小型豬特異性麻醉頡頏劑對小型豬血清一氧化氮一氧化氮合酶丙二醛超氧化物歧化酶的影響

姜 勝，于世明，譚麗娟，范宏剛，王洪斌

（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)動物醫(yī)學(xué)學(xué)院，黑龍江 哈爾濱 150030）

經(jīng)過前期研究課題組開發(fā)出小型豬復(fù)合麻醉劑（XFM）［1］，近期課題組又開發(fā)出了以阿替美唑、氟馬西尼、納洛酮等為主要成分的小型豬特異性麻醉頡頏劑，保障XFM的安全性及可控性。本試驗通過檢測小型豬血清一氧化氮（NO）、一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）濃度的變化，判斷小型豬特異性麻醉頡頏劑對機(jī)體的氧化損傷程度，進(jìn)而評價小型豬特異性麻醉頡頏劑對XFM的特異性頡頏效果，以及小型豬復(fù)合麻醉頡頏劑組方的合理性及臨床安全性。

具有高度活性的氧自由基分子不僅能造成蛋白質(zhì)、DNA損傷，誘發(fā)癌癥和囊性纖維化［2-3］，還能誘導(dǎo)脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，使多不飽和脂類發(fā)生裂解，膜結(jié)構(gòu)發(fā)生破壞，導(dǎo)致細(xì)胞功能障礙［4］，并產(chǎn)生能夠反映脂質(zhì)過氧化的程度，且被認(rèn)為是檢測組織過氧化的生物學(xué)指標(biāo)的 MDA［2，5］。不穩(wěn)定自由基 NO，與正超氧陰離子（O-2）作用時可形成過氧化亞硝基陰離子（ONOO-），并進(jìn)而分解為毒性極強(qiáng)的羥自由基（OH-）和 NO-2自由基［6］，在體內(nèi)引起多方面的損害如脂質(zhì)過氧化［7］。SOD是機(jī)體抗脂質(zhì)過氧化酶促防御系統(tǒng)中的一個重要酶，它不僅能有效清除生物氧化產(chǎn)生的超氧陽離子自由基，并有終止自由基鏈鎖反應(yīng)的作用［8］，還能減少 ONOO-形成［9］，故可減輕NO的不利作用。

1 材料與方法

1.1 實驗動物 中國實驗用小型豬14頭，16～18月齡，體重49.8±5.2kg，購于中國農(nóng)業(yè)大學(xué)實驗用小型豬繁育基地，臨床檢查健康，營養(yǎng)狀況良好。

1.2 試驗材料 XFM（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)外科教研室，批號：20100821）；小型豬特異性麻醉頡頏劑（東北農(nóng)業(yè)大學(xué)外科教研室，批號：20100824）。NOS、NO及考馬斯亮藍(lán)蛋白含量測定試劑盒，購自南京建成生物工程研究所；AvantiTM30Centrifuge高速冷凍離心機(jī)、7230分光光度計等。

1.3 試驗方法 14頭小型豬禁食12h，隨機(jī)分為實驗組和對照組，每組7頭。兩組動物麻醉之前均采前腔靜脈空白血（記為0min），采血完成后立即注射XFM并計時。至30 min時，采前腔靜脈血（記為30min），此后試驗組立即注射小型豬特異性麻醉頡頏劑，對照組則注射等量生理鹽水。至1、2、8h和1、3、7d時分別進(jìn)行前腔靜脈采血，并記錄各項生理反射指標(biāo)的恢復(fù)時間，直至兩組動物均能行走為止。采集的血樣室溫靜置1h，3000r／min離心分離血清，置于-80℃冰箱內(nèi)冷凍保存，待檢。

2 試驗結(jié)果

2.1 蘇醒時間 如表1所示，在注射頡頏劑后，試驗組內(nèi)各生物反射指標(biāo)的恢復(fù)時間比對照組短且差異顯著（P＜0.05）。

2.2 抗氧化能力測定結(jié)果 具體結(jié)果見表2。注射麻醉劑后，小型豬血清MDA及SOD呈現(xiàn)無規(guī)則變化，且變化趨勢不明顯（P＞0.05），血清NOS及NO在注射XFM 30min后極明顯降低（P＜0.01），然后逐漸回升，60min后恢復(fù)正常。小型豬在注射XFM頡頏劑后與對照組相比差異不顯著（P＞0.05）。

表1 兩組蘇醒時間比較（n＝7）

表2 抗氧化能力監(jiān)測結(jié)果（n＝7）

3 討論

從蘇醒時間看，本試驗表明，注射頡頏劑后，小型豬生理反射恢復(fù)的時間短，蘇醒效果明顯，能夠達(dá)到較快蘇醒的目的。

許多麻醉藥物的效應(yīng)和毒性均可抑制酶的活性，促使氧自由基、脂質(zhì)過氧化物（Lipid peroxide，LPO）、MDA 等體液因子的釋放增加［10］，因此需要拮抗劑抑制麻醉藥的中樞抑制作用，控制麻醉時間和濃度，逆轉(zhuǎn)麻醉藥的不良作用和對機(jī)體的損傷。從抗氧化結(jié)果看，小型豬血清SOD、MDA指標(biāo)變化均無明顯趨勢，這說明小型豬特異性麻醉頡頏劑沒有產(chǎn)生明顯的過氧化損傷，分析原因可能與納洛酮有一定關(guān)系：國外一些研究顯示，納洛酮在細(xì)胞水平具有抗休克作用，主要是因為其具有穩(wěn)定溶酶體膜，明顯抑制嗜中性粒細(xì)胞釋放O-2的能力［11］，并且體外試驗發(fā)現(xiàn)，納洛酮能抑制脂質(zhì)過氧化反應(yīng)的速率，尤其是可能在鐵離子催化的脂質(zhì)過氧化反應(yīng)中充當(dāng)抗氧化劑［12］。小型豬血清NO及NOS在麻醉后30 min顯著降低，然后逐漸回升，從這一過程中來看與徐瑞芬等［13］報道的全麻能明顯抑制NOS的活性，降低NO的生成這一結(jié)果一致。由此分析，催醒過程中阿替美唑、氟馬西尼、納洛酮等特異性拮抗劑［14］與XFM競爭同一受體，從而拮抗麻醉劑的藥理作用，并沒有引起機(jī)體產(chǎn)生大量自由基，對小型豬的抗氧化能力沒有明顯影響。

4 結(jié)語

綜合試驗結(jié)果表明，小型豬特異性麻醉頡頏劑能夠很好的拮抗XFM麻醉效果，產(chǎn)生較快的蘇醒效果，在催醒過程中對小型豬沒有產(chǎn)生明顯的過氧化損傷，臨床安全性較好。

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