乳腺癌組織中 ER、CerbB-2、XIAP的表達(dá)變化及意義

劉志英，程 華，肖 剛

(唐山婦幼保健院，河北唐山063000)

近年來，青年(≤35歲)乳腺癌的發(fā)病率逐年升高，約占同期乳腺癌的5% ～20%［1］。青年乳腺癌以浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌多見，由于腫瘤分化差，惡性程度高，生物學(xué)行為具有較強(qiáng)的侵襲性，且缺乏典型癥狀，易被忽視。目前青年乳腺癌有較差生物學(xué)行為的機(jī)理未完全闡明，早有觀點(diǎn)認(rèn)為與青年患者激素水平旺盛、對(duì)于內(nèi)分泌治療敏感性差、癌基因擴(kuò)增或過度表達(dá)有關(guān)［2］。也有研究表明認(rèn)為與細(xì)胞凋亡抑制有關(guān)［3］。2007年1月～2012年1月，我們檢測(cè)了96例青年乳腺癌患者(A組)癌組織中的ER、癌基因CerbB-2及X連鎖凋亡蛋白(XIAP)，并與同期住院的88例中老年(年齡≥40歲)乳腺癌患者(B組)進(jìn)行比較，從細(xì)胞凋亡角度探討青年乳腺癌具有更差生物學(xué)行為的可能機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選擇我院2007年1月～2012年1月手術(shù)切除的乳腺癌組織標(biāo)本184例。均經(jīng)病理學(xué)確診。184例患者(均為女性)中，A組96例，年齡23～35歲，中位年齡31.8歲;B組88例，年齡40～73歲，中位年齡52.1歲。兩組術(shù)前均未行放化療。

1.2 主要試劑 鼠抗人ER、CerbB-2單克隆抗體(福建邁新生物公司)，兔抗人XIAP單克隆抗體及免疫組織化學(xué)試劑盒(上海天呈生物用品超市)。

1.3 ER、CerbB-2、XIAP檢測(cè) ①染色方法:取其石蠟切片，采用免疫組織化學(xué)SP法染色。按試劑盒說明書操作。用已知的陽(yáng)性切片作為陽(yáng)性對(duì)照，用PBS作為陰性對(duì)照。②結(jié)果判定:所有陽(yáng)性表達(dá)均呈棕黃色顯色。ER陽(yáng)性反應(yīng)位于細(xì)胞核，以細(xì)胞核染成棕黃色為ER陽(yáng)性細(xì)胞;CerbB-2陽(yáng)性反應(yīng)位于細(xì)胞膜，呈棕黃色均勻細(xì)顆粒;XIAP陽(yáng)性反應(yīng)位于細(xì)胞質(zhì)，細(xì)胞質(zhì)著棕黃色為XIAP陽(yáng)性細(xì)胞。根據(jù)陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)和著色深度計(jì)分，每例均隨機(jī)計(jì)數(shù)5個(gè)高倍視野(×400)，確定其每個(gè)視野的陽(yáng)性率，取均數(shù)。陽(yáng)性細(xì)胞≤5%為0分，6% ～25%為1分，26%～50%為2分，51% ～75%為3分，＞75%為4分;陽(yáng)性細(xì)胞著色程度:基本不著色為0分，黃色為1分，棕黃色為2分，棕褐色為3分。將兩項(xiàng)積分相乘:≥1為陽(yáng)性，＜1為陰性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS11.0統(tǒng)計(jì)軟件。率的比較用χ2檢驗(yàn)，相關(guān)性分析用Sperman等級(jí)相關(guān)分析。P≤0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組ER、CerbB-2、XIAP的表達(dá)情況 見表1。從表1可見，A組癌組織中ER表達(dá)水平明顯低于B組，CerbB-2和XIAP表達(dá)水平明顯高于B組，P＜0.05或 ＜0.01。

表1 兩組ER、CerbB-2、XIAP陽(yáng)性表達(dá)結(jié)果

2.2 青年乳腺癌組織中ER、CerbB-2、XIAP表達(dá)的相關(guān)性 青年乳腺癌組織中CerbB-2、ER均陽(yáng)性表達(dá)者42例，CerbB-2呈陽(yáng)性表達(dá)、ER呈陰性表達(dá)者18例，CerbB-2、ER均呈陰性表達(dá)者36例，CerbB-2呈陰性表達(dá)、ER呈陽(yáng)性表達(dá)者0例，ER與CerbB-2表達(dá)呈負(fù)相關(guān)(rs= －0.79，P ＜0.05);ER、CerbB-2與 XIAP 表達(dá)沒有相關(guān)性(rs分別為 －0.23、0.15，P均 ＞0.05)，見表2。

表2 青年乳腺癌組織中ER、CerbB-2、XIAP表達(dá)相關(guān)性結(jié)果(例)

3 討論

乳腺癌是女性排名第一的常見惡性腫瘤，也是危害婦女健康的主要惡性腫瘤之一，全世界每年約有120萬婦女發(fā)生乳腺癌，50萬婦女死于乳腺癌。近年來我國(guó)的乳腺癌發(fā)病率一直呈上升趨勢(shì)發(fā)展且逐漸年輕化。青年乳腺癌是指年齡≤35歲乳腺癌患者，一般認(rèn)為其生物學(xué)行為具有較強(qiáng)的侵襲性、惡性程度高、預(yù)后差的特點(diǎn)［4］，可能與青年新陳代謝旺盛、激素水平高、對(duì)于內(nèi)分泌治療敏感性差有關(guān)，亦與癌基因擴(kuò)增或過度表達(dá)有關(guān)［5］。

ER是位于乳腺上皮細(xì)胞內(nèi)的具有特定生理功能的蛋白質(zhì)，雌激素通過ER對(duì)乳腺細(xì)胞功能進(jìn)行調(diào)節(jié)，因此對(duì)ER陽(yáng)性乳腺癌患者進(jìn)行抗雌激素治療可以獲得不低于化療的效果［6］。目前乳腺癌患者的雌激素受體ER水平作為內(nèi)分泌治療和判斷預(yù)后的一個(gè)重要的生物學(xué)指標(biāo)已被人們認(rèn)可［7］，其表達(dá)水平降低提示內(nèi)分泌治療差且預(yù)后不良。

CerbB-2是一種細(xì)胞來源的癌基因，1987年Slamon等［8］在對(duì)189例原發(fā)性乳腺癌的研究中，首先發(fā)現(xiàn)了CerbB-2擴(kuò)增和乳腺癌預(yù)后不良呈正相關(guān)，隨后的多項(xiàng)研究進(jìn)一步證實(shí)，CerbB-2基因過表達(dá)的乳腺癌患者表現(xiàn)為病情進(jìn)展迅速，術(shù)后化療緩解期短，易對(duì)三苯氧胺等藥物及化療耐藥，且易于發(fā)生淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移，故CerbB-2作為乳腺癌預(yù)后判斷的一項(xiàng)獨(dú)立因子已經(jīng)基本被公認(rèn)［6］。

本研究發(fā)現(xiàn)，ER在青年乳腺癌患者中的表達(dá)明顯低于中老年乳腺癌患者，而CerbB-2的表達(dá)卻明顯高于中老年乳腺癌患者，ER與CerbB-2表達(dá)呈負(fù)相關(guān)關(guān)系，提示CerbB-2的過表達(dá)可能制約了ER，這與國(guó)內(nèi)外報(bào)道一致［9］，證明我們所選取的研究對(duì)象具有普遍性。

XIAP是新近發(fā)現(xiàn)的一種凋亡抑制蛋白，是IAP家族中的主要成員，作為IAP家族中最強(qiáng)的凋亡抑制因子，它可直接抑制含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶(Caspases)［10］，而后者是一組存在于細(xì)胞質(zhì)中具有類似結(jié)構(gòu)的蛋白酶，負(fù)責(zé)選擇性地切割某些蛋白質(zhì)，造成細(xì)胞的凋亡［11］。XIAP就是通過對(duì)Caspases的抑制，進(jìn)而阻抑細(xì)胞的凋亡，并可多途徑調(diào)節(jié)細(xì)胞的凋亡［12］。XIAP基因在大多數(shù)的腫瘤細(xì)胞株中均過表達(dá)，其表達(dá)與腫瘤的發(fā)生發(fā)展、復(fù)發(fā)、預(yù)后以及腫瘤化療的耐藥密切相關(guān)［10］。本研究結(jié)果顯示，A組96例青年乳腺癌組織中XIAP陽(yáng)性表達(dá)75例(78.1%);B組88例中老年乳腺癌組織中，XIAP陽(yáng)性表達(dá)48例(54.5%)，青年乳腺癌 XIAP的陽(yáng)性表達(dá)明顯高于中老年乳腺癌，證明高度表達(dá)XIAP的青年乳腺癌患者，其腫瘤細(xì)胞具有很強(qiáng)的抗凋亡能力，XIAP在一定程度上可削弱和(或)阻斷腫瘤細(xì)胞的凋亡［13］，同時(shí)我們還發(fā)現(xiàn) ER、CerbB-2與XIAP并無相關(guān)性，說明XIAP可能作為腫瘤細(xì)胞的一個(gè)獨(dú)立性保護(hù)性因子而發(fā)揮作用，從細(xì)胞凋亡的角度進(jìn)一步證實(shí)了青年乳腺癌患者具有更差生物學(xué)行為的原因。

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