BMY牛血細(xì)胞研究

張繼才，和占星，金顯棟，楊世平，付美芬，楊 凱，王安奎，黃必志，何永珍

（云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院，云南 昆明 650212）

BMY牛是云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院為解決云南黃牛體型較小、早期生長(zhǎng)速度慢、個(gè)體產(chǎn)肉率低和云南省大部分地區(qū)體外寄生蟲(chóng)（特別是牛蜱）危害嚴(yán)重的實(shí)際問(wèn)題，借鑒國(guó)外成功的育種經(jīng)驗(yàn)，以適應(yīng)性強(qiáng)的云南黃牛為母本、國(guó)外引進(jìn)的產(chǎn)肉性能好（墨累灰）、體型大、又能適應(yīng)熱帶、亞熱帶環(huán)境并有較強(qiáng)的抗蜱能力（婆羅門(mén)和沙希華）的優(yōu)良肉牛品種為父本進(jìn)行的雜交選育。經(jīng)30年的嚴(yán)格選種選配，BMY牛的血液組合為：1／2婆羅門(mén)（Brahman）＋1／4墨累灰 （Murray Grey）＋1／4云南黃牛（Yunnan Yellow Cattle）［1］，具有良好的產(chǎn)肉性能，24月齡平均屠宰率為61% ，凈肉率為49.7% ，優(yōu)質(zhì)肉占凈肉的60.99%［2］。大量的生產(chǎn)統(tǒng)計(jì)資料和研究結(jié)果表明，BMY牛具有性早熟和繁殖性能優(yōu)良的優(yōu)點(diǎn)［1，3］。

借著國(guó)家肉牛牦牛產(chǎn)技術(shù)體系建設(shè)的東風(fēng)，云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院加大了BMY牛的擴(kuò)繁選育和雜交改良力度，BMY種公牛及凍精的需求逐年增加，極大的促進(jìn)了云南本地黃牛改良進(jìn)程，取得了較好的社會(huì)效益和經(jīng)濟(jì)效益。本研究的目的是通過(guò)對(duì)不同生長(zhǎng)階段健康BMY牛主要血液生理指標(biāo)的測(cè)定，為今后檢測(cè)BMY牛的健康狀況和科學(xué)飼養(yǎng)BMY牛提供科學(xué)依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試動(dòng)物

選擇云南省草地動(dòng)物科學(xué)研究院小哨示范牧場(chǎng)的不同生長(zhǎng)階段的BMY牛，要求系譜清楚、出生計(jì)錄清晰、膘情中等、臨床健康。4～6月斷乳犢牛10頭；12～16月齡育成牛10頭；36月齡牛10頭，大于4歲的10頭，計(jì)40頭。

1.2 采樣前的準(zhǔn)備

供試牛只在采血前12h禁食。準(zhǔn)備好消毒用的酒精棉球、注射器、采血管。

1.3 血樣的采集

牛只保定后用酒精棉球?qū)Σ裳课贿M(jìn)行消毒，每頭牛用一次性塑料10mL注射器采集頸靜脈或尾靜脈血10mL，分別注入含促凝劑的采血管5 mL、含肝素鋰的采血管3～4mL和含EDTA的采血管1～2mL，存放入含有冰袋的塑料泡沫箱或疫苗保存箱內(nèi)送檢。要求：第一頭與最后一頭的采血時(shí)間隔不超過(guò)2h，4h內(nèi)送到檢驗(yàn)室。

1.4 檢測(cè)儀器

全自動(dòng)血液分析儀，廠家：日本希森美康（Sysmex）株式會(huì)社生產(chǎn)，型號(hào)：XB－2 100，每小時(shí)可完成對(duì)150個(gè)樣本的檢測(cè)。

1.5 主要測(cè)定內(nèi)容

白細(xì)胞（WBC）、中性粒細(xì)胞比（NEUT%）、淋巴細(xì)胞比（LYM%）、單核細(xì)胞比（MONO%、MID）、嗜酸細(xì)胞比（E%）、嗜堿細(xì)胞比（BASO%）、中性粒細(xì)胞絕對(duì)值（NEUT＃）、淋巴細(xì)胞絕對(duì)值（LYM＃）單核細(xì)胞絕對(duì)值（MONO＃）、嗜酸細(xì)胞絕對(duì)值勤（E＃）嗜堿細(xì)胞絕對(duì)值（BASO＃）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（HGB）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、紅細(xì)胞平均體積（MCV）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量（MCH）、平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度（MCHC）、紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)（RDW－CV）、紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差（RDW－SD）、血小板（PLT）、血小板壓積（PCT）、血小板分布寬度（PDW）平均血小板體積（MPC）和大血小板比率（PLCR）等指標(biāo)。

測(cè)定要求：樣品一進(jìn)試驗(yàn)室即進(jìn)行檢測(cè)，在1h內(nèi)完成所有樣品的檢測(cè)。

1.6 數(shù)據(jù)處理

所有測(cè)量數(shù)據(jù)采用平均數(shù)（珚X）±標(biāo)準(zhǔn)差（SD）表示，利用SPSS13.0軟件分析。

2 結(jié)果

從不同年齡階段牛只血常規(guī)檢測(cè)結(jié)果看，白細(xì)胞數(shù)以4～6月齡斷乳犢牛的最高，平均為22.56×109／L，隨著年齡的增長(zhǎng)逐漸降低，超過(guò)4歲后，平均為12.16×109／L，斷乳組與其它三組差異顯著。全血的單核細(xì)胞比在不同生長(zhǎng)時(shí)期的差異不明顯，但成年牛與犢牛差異顯著，而單核細(xì)胞絕對(duì)值則相反以斷乳牛最高，成年牛最低。嗜堿細(xì)胞的百分比和絕對(duì)值在不同生長(zhǎng)階段變化差異不明顯。紅細(xì)胞數(shù)以斷乳牛最高，平均達(dá)9.26×1012／L，隨著年齡增長(zhǎng)逐漸減少。不同生長(zhǎng)階段的血紅蛋白和紅細(xì)胞壓積變化不明顯。紅細(xì)胞體積、平均紅細(xì)胞血紅蛋白量，隨著年齡增長(zhǎng)而逐漸升高，平均紅細(xì)胞血紅蛋白量與紅細(xì)胞體積呈正相關(guān)。不同生長(zhǎng)階段間的平均紅細(xì)胞血紅蛋白濃度變化不明顯，隨年齡增長(zhǎng)而逐漸減少。不同生長(zhǎng)階段間的紅細(xì)胞分布寬度變異系數(shù)差異不明顯，而紅細(xì)胞分布寬度標(biāo)準(zhǔn)差，隨牛只年齡的增長(zhǎng)而逐漸變大。血小板數(shù)隨年齡增加逐漸升高，到4歲時(shí)達(dá)最高，以后逐漸減少。在不同年齡階段牛全血中，中性粒細(xì)胞、淋巴細(xì)胞和嗜酸細(xì)胞的百分比和絕對(duì)值相對(duì)低于嗜堿細(xì)胞、單核細(xì)胞百分比和絕對(duì)值，大部分樣品機(jī)器幾乎分辨不出。具體變化情況見(jiàn)下表1。

表1 不同年齡BMY牛網(wǎng)織紅細(xì)胞檢測(cè)結(jié)果

3 討論

在正常生理情況下，血細(xì)胞和血小板有一定的形態(tài)結(jié)構(gòu)，白細(xì)胞總數(shù)及各種白細(xì)胞的百分比相對(duì)穩(wěn)定的數(shù)量。在病理情況下，血細(xì)胞數(shù)量、形態(tài)結(jié)構(gòu)、比例將不同程度的發(fā)生變化，因此檢查血細(xì)胞數(shù)量及分類(lèi)計(jì)數(shù)是輔助診斷疾病的一種重要方法，也是判斷病情及疾病轉(zhuǎn)歸的一個(gè)重要手段。以上的分析結(jié)果表明，同一品種在不同生長(zhǎng)階段，其血液生理常值也有稍微的變化。有研究表明，即使是同一個(gè)體在不同生理階段、時(shí)間，其血液生理常值也有變化，因此進(jìn)行血常規(guī)分析時(shí)應(yīng)盡量保持在平靜狀態(tài)下，在相同的時(shí)間段內(nèi)檢查，其結(jié)果才更具參考價(jià)值和可比性。在本次研究中各階段供試牛是根據(jù)生產(chǎn)記錄經(jīng)過(guò)嚴(yán)格篩選出來(lái)，并進(jìn)行了統(tǒng)一管理，保證了牛只間的條件基本一致，同時(shí)，也對(duì)采血和檢測(cè)進(jìn)行了嚴(yán)格的要求，所以，本次的測(cè)定結(jié)果應(yīng)該是科學(xué)的。

在不同年齡階段血細(xì)胞的各項(xiàng)指標(biāo)中，WBC、RBC隨牛只年齡增加而降低，WBC以犢牛組最高，4歲牛組最低，犢牛組與其它三組有顯著差異，RBC以1～1.5歲青年牛組最高，各組間的差異不顯著。PLT、MCH、MCV隨牛只年齡增加而升高，PLT以4歲牛組最高，與犢牛組差異顯著。少數(shù)指標(biāo)在不同年齡階段間波動(dòng)。BMY牛的 WBC、RBC、PLT、MCV、MCH、MCHC等指標(biāo)的變化結(jié)果與楊炳狀［4］、崔燕［5］等的研究結(jié)果相似，主要是血細(xì)胞來(lái)源于骨髓細(xì)胞，在犢牛、青年牛階段，骨髓造血功能旺盛、牛只新陳代謝快，導(dǎo)致?tīng)倥５?WBC、RBC顯著高于成年牛。與黑白花奶牛［6］、牦牛［7］相比成年BMY牛的 WBC、RBC、HGB、MCH、MCHC等值均高于奶牛和牦牛，這可能是BMY牛繼承了云南黃牛適應(yīng)性強(qiáng)的優(yōu)良性狀，在生產(chǎn)實(shí)際中BMY牛能適應(yīng)海拔500～3000m的不同氣候類(lèi)型，且能保持較好生產(chǎn)和繁殖性能。

在所檢測(cè)的指標(biāo)中，大多數(shù)以4歲BMY牛的指標(biāo)為最高，或間于1～1.5歲和大于4歲牛間，說(shuō)明在4歲左右時(shí)BMY牛的抗病能力好、機(jī)體代謝旺盛。在相同年齡階段的BMY牛的多數(shù)血細(xì)胞指標(biāo)的變異系數(shù)小于30%，說(shuō)明這些指標(biāo)在相同年齡段的個(gè)體中基本穩(wěn)定，可作為BMY牛判斷健康和科學(xué)飼養(yǎng)的參考依據(jù)。

4 結(jié)論

本次檢測(cè)的多數(shù)指標(biāo)的變化趨勢(shì)與楊炳壯等的研究結(jié)果相符，多數(shù)檢測(cè)指標(biāo)的變異系數(shù)均小于40%，各項(xiàng)指標(biāo)均未超出正常值，檢測(cè)結(jié)果可靠，可為今后BMY牛的飼養(yǎng)和疾病診斷提供參考依據(jù)。

［1］ 張繼才.BMY牛簡(jiǎn)介［J］.中國(guó)牛業(yè)科學(xué)，2009，35（5）：97－98.

［2］ 楊國(guó)榮等.BMY熱帶肉牛的繁殖性能研究黃牛同期發(fā)情試驗(yàn)［J］.河南農(nóng)業(yè)科學(xué)，2003，32（8）：65－66.

［3］ 楊國(guó)榮，張 勇，張繼才，等.熱帶亞熱帶BMY牛的繁殖性狀研究［J］.中國(guó)牛業(yè)科學(xué)，2006，32（3）：56－69.

［4］ 楊炳壯，梁賢威，文秋燕，等.雜交水牛不同生長(zhǎng)階段主要血液生理生化指標(biāo)的測(cè)定［J］.中國(guó)草食動(dòng)物，2005，25（4）：23－25.

［5］ 崔 燕.不同年齡牦牛若干生理指標(biāo)測(cè)定［J］.中國(guó)獸醫(yī)科技，1998，28（4）：7－9.

［6］ （美）威廉C.雷布漢.奶牛疾病學(xué)［M］.北京：中國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)出版，1999，4.

［7］ 張學(xué)舜，肖開(kāi)進(jìn)，陶 利，等.中國(guó)牦牛生理生化指標(biāo)系統(tǒng)測(cè)定和研究的綜合報(bào)告［J］.中國(guó)牦牛，1994，（3）：12－25.