yàn)組氨基酸總量最高(P＜0.05),且隨著飼料中蚯蚓和蚯蚓糞含量的逐漸增加,均呈現(xiàn)先升高后降低趨勢(shì);在必需氨基酸總量方面，7.5%蚯蚓組草魚肌肉中EAA含量顯著高于對(duì)照組(P＜0.05),其余各實(shí)驗(yàn)組有高于對(duì)照組的趨勢(shì),且隨著飼料中蚯蚓含量的逐漸增加,EAA呈現(xiàn)先升高后降低趨勢(shì)，隨著飼料中蚯蚓糞含量的增加，EAA呈現(xiàn)逐漸升高趨勢(shì)；在草魚肌肉中鮮味氨基酸含量方面，各實(shí)驗(yàn)組間差異不顯著(P＞0.05)，但添加蚯蚓和蚯蚓糞有提高草魚肌肉中鮮味氨基酸的趨勢(shì)。

綜合試驗(yàn)結(jié)果表明,在提高草魚肌肉中氨基酸總量、EAA含量和鮮味氨基酸含量方面，以添加7.5%蚯蚓效果最好。

將表3中必需氨基酸的數(shù)據(jù)按照公式：氨基酸含量（mg/g N）=[氨基酸含量（%，dry）/粗蛋白含量（%，dry）]×6.25×1 000，換算成每克氮中含氨基酸毫克數(shù)后，與雞蛋蛋白質(zhì)的氨基酸模式和FAO/WHO制定的蛋白質(zhì)評(píng)價(jià)的氨基酸標(biāo)準(zhǔn)模式進(jìn)行比較（見表4），并分別計(jì)算出各組草魚肌肉的氨基酸評(píng)分（AAS）、化學(xué)評(píng)分（CS）和必需氨基酸指數(shù)（EAAI）（見表5）。

表4 各組草魚肌肉必需氨基酸含量與組成（mg/g N)

表5 各組草魚肌肉AAS、CS和EAAI比較

由表5中各組草魚肌肉必需氨基酸AAS、CS和EAAI比較可知，根據(jù)氨基酸評(píng)分（AAS），各組必需氨基酸評(píng)分最低的是蛋氨酸+胱氨酸，其次是纈氨酸；根據(jù)化學(xué)評(píng)分（CS），各組必需氨基酸評(píng)分最低的同樣是蛋氨酸+胱氨酸，其次是纈氨酸；可知添加蚯蚓和蚯蚓糞并未改變草魚肌肉中的第一、第二限制性氨基酸；根據(jù)必需氨基酸指數(shù)（EAAI）可知，隨著蚯蚓添加量的提高，EAAI數(shù)值先升高后降低，并以添加7.5%蚯蚓濃度時(shí)數(shù)值最高；隨著蚯蚓糞含量的增加，EAAI數(shù)值逐漸升高，以添加6%蚯蚓糞時(shí)數(shù)值最高。

3 討論

3.1 蚯蚓和蚯蚓糞對(duì)草魚肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分的影響

在通常情況下,水分含量低、蛋白質(zhì)和脂肪含量高時(shí)魚肉相對(duì)肥嫩、品質(zhì)好。梁向陽等[8]認(rèn)為，蛋白質(zhì)、脂肪、水分和灰分作為肌肉的基本組成成分，它們的相對(duì)含量可作為魚類營養(yǎng)指標(biāo)來科學(xué)的評(píng)估魚肉的營養(yǎng)價(jià)值。倫峰等[9]認(rèn)為，草魚肌肉中的主要成分和含量在一定程度上可反映出草魚肌肉的營養(yǎng)價(jià)值，其在考察蠶豆對(duì)草魚生長(zhǎng)和肉質(zhì)影響的試驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，投飼蠶豆的草魚脂肪含量高于普通草魚。

本研究結(jié)果表明，添加蚯蚓和蚯蚓糞可顯著提高草魚肌肉粗蛋白的含量，添加蚯蚓還有提高肌肉粗脂肪含量的趨勢(shì)，以添加7.5%～10%蚯蚓效果最好。其原因可能是蚯蚓含有多種酶類、維生素等，營養(yǎng)物質(zhì)多種多樣；蚯蚓糞不僅含有多種必需氨基酸等營養(yǎng)成分，而且含有一定的有益微生物及其分泌物，對(duì)刺激草魚消化酶的分泌及提高消化酶活性有一定的積極作用，將蚯蚓和蚯蚓糞適量添加到草魚飼料中可促進(jìn)草魚生長(zhǎng)，改善草魚肌肉營養(yǎng)成分。有研究表明，蚯蚓氨基酸種類齊全，維生素、鈣質(zhì)等亦很豐富，加上蚯蚓能散發(fā)出特殊氣味、極易引誘和刺激魚類食欲。因此在魚類配合飼料中添加一定量的鮮蚯蚓，可制成優(yōu)質(zhì)高效的飼料，從而提高該飼料的利用率，改善魚類對(duì)飼料的適口性和攝食強(qiáng)度[10]。陳琳等[11]認(rèn)為，在虹鱒稚魚飼料中添加少量的蚯蚓粉，無疑可以提高飼料效率，降低魚種成本，并且可以加快虹鱒稚魚生長(zhǎng)。劉石林等[6]以不同比例的鮮活蚯蚓和人工飼料配合投喂中國明對(duì)蝦幼蝦發(fā)現(xiàn)，隨著蚯蚓投喂量的增加，對(duì)蝦的體長(zhǎng)和體質(zhì)量都呈明顯的增加趨勢(shì)。顧海林等[12]在基礎(chǔ)飼料中添加1.14%蚯蚓及38.86%蚯蚓糞混合物配制成顆粒餌料飼養(yǎng)尼羅羅非魚，結(jié)果魚產(chǎn)量比對(duì)照組提高22.40%。劉波等[13]在基礎(chǔ)日糧中添加5%蚯蚓糞飼喂異育銀鯽60 d，發(fā)現(xiàn)飼喂5%蚯蚓糞的異育銀鯽增重率比對(duì)照組顯著提高29.75%。

3.2 蚯蚓和蚯蚓糞對(duì)草魚肌肉氨基酸組成的影響

衡量魚類肌肉的營養(yǎng)價(jià)值,不僅要看蛋白質(zhì)含量的高低，而且還要看組成蛋白質(zhì)的氨基酸種類和含量。氨基酸的種類和含量決定著蛋白質(zhì)品質(zhì)的優(yōu)劣[14]。必需氨基酸含量的高低和構(gòu)成比例則是評(píng)價(jià)蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值高低的重要指標(biāo)，而魚肉味道的鮮美程度在很大程度上取決于魚肉中的鮮味氨基酸即天門冬氨酸、甘氨酸、谷氨酸、丙氨酸的含量[15-16]。

本實(shí)驗(yàn)研究結(jié)果表明，在氨基酸總量方面，除去2%蚯蚓糞組與對(duì)照組相比差異不顯著外，其余實(shí)驗(yàn)組均顯著高于對(duì)照組，并以添加7.5%蚯蚓時(shí)效果最好；在EAA含量方面，7.5%蚯蚓組顯著高于對(duì)照組，其余各實(shí)驗(yàn)組有高于對(duì)照組的趨勢(shì)；在鮮味氨基酸含量方面，各實(shí)驗(yàn)組間差異不顯著。這在一定程度上表明，添加蚯蚓和蚯蚓糞有提高草魚肌肉蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值的趨勢(shì)，以添加7.5%蚯蚓時(shí)效果最明顯。

首先，蚯蚓的氨基酸含量極高，并且?guī)缀鹾械鞍踪|(zhì)中普遍存在的20種氨基酸，其中具備魚類所需的10種必需氨基酸和非必需氨基酸以及其它水產(chǎn)經(jīng)濟(jì)動(dòng)物、水產(chǎn)名貴動(dòng)物所需的各種必需和非必需氨基酸，與FAO確定的健康食品8種必需氨基酸標(biāo)準(zhǔn)比較可以看出，蚯蚓蛋白是一種優(yōu)質(zhì)蛋白，可以與歐美國家及日本用作食品添加劑的藻藍(lán)蛋白相媲美[17-18]，同時(shí)蚯蚓含有多種營養(yǎng)成分，如豐富的微量元素、多種生物活性酶等，或許正是這些營養(yǎng)成分中的一種或某幾種的共同作用，使得當(dāng)添加適量濃度的蚯蚓時(shí)，可較為明顯地提高草魚肌肉蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值。劉石林等[6]以不同比例的鮮活赤子愛勝蚓和人工飼料配合投喂中國明對(duì)蝦幼蝦實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，隨著蚯蚓投喂量的增加，對(duì)蝦肌肉水解氨基酸的總量以及其中的必需氨基酸、鮮味氨基酸(谷氨酸、天冬門氨酸、甘氨酸、丙氨酸)和促攝食氨基酸(蛋氨酸、賴氨酸、甘氨酸)的含量都呈增加的趨勢(shì)。其次，從草魚肌肉氨基酸的營養(yǎng)評(píng)價(jià)（表5）可以看出，根據(jù)EAAI的評(píng)價(jià)結(jié)果可知，添加一定濃度的蚯蚓和蚯蚓糞提高了草魚肌肉的營養(yǎng)價(jià)值，并且隨著蚯蚓添加量的增加EAAI數(shù)值呈現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，以添加7.5%蚯蚓效果最好；隨著蚯蚓糞濃度的增加EAAI逐漸升高，以添加6%蚯蚓糞時(shí)最高。張昌吉等[19]認(rèn)為，必需氨基酸指數(shù)(EAAI)是評(píng)價(jià)蛋白質(zhì)營養(yǎng)價(jià)值的關(guān)鍵指標(biāo)，它表明了必需氨基酸與標(biāo)準(zhǔn)蛋白質(zhì)相接近的程度，這也在一定程度上表明，添加一定濃度的蚯蚓和蚯蚓糞可提高草魚肌肉蛋白質(zhì)的營養(yǎng)價(jià)值。

4 結(jié)論

添加一定濃度的蚯蚓和蚯蚓糞均有改善草魚肌肉品質(zhì)的趨勢(shì)，以添加7.5%蚯蚓時(shí)效果最好。

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