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    血栓心脈寧片抑制急性血瘀大鼠血栓形成的研究

    2012-06-29 08:16:32張曉天王槐棟王冀邯
    關(guān)鍵詞:心脈全血血瘀

    張曉天,李 敏,胡 亞,王槐棟,王冀邯,王 放

    血栓心脈寧片是純中藥制劑,主要由川芎、丹參、水蛭、毛冬青、牛黃、麝香、槐花、人參莖葉皂苷、冰片、蟾酥等組成。該藥具有益氣活血、開竅止痛功能,用于氣虛血瘀所致的腦卒中、胸痹,癥見頭昏目眩、半身不遂、胸悶心痛、心悸氣促;缺血性腦卒中恢復(fù)期、冠心病、心絞痛等[1]。本實驗觀察血栓心脈寧片對大鼠血液流變學(xué)的影響,及抗血栓形成的作用。

    1 材料與方法

    1.1 材料與儀器 Wistar大鼠60只,雌、雄各半,體重200 g~220 g,由吉林大學(xué)白求恩醫(yī)學(xué)院試驗動物中心提供,質(zhì)量合格證號:SCXK-(吉)2009-0001。血栓心脈寧片,由吉林華康藥業(yè)股份有限公司提供,國藥準(zhǔn)字Z20030145,產(chǎn)品批號:110601;腦心通膠囊,陜西步長制藥有限公司,國藥準(zhǔn)字Z2025001,產(chǎn)品批號:110764。鹽酸腎上腺素注射液,上海禾豐制藥有限公司出品,批號:110302;LT電子天平(深圳市力源檢測儀器有限公司);TDL80-2B飛鴿牌離心機(哈爾濱東聯(lián)電子技術(shù)開發(fā)有限公司);KES-900B型血流變檢測儀(無錫康爾生儀器公司);體外血栓形成儀(北京科臨易檢信息技術(shù)有限公司);DHG-9053A型電熱恒溫干燥箱(上海醫(yī)用恒溫設(shè)備廠)。

    1.2 方法

    1.2.1 動物分組 取血栓心脈寧片,配成濃度為3.5%、7.0%、14.0%高、中、低劑量供試藥液;腦心通膠囊,配成濃度為8.0%的陽性對照藥液;腎上腺素,配成濃度為0.1%的溶液;水合氯醛,配成濃度為10%的溶液。

    自試驗動物中心引入Wistar大鼠后,適應(yīng)性飼養(yǎng)一周,室溫22℃~25℃,濕度40%~60%。將大鼠按體重隨機分為6組,每組10只,雌、雄各組均分,分組為正常對照組、血瘀模型組及血栓心脈寧片高劑量組、中劑量組、低劑量組,腦心通膠囊陽性對照組。

    試驗過程中正常對照組正常飼養(yǎng),血瘀模型組給水10mL/kg,各給藥組均給予10mL/kg供試藥液。每日09:00時灌胃給藥,連續(xù)給藥7 d。

    1.2.2 血瘀模型的制備 第6天灌胃給藥后30 min,除正常對照組外,其余各組動物均皮下注射0.1%腎上腺素0.8mL/kg,2 h后于冰水中浸泡5 min,再過2 h后給予同劑量的腎上腺素以復(fù)制急性血瘀模型[2]。

    1.2.3 血液流變學(xué)的測定[3]大鼠復(fù)制急性血瘀后模型,禁食不禁水12 h,第7天末次給藥30 min后,腹腔注射10%水合氯醛3mL/kg麻醉,腹主動脈取血[4],置于肝素抗凝管中。取其中全血1mL置于血流變檢測儀,測定全血低切(20/s)、中切(60/s)及高切(150/s)黏度,余下全血離心1 0 min(3 0 0 0 r/min),取上層血漿1 mL測定血漿黏度(140/s)。

    1.2.4 體外血栓形成的測定 大鼠復(fù)制急性血瘀模型后,禁食不禁水12 h,第7天末次給藥30 min后,大鼠腹腔注射10% 水合氯醛3 ml/kg麻醉,腹主動脈取血1.8mL,注入硅膠管中,迅速密封,置于體外血栓形成儀上旋轉(zhuǎn)15 min,傾出血栓,在濾紙上吸干殘血,測量血栓長度及血栓濕重,再將血栓置于烘箱50℃烘干后稱量其干重[5]。

    1.3 統(tǒng)計學(xué)處理 應(yīng)用GraphPad Prism 5.0處理,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(±s)表示,兩組間比較采用t檢驗。

    2 結(jié) 果

    2.1 對血液流變學(xué)的影響 急性血瘀模型組與正常對照組比較,全血低、中、高切黏度及血漿黏度均明顯增加(P<0.05),大鼠急性血瘀模型造模成功。與急性血瘀模型組比較,血栓心脈寧片低、中、高劑量組可使血瘀模型大鼠全血低、中、高切黏度及血漿黏度顯著降低(P<0.05)。詳見表1。

    2.2 對體外血栓形成的影響 與急性血瘀模型組比較,血栓心脈寧片各組均可使血瘀模型大鼠血栓形成長度、血栓濕重及血栓干重顯著降低(P<0.05)。詳見表2。

    表1 血栓心脈寧片對急性血瘀大鼠血液流變學(xué)的影響(±s) mPa·s

    表1 血栓心脈寧片對急性血瘀大鼠血液流變學(xué)的影響(±s) mPa·s

    與模型組比較,1)P<0.05

    劑量 全血低切黏度 全血中切黏度 全血高切黏度 血漿黏度正常對照組 10 9.81±0.451) 5.55±0.271) 3.76±0.171) 0.86±0.051)組別 n模型組 10 10mL/kg 10.45±0.39 6.00±0.30 4.07±0.22 1.22±0.18低劑量組 10 0.35 g/kg 10.08±0.541) 5.73±0.341) 3.87±0.181) 0.93±0.041)中劑量組 10 0.70 g/kg 9.39±0.631) 5.33±0.421) 3.61±0.281) 0.83±0.061)高劑量組 10 1.40 g/kg 9.56±0.441) 5.44±0.231) 3.75±0.131) 0.85±0.101)陽性對照組 10 0.80 g/kg 9.65±0.571) 5.55±0.471) 3.79±0.331) 0.86±0.111)

    表2 血栓心脈寧片對急性血瘀大鼠體外血栓形成的影響 (±s)

    表2 血栓心脈寧片對急性血瘀大鼠體外血栓形成的影響 (±s)

    與模型組比較,1)P<0.05

    組別 n 劑量 血栓長度(mm) 血栓濕重(mg) 血栓干重(mg)正常對照組 10 13.4±1.41) 56.0±8.51) 14.4±1.41)模型組 10 10mL/kg 22.1±1.8 96.8±7.8 23.3±1.9低劑量組 10 0.35 g/kg 17.2±0.61) 76.2±3.61) 18.3±0.51)中劑量組 10 0.70 g/kg 13.2±0.21) 54.9±1.81) 14.3±0.31)高劑量組 10 1.40 g/kg 14.5±0.61) 61.0±1.41) 15.4±0.11)陽性對照組 10 0.80 g/kg 13.8±0.41) 59.0±1.21) 15.0±0.41)

    3 討 論

    血瘀證是由于血液瘀滯、運行不暢而產(chǎn)生的病理癥候[6,7],此時血液呈高黏、聚、凝狀態(tài)。本實驗給大鼠皮下注射大劑量腎上腺素模擬暴怒時的機體狀態(tài),以冰水浸泡法模擬外寒侵襲,在兩種因素綜合作用下復(fù)制大鼠急性血瘀證模型,此模型使外周血管強烈收縮,心臟后負(fù)荷增加,心肌耗氧量增加,心功能逐漸下降,使血液運行障礙[8],因此,該模型常用于中醫(yī)血瘀證及活血化瘀藥的研究[9,10]。周衛(wèi)等[11-13]的相關(guān)研究表明,腎上腺素加冰水以復(fù)制急性血瘀動物模型的方法可行。

    血液流變學(xué)是研究構(gòu)成血液循環(huán)的血液及血管的流動性和變形的科學(xué),也是研究血液的流動性質(zhì)和凝固性質(zhì)及紅細(xì)胞的粘彈性和變性的科學(xué)。其改變與許多疾病,尤其是血栓性疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)。血液流動性下降,流變性異常,凝固性增高,從而導(dǎo)致血流緩慢,形成血栓[14]。因此,觀察血栓心脈寧片對急性血瘀模型大鼠血液流變學(xué)的影響,符合中醫(yī)活血化瘀藥物的治療原則[15]。

    體外血栓形成實驗是模擬體內(nèi)血栓形成過程制備成模擬血栓,通過測定體外血栓形成長度、血栓濕重和干重,可借以推測在體血管內(nèi)凝血形成血栓的可能程度[16]。這些指標(biāo)能夠直觀地反映出被檢者的血凝狀態(tài),因此可以通過體外血栓形成試驗來觀察血栓心脈寧片對于急性血瘀模型大鼠的抗血栓作用。

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