麗江瑪咖不同提取物對(duì)小鼠性行為及性激素的影響

曹 東，薛潤(rùn)光，顧鑒秋

（1.云南中醫(yī)學(xué)院，云南 昆明 650500；2.云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所，云南 麗江 674100）

瑪咖（Maca）屬于十字花科植物瑪咖獨(dú)行菜（Lepidium meyenii Walp.）一年生草本植物，原產(chǎn)于秘魯海拔3500m以上的安第斯山區(qū)。數(shù)千年來，作為當(dāng)?shù)赝林用竦闹匾澄飦碓粗?，因其具有豐富的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和藥用功效，尤其是在增強(qiáng)精力和生育力等方面的功能，被人們視為安第斯山神賜予的珍貴禮物。以瑪咖為主要原料的保健品受到了世界各國(guó)的廣泛青睞。秘魯瑪咖主要含瑪咖酰胺、瑪咖烯、生物堿、芥子油苷、揮發(fā)油成分、類固醇物質(zhì)及多種氨基酸，藥理研究表明，秘魯瑪咖能增強(qiáng)雄性性行為及增加精子數(shù)量，抗應(yīng)激，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌、提高免疫、抗腫瘤、預(yù)防前列腺肥大、抗骨質(zhì)疏松及增強(qiáng)營(yíng)養(yǎng)等作用［1～2］。我省麗江和會(huì)澤兩地因海拔和地理環(huán)境與瑪咖原產(chǎn)地相似，瑪咖的種植已獲得成功［3］，云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所在海拔4000m左右的麗江高山地區(qū)，于2003年引種瑪咖成功，至今已有8年的歷史，目前麗江瑪咖已有片劑、酒等上市，但其生藥學(xué)、化學(xué)、藥理等基礎(chǔ)研究，仍屬空白。本實(shí)驗(yàn)用麗江瑪咖為原料，篩選其增強(qiáng)雄性動(dòng)物性行為的主要活性部位，為進(jìn)一步深入研究其化學(xué)成分和藥效之間的相關(guān)性，為開發(fā)利用麗江瑪咖打基礎(chǔ)。

1 材料

1.1 藥物與試劑 麗江瑪咖（Lepidium meyenii Walp.）飲片，由云南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院高山經(jīng)濟(jì)植物研究所提供；麗江瑪咖石油醚、乙酸乙酯、正丁醇和水提取物，自制；萬艾可：輝瑞制藥有限公司，批號(hào)：95883011；復(fù)方鎖陽口服液（每毫升相當(dāng)于生藥0.6g），由陜西關(guān)愛制藥有限公司提供（批號(hào)：20081101）；苯甲酸雌二醇，上海通用藥業(yè)股份有限公司，批號(hào)：090502；石油醚，分析純，廣東華光化學(xué)廠有限公司，批號(hào)：20090911；乙酸乙酯，分析純，上海申博化工有限公司，批號(hào)：00912001；正丁醇，分析純，上海申博化工有限公司，批號(hào)：090706101；睪丸酮試劑盒，北京北方生物技術(shù)研究所，批號(hào)：110120；雌二醇試劑盒，北京北方生物技術(shù)研究所，批號(hào)：110120。

1.2 儀器 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀：A－1000S日本EYELA公司；AUW220型電子天平（上海精密科學(xué)儀器有限公司）；LG－2.4A高速離心機(jī)，北京醫(yī)用離心機(jī)廠；微量移液器，上海大龍醫(yī)療設(shè)備有限公司；SN－695B型智能放免γ測(cè)量?jī)x，上海原子核研究所日環(huán)儀器一廠。

1.3 動(dòng)物 昆明種小鼠，清潔級(jí)，雌雄各半，體重18～22g，四川省醫(yī)學(xué)科學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物研究所動(dòng)合格證號(hào)：SCXK（川）2008－14；

2 方法

2.1 對(duì)雄性小鼠性行為的影響 參照文獻(xiàn)方法［4］，選擇雄性性成熟小鼠正常飼養(yǎng)，隨機(jī)分為對(duì)照組（0.9%生理鹽水）、萬艾可組（0.013g／kg）、復(fù)方鎖陽口服液組（12g生藥／kg）、石油醚提取物組（13g生藥／kg）、乙酸乙酯提取物組（13g生藥／kg）、正丁醇提取物組（13g生藥／kg）、水提取物組（13g生藥／kg），除萬艾可組于試驗(yàn)前1h灌胃給藥外，其余各組均連續(xù)灌胃給藥28d，灌胃容積均為0.2mL／10g。實(shí)驗(yàn)前48h雌鼠皮下注射苯甲酸雌二醇（0.02mg／只），使動(dòng)情期相同，試驗(yàn)于晚上7～11時(shí)進(jìn)行，將雄性小鼠單獨(dú)放入籠中（55cm×35cm×20cm）5min，使其適應(yīng)環(huán)境，然后每籠加入1只雌鼠，觀察記錄捕捉潛伏期（自雌鼠投入至雄鼠第1次捕捉雌鼠的時(shí)間）、20min內(nèi)雄鼠捕捉雌鼠的次數(shù)、交配潛伏期（自雌鼠投入至雄鼠第1次與雌鼠交配的時(shí)間）、20min內(nèi)交配次數(shù)，結(jié)果見表1。

2.2 對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇的影響 行為學(xué)指標(biāo)測(cè)定后，各組雄鼠用10%水合氯醛腹腔注射麻醉，眼部取血，3000r／min，離心15min，取上清液，－20℃分裝冷藏，用SN－695B型智能放免γ測(cè)量?jī)x測(cè)定血清睪丸酮，雌二醇含量，采用放射免疫試劑盒測(cè)定，操作依照試劑盒說明書，結(jié)果見表2。

3 結(jié)果

3.1 對(duì)雄性小鼠性行為的影響 見表1。

表1 麗江瑪咖不同提取物對(duì)雄性小鼠性行為的影響（±s，n＝10）

表1 麗江瑪咖不同提取物對(duì)雄性小鼠性行為的影響（±s，n＝10）

注：與對(duì)照組比較，＊P＜0.05，＊＊P＜0.01

0對(duì)照組 13136.2±14.148.4±2.17 316.2±15.674.1±1.5萬艾可組 0.01395.0±12.15＊＊ 12.4±1.65＊＊ 252.5±20.57＊ 8.0±1.41＊復(fù)方鎖陽口服液 12121.2±9.24＊ 11.3±1.84＊ 283.2±9.87＊ 7.4±1.18＊石油醚提取物組 13132.8±14.948.9±1.73 322.2±13.834.8±13.98乙酸乙酯提取物組 13131.0±12.648.7±1.57 316.0±15.294.4±1.07正丁醇提取物組 13120.6±9.97＊ 10.5±1.72＊ 301.5±10.31＊ 6.5±1.27＊水提取物組 13122.7±11.30＊10.7±1.49＊ 296.7±13.44＊ 6.9±0.99＊

試驗(yàn)結(jié)果表明，麗江瑪咖石油醚、乙酸乙酯提取物對(duì)雄性小鼠捕捉潛伏期、捕捉次數(shù)、交配潛伏期、交配次數(shù)均無明顯影響，與對(duì)照組比較，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P＞0.05，差異無顯著性意義；麗江瑪咖正丁醇提取物能縮短雄性小鼠捕捉潛伏期（P＜0.05），增 加 捕 捉 次 數(shù) （P＜0.05），縮 短 交 配 潛 伏 期（P＜0.05），能明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)（P＜0.01）；水提取物能明顯縮短雄性小鼠捕捉潛伏期（P＜0.05），增加捕捉次數(shù)（P＜0.05），能明顯縮短交配潛伏期（P＜0.05），明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)（P＜0.01）；陽性對(duì)照藥萬艾可能明顯縮短雄性小鼠捕捉潛伏期、明顯增加捕捉次數(shù)、顯著縮短交配潛伏期、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，P＜0.01，差異有非常顯著性意義，復(fù)方鎖陽口服液也能縮短雄性小鼠捕捉潛伏期（P＜0.05），增加捕捉次數(shù)（P＜0.05），縮短交配潛伏期（P＜0.05）、明顯增加20min內(nèi)交配次數(shù)（P＜0.01）。

3.1 對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇的影響 見表2。

表2 麗江瑪咖不同提取物對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇的影響（±s，n＝10）

表2 麗江瑪咖不同提取物對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇的影響（±s，n＝10）

注：與對(duì)照組比較，＊P＜0.05

組別 劑量（g／kg） 睪丸酮含量（ng／dl） 雌二醇含量（pg／ml）13 11.05±2.33 8.45±2.89復(fù)方鎖陽口服液 12 16.48±4.67＊ 7.65±2.17石油醚提取物組 13 11.09±1.78 8.63±2.98乙酸乙酯提取物組 13 11.28±2.15 7.82±2.0正丁醇提取物組 13 11.96±2.10 8.46±2.48水提取物組對(duì)照組13 12.06±2.12 7.90±1.89

試驗(yàn)結(jié)果表明，麗江瑪咖四種提取物對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇含量均無明顯影響，復(fù)方鎖陽口服液灌胃28d，可升高雄性小鼠血清睪丸酮含量（P＜0.05），對(duì)雌二醇含量無明顯影響。

4 討論

本次試驗(yàn)結(jié)果表明，麗江瑪咖四種提取物中，正丁醇和水提取物能明顯提高雄性小鼠性行為，對(duì)捕捉潛伏期、捕捉次數(shù)、交配潛伏期、交配次數(shù)均有明顯影響，而石油醚、乙酸乙酯提取物對(duì)所有指標(biāo)均無明顯影響，說明麗江瑪咖正丁醇和水提取物是其增強(qiáng)性行為的活性物質(zhì)，為進(jìn)一步研究麗江瑪咖的化學(xué)與藥效的相關(guān)性打基礎(chǔ)。但麗江瑪咖四種提取物對(duì)雄性小鼠血清睪丸酮、雌二醇含量均無明顯影響，說明其增強(qiáng)性行為的作用與性激素調(diào)節(jié)無關(guān)，作用機(jī)制有待進(jìn)一步研究。

［1］肖偉 .秘魯特產(chǎn)藥用植物瑪卡研究的新進(jìn)展［J］.世界科學(xué)技術(shù)—中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2007，9（3）：102～103.

［2］金文聞 .藥食兩用植物瑪咖（Lepidium meyenii）的功效物質(zhì)研究［C］.華中科技大學(xué)博士論文：1～5.

［3］李培清 .會(huì)澤縣引進(jìn)美國(guó)特種中藥材——瑪卡試驗(yàn)成功［J］.云南科技管理 .2006；（3）：75.

［4］楊菊 .西地那非衍生物對(duì)雄性家兔和小鼠性行為的影響研究［J］.中國(guó)藥房 .2007；18；（16）.