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    麗江瑪咖不同提取物對(duì)小鼠性行為及性激素的影響

    2012-08-03 13:43:44薛潤(rùn)光顧鑒秋
    云南中醫(yī)中藥雜志 2012年9期
    關(guān)鍵詞:睪丸酮正丁醇交配

    曹 東,薛潤(rùn)光,顧鑒秋

    (1.云南中醫(yī)學(xué)院,云南 昆明 650500;2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所,云南 麗江 674100)

    瑪咖(Maca)屬于十字花科植物瑪咖獨(dú)行菜(Lepidium meyenii Walp.)一年生草本植物,原產(chǎn)于秘魯海拔3500m以上的安第斯山區(qū)。數(shù)千年來,作為當(dāng)?shù)赝林用竦闹匾澄飦碓粗?,因其具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用功效,尤其是在增強(qiáng)精力和生育力等方面的功能,被人們視為安第斯山神賜予的珍貴禮物。以瑪咖為主要原料的保健品受到了世界各國(guó)的廣泛青睞。秘魯瑪咖主要含瑪咖酰胺、瑪咖烯、生物堿、芥子油苷、揮發(fā)油成分、類固醇物質(zhì)及多種氨基酸,藥理研究表明,秘魯瑪咖能增強(qiáng)雄性性行為及增加精子數(shù)量,抗應(yīng)激,調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、提高免疫、抗腫瘤、預(yù)防前列腺肥大、抗骨質(zhì)疏松及增強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)等作用[1~2]。我省麗江和會(huì)澤兩地因海拔和地理環(huán)境與瑪咖原產(chǎn)地相似,瑪咖的種植已獲得成功[3],云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所在海拔4000m左右的麗江高山地區(qū),于2003年引種瑪咖成功,至今已有8年的歷史,目前麗江瑪咖已有片劑、酒等上市,但其生藥學(xué)、化學(xué)、藥理等基礎(chǔ)研究,仍屬空白。本實(shí)驗(yàn)用麗江瑪咖為原料,篩選其增強(qiáng)雄性動(dòng)物性行為的主要活性部位,為進(jìn)一步深入研究其化學(xué)成分和藥效之間的相關(guān)性,為開發(fā)利用麗江瑪咖打基礎(chǔ)。

    1 材料

    1.1 藥物與試劑 麗江瑪咖(Lepidium meyenii Walp.)飲片,由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所提供;麗江瑪咖石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提取物,自制;萬艾可:輝瑞制藥有限公司,批號(hào):95883011;復(fù)方鎖陽口服液(每毫升相當(dāng)于生藥0.6g),由陜西關(guān)愛制藥有限公司提供(批號(hào):20081101);苯甲酸雌二醇,上海通用藥業(yè)股份有限公司,批號(hào):090502;石油醚,分析純,廣東華光化學(xué)廠有限公司,批號(hào):20090911;乙酸乙酯,分析純,上海申博化工有限公司,批號(hào):00912001;正丁醇,分析純,上海申博化工有限公司,批號(hào):090706101;睪丸酮試劑盒,北京北方生物技術(shù)研究所,批號(hào):110120;雌二醇試劑盒,北京北方生物技術(shù)研究所,批號(hào):110120。

    1.2 儀器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀:A-1000S日本EYELA公司;AUW220型電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司);LG-2.4A高速離心機(jī),北京醫(yī)用離心機(jī)廠;微量移液器,上海大龍醫(yī)療設(shè)備有限公司;SN-695B型智能放免γ測(cè)量?jī)x,上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠。

    1.3 動(dòng)物 昆明種小鼠,清潔級(jí),雌雄各半,體重18~22g,四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所動(dòng)合格證號(hào):SCXK(川)2008-14;

    2 方法

    2.1 對(duì)雄性小鼠性行為的影響 參照文獻(xiàn)方法[4],選擇雄性性成熟小鼠正常飼養(yǎng),隨機(jī)分為對(duì)照組(0.9%生理鹽水)、萬艾可組(0.013g/kg)、復(fù)方鎖陽口服液組(12g生藥/kg)、石油醚提取物組(13g生藥/kg)、乙酸乙酯提取物組(13g生藥/kg)、正丁醇提取物組(13g生藥/kg)、水提取物組(13g生藥/kg),除萬艾可組于試驗(yàn)前1h灌胃給藥外,其余各組均連續(xù)灌胃給藥28d,灌胃容積均為0.2mL/10g。實(shí)驗(yàn)前48h雌鼠皮下注射苯甲酸雌二醇(0.02mg/只),使動(dòng)情期相同,試驗(yàn)于晚上7~11時(shí)進(jìn)行,將雄性小鼠單獨(dú)放入籠中(55cm×35cm×20cm)5min,使其適應(yīng)環(huán)境,然后每籠加入1只雌鼠,觀察記錄捕捉潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次捕捉雌鼠的時(shí)間)、20min內(nèi)雄鼠捕捉雌鼠的次數(shù)、交配潛伏期(自雌鼠投入至雄鼠第1次與雌鼠交配的時(shí)間)、20min內(nèi)交配次數(shù),結(jié)果見表1。

    2.2 對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇的影響 行為學(xué)指標(biāo)測(cè)定后,各組雄鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉,眼部取血,3000r/min,離心15min,取上清液,-20℃分裝冷藏,用SN-695B型智能放免γ測(cè)量?jī)x測(cè)定血清睪丸酮,雌二醇含量,采用放射免疫試劑盒測(cè)定,操作依照試劑盒說明書,結(jié)果見表2。

    3 結(jié)果

    3.1 對(duì)雄性小鼠性行為的影響 見表1。

    表1 麗江瑪咖不同提取物對(duì)雄性小鼠性行為的影響(±s,n=10)

    表1 麗江瑪咖不同提取物對(duì)雄性小鼠性行為的影響(±s,n=10)

    注:與對(duì)照組比較,*P<0.05,**P<0.01

    0對(duì)照組 13136.2±14.148.4±2.17 316.2±15.674.1±1.5萬艾可組 0.01395.0±12.15** 12.4±1.65** 252.5±20.57* 8.0±1.41*復(fù)方鎖陽口服液 12121.2±9.24* 11.3±1.84* 283.2±9.87* 7.4±1.18*石油醚提取物組 13132.8±14.948.9±1.73 322.2±13.834.8±13.98乙酸乙酯提取物組 13131.0±12.648.7±1.57 316.0±15.294.4±1.07正丁醇提取物組 13120.6±9.97* 10.5±1.72* 301.5±10.31* 6.5±1.27*水提取物組 13122.7±11.30*10.7±1.49* 296.7±13.44* 6.9±0.99*

    試驗(yàn)結(jié)果表明,麗江瑪咖石油醚、乙酸乙酯提取物對(duì)雄性小鼠捕捉潛伏期、捕捉次數(shù)、交配潛伏期、交配次數(shù)均無明顯影響,與對(duì)照組比較,經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P>0.05,差異無顯著性意義;麗江瑪咖正丁醇提取物能縮短雄性小鼠捕捉潛伏期(P<0.05),增 加 捕 捉 次 數(shù) (P<0.05),縮 短 交 配 潛 伏 期(P<0.05),能明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)(P<0.01);水提取物能明顯縮短雄性小鼠捕捉潛伏期(P<0.05),增加捕捉次數(shù)(P<0.05),能明顯縮短交配潛伏期(P<0.05),明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)(P<0.01);陽性對(duì)照藥萬艾可能明顯縮短雄性小鼠捕捉潛伏期、明顯增加捕捉次數(shù)、顯著縮短交配潛伏期、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù),經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理,P<0.01,差異有非常顯著性意義,復(fù)方鎖陽口服液也能縮短雄性小鼠捕捉潛伏期(P<0.05),增加捕捉次數(shù)(P<0.05),縮短交配潛伏期(P<0.05)、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)(P<0.01)。

    3.1 對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇的影響 見表2。

    表2 麗江瑪咖不同提取物對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇的影響(±s,n=10)

    表2 麗江瑪咖不同提取物對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇的影響(±s,n=10)

    注:與對(duì)照組比較,*P<0.05

    組別 劑量(g/kg) 睪丸酮含量(ng/dl) 雌二醇含量(pg/ml)13 11.05±2.33 8.45±2.89復(fù)方鎖陽口服液 12 16.48±4.67* 7.65±2.17石油醚提取物組 13 11.09±1.78 8.63±2.98乙酸乙酯提取物組 13 11.28±2.15 7.82±2.0正丁醇提取物組 13 11.96±2.10 8.46±2.48水提取物組對(duì)照組13 12.06±2.12 7.90±1.89

    試驗(yàn)結(jié)果表明,麗江瑪咖四種提取物對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇含量均無明顯影響,復(fù)方鎖陽口服液灌胃28d,可升高雄性小鼠血清睪丸酮含量(P<0.05),對(duì)雌二醇含量無明顯影響。

    4 討論

    本次試驗(yàn)結(jié)果表明,麗江瑪咖四種提取物中,正丁醇和水提取物能明顯提高雄性小鼠性行為,對(duì)捕捉潛伏期、捕捉次數(shù)、交配潛伏期、交配次數(shù)均有明顯影響,而石油醚、乙酸乙酯提取物對(duì)所有指標(biāo)均無明顯影響,說明麗江瑪咖正丁醇和水提取物是其增強(qiáng)性行為的活性物質(zhì),為進(jìn)一步研究麗江瑪咖的化學(xué)與藥效的相關(guān)性打基礎(chǔ)。但麗江瑪咖四種提取物對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇含量均無明顯影響,說明其增強(qiáng)性行為的作用與性激素調(diào)節(jié)無關(guān),作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

    [1]肖偉 .秘魯特產(chǎn)藥用植物瑪卡研究的新進(jìn)展[J].世界科學(xué)技術(shù)—中醫(yī)藥現(xiàn)代化,2007,9(3):102~103.

    [2]金文聞 .藥食兩用植物瑪咖(Lepidium meyenii)的功效物質(zhì)研究[C].華中科技大學(xué)博士論文:1~5.

    [3]李培清 .會(huì)澤縣引進(jìn)美國(guó)特種中藥材——瑪卡試驗(yàn)成功[J].云南科技管理 .2006;(3):75.

    [4]楊菊 .西地那非衍生物對(duì)雄性家兔和小鼠性行為的影響研究[J].中國(guó)藥房 .2007;18;(16).

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