滇重樓和南重樓的顯微結(jié)構(gòu)研究*

王艷芳，唐 玲，李榮英，李 戈

(中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京協(xié)和醫(yī)科大學(xué)藥用植物研究所云南分所，云南景洪 666100)

重樓為延齡草科 (Trilliaceae)重樓屬 (Paris)多年生宿根性直立草本植物。全世界該屬植物共有24種，我國有19個(gè)種，8個(gè)變種和若干變形，種類最多，主要分布在川滇地區(qū)［1－2］。滇重樓 Paris polyphylla.Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.－Mazz和南重樓 paris vietnamensis(Takhi.)H.Li均為延齡草科重樓屬蚤休組植物，二者在重樓野生變家種過程中被廣泛引種種植，其中滇重樓是2010年版《中國藥典》收載的重樓藥材基原植物之一;南重樓作為民間用藥，由于其旺盛的生物學(xué)特性和相似的藥用特性顯示了巨大的藥用前景。以往關(guān)于重樓生藥鑒別研究主要集中在重樓與其他易混淆藥材的鑒定方面，關(guān)于重樓屬內(nèi)的種間鑒定較少，本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)滇重樓和南重樓植物顯微結(jié)構(gòu)觀察，意在為重樓屬植物不同種間鑒別和其他深入研究提供依據(jù)。

1 儀器與材料

1.1 儀器

石蠟切片機(jī)，SMZ－1500 Nikon生物顯微鏡及成像系統(tǒng)，無水乙醇，95%乙醇，冰醋酸，甘油，甲醛，二甲苯 (以上試劑為國產(chǎn)分析純)，石蠟(熔點(diǎn)54～56℃)。

1.2 材料

滇重樓Paris polyphylla.Smith var.yunnanensis(Franch.)Hand.－Mazz 2010年10－12月份收集于云南省西雙版納州地區(qū)，南重樓paris vietnamensis(Takhi.)H.Li 2010年11月份收集于云南省文山縣馬關(guān)地區(qū)，二者均經(jīng)本文通訊作者李戈鑒定，憑證植物栽植于云南省西雙版納州藥植所勐?；?。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

利用石蠟切片技術(shù)，制作滇重樓和南重樓植物的根、根莖、莖、葉的橫切面片，并對(duì)其進(jìn)行觀察、比較分析。

2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果

2.1 根莖橫切面

南重樓和滇重樓多年生根莖顯微結(jié)構(gòu)相似，根莖橫切面從外到內(nèi)依次為栓皮層、薄壁組織和散布在其中的排列不規(guī)則的維管束 (圖1)。栓皮層是表皮細(xì)胞被損傷后由其下的薄壁組織細(xì)胞分裂栓質(zhì)化形成，具有保護(hù)作用 (圖2)。薄壁組織細(xì)胞個(gè)大、壁薄、內(nèi)含豐富的營養(yǎng)物質(zhì)，是儲(chǔ)存淀粉粒的主要部位，同時(shí)薄壁細(xì)胞中有針晶束分布 (圖2，3)。維管束在根莖中呈類圓形或不規(guī)則排列 (圖1)，其結(jié)構(gòu)主要為周木型 (木質(zhì)部在外，韌皮部在內(nèi))(圖4)，少有韌皮部和木質(zhì)部呈交互排列(圖5)。另有兩個(gè)維管束連在一起，呈縱橫分布(圖6，7)。

2.2 不定根橫切面

滇重樓和南重樓的根橫切面均包括表皮層、皮層、內(nèi)皮層、維管束4部分 (圖8)，其中表皮細(xì)胞1層，較皮層細(xì)胞小，不角質(zhì)化，有的細(xì)胞外壁突出成根毛 (圖9)，表皮及根毛常損壞。皮層有薄壁細(xì)胞組成，細(xì)胞近圓形，排列整齊，近內(nèi)皮層細(xì)胞較外側(cè)小。內(nèi)皮層由一層長方形的細(xì)胞組成，徑向壁有帶狀加厚的凱氏帶。維管束由1層較小的長方形中柱鞘細(xì)胞及里面的維管組織組成，其中維管組織由木質(zhì)部和韌皮部交互排列，木質(zhì)部內(nèi)側(cè)管狀細(xì)胞比外側(cè)大，管狀細(xì)胞由內(nèi)向外漸次成熟。

2.3 莖橫切面

二者的莖橫切面由外向內(nèi)依次為表皮、薄壁組織、維管束3部分，其中表皮層細(xì)胞外壁較厚，內(nèi)有顯著的細(xì)胞核。薄壁組織細(xì)胞近圓形，外部近表皮層細(xì)胞較小，內(nèi)部細(xì)胞較大。維管束兩輪，散在薄壁組織內(nèi)，為外韌型維管束 (圖10，11)。

2.4 葉部橫切面及表皮特征

滇重樓和南重樓葉包括葉片和葉柄兩部分，葉片由表皮層、葉肉和葉脈3部分構(gòu)成 (圖12)。其中葉腹面的表皮稱為上表皮，表皮細(xì)胞橫切面觀為長方形 (圖13)，縱面觀為不規(guī)則型，細(xì)胞排列緊密 (圖14)。背面為下表皮，表皮細(xì)胞橫切面觀為圓形或長方形 (圖13)，縱面觀為不規(guī)則型，具有大量氣孔 (圖15)。葉肉有柵欄組織和海綿組織組成;中脈呈“V”形，為外韌型維管束。葉柄包括表皮、薄壁組織、維管束3部分，其中維管束7～9個(gè)，外韌型，中間最大的維管束呈“W”形 (圖16，17)。

3 討論

通過切片實(shí)驗(yàn)，作者發(fā)現(xiàn)滇重樓和南重樓植株，包括根、根莖、莖、葉的顯微結(jié)構(gòu)相似［3］，根莖由栓皮層、薄壁組織和散布在其中的排列不規(guī)則的維管束組成，維管束結(jié)構(gòu)主要為周木型。不定根包括表皮層、皮層、內(nèi)皮層、維管束4部分，內(nèi)皮層由一層長方形的細(xì)胞組成，徑向壁有帶狀加厚的凱氏帶，維管組織由木質(zhì)部和韌皮部交互排列，木質(zhì)部內(nèi)側(cè)管狀細(xì)胞比外側(cè)大，管狀細(xì)胞由內(nèi)向外漸次成熟。莖橫切面由外向內(nèi)依次為表皮、薄壁組織、維管束3部分，維管束兩輪，為外韌型。滇重樓和南重樓葉包括葉片和葉柄兩部分，葉片為異面葉，葉肉有柵欄組織和海綿組織組成，下表皮具有大量氣孔。二者相似的顯微結(jié)構(gòu)用于種間鑒定仍有一定難度，至于其中分布的維管束、淀粉粒及針晶束形態(tài)和數(shù)量等跟植株的生長年限、生長環(huán)境更加密切。作者建議今后重樓屬內(nèi)相近種間植物需要借助于植物性狀和其他手段相結(jié)合鑒別，包括分子技術(shù)等其他方法從分子水平進(jìn)行鑒定［4－5］。

［1］國家藥典委員會(huì).中華人民共和國藥典 ［M］.北京:化學(xué)工業(yè)出版社，2010:243.

［2］李恒，楊興華，梁漢興，等.重樓屬植物 ［M］.科學(xué)出版社，1998:69－79.

［3］李強(qiáng).四川重樓屬植物資源顯微鑒別及花粉育性研究［D］.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008:20－24.

［4］唐榮華，王麗，唐小為，等.十一種重樓屬植物的RAPD分析［J］.四川大學(xué)學(xué)報(bào)，2003，40(4):778－782.

［5］朱英杰，陳士林，姚 輝，等.重樓屬藥用植物DNA條形碼鑒定研究 ［J］.藥學(xué)學(xué)報(bào)，2010，45(3):376－382.