“生血二號”治療特發(fā)性血小板減少性紫癜對巨核細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究

宋明福 王安橋 朱國龍 劉 敏

（宜昌市中醫(yī)院，湖北省宜昌市勝利三路2號，443003；三峽大學(xué)中醫(yī)臨床醫(yī)學(xué)院）

實(shí)驗(yàn)研究

“生血二號”治療特發(fā)性血小板減少性紫癜對巨核細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究

宋明福 王安橋 朱國龍 劉 敏

（宜昌市中醫(yī)院，湖北省宜昌市勝利三路2號，443003；三峽大學(xué)中醫(yī)臨床醫(yī)學(xué)院）

目的：觀察“生血二號”對ITP治療前后的骨髓巨核細(xì)胞的影響。方法：選擇血小板減少小鼠共30只，雌雄兼用，分為中藥組及激素組，治療15天后，查骨髓產(chǎn)板巨核細(xì)胞數(shù)。結(jié)果：經(jīng)小鼠實(shí)驗(yàn)表明：中藥組和激素組與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；中藥組和激素組與正常組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）；中藥組與激素組比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論：“生血二號”能促進(jìn)巨核細(xì)胞向成熟分化，促進(jìn)血小板生成，說明中藥在治療慢性血小板減少性紫癜較激素安全可靠，療效顯著。

血小板減少性紫癜/中醫(yī)藥療法；巨核細(xì)胞；@生血二號

特發(fā)性血小板減少性紫癜（Idiopathic Thrombocytopenic Purpura，ITP）是一種自身免疫所致的出血性性疾病，常反復(fù)發(fā)作。本研究采用動(dòng)物實(shí)驗(yàn)檢測了ITP治療前后對骨髓巨核細(xì)胞影響，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 材料和方法

1.1 動(dòng)物及藥品 18～22g健康昆明種小鼠，由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供，許可證號：SCXR（鄂）2004-0007?！吧枴庇芍它S芪、山藥、牡丹皮、山茱萸、當(dāng)歸、水牛角、田七、墨旱蓮、女貞子、黨參、阿膠、商陸、丹參、佛手、建神曲等組成。

1.2 方法 豚鼠抗血小板抗血清：取雌性KM小鼠20只，乙醚麻醉后，以EDTA-Na2抗凝從心臟取出全血分離血小板并洗滌，用生理鹽水稀釋成1×105/mL，與等量完全福氏佐劑充分混合，注射于豚鼠足掌、背及皮下至少4點(diǎn)，各0.02mL，每周重復(fù)以上操作，每次取新鮮血液。第四次注射后第6天，取豚鼠心臟不抗凝全血1500r/min離心10min后取上清，即為豚鼠抗血小板抗血清（GP-APS），儲存于-20℃冰箱待用。KM小鼠，雌雄各半，每組15只。取出-20℃保存GPAPS置56℃水浴中30min，以等量的KM小鼠紅細(xì)胞至少吸附兩次，用生理鹽水1∶4稀釋。于0、2、4、6、8、10、12d按照0.1mL/20g小鼠腹腔注入稀釋的抗血清。從第1次注射APS后，灌胃給藥，每日1次，連續(xù)給藥15d。治療組用“生血二號”20mL/kg灌胃，每日1次；對照組以潑尼松10mg/kg劑量灌胃，每日1次；模型組給予20mL/kg生理鹽水灌胃，每日1次。以上3組均連續(xù)治療20天；處死后取骨髓涂片待檢。以上3組治療后均與正常組比較。

2 結(jié)果

經(jīng)過上述方法治療15天以后，挑選出有實(shí)驗(yàn)意義的正常組8只、模型組8只、治療組11只、對照組11只進(jìn)行解剖取骨髓。按骨髓形態(tài)產(chǎn)板巨核細(xì)胞與整個(gè)骨髓巨核細(xì)胞數(shù)的百分比，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，其結(jié)果如下。

表1 四組小鼠骨髓產(chǎn)板巨核細(xì)胞數(shù)據(jù)比較（%）

表2 四組小鼠骨髓產(chǎn)板巨核細(xì)胞數(shù)（%）統(tǒng)計(jì)分析結(jié)果

從上表中可見，正常組與模型組比較P＜0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明模型成功的建立可保證以后進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行。而治療組和對照組與模型組比較P＜0.01，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明骨髓巨核細(xì)胞恢復(fù)很好；治療組和對照組與正常組比較P＞0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明2組治療可達(dá)到正常水平；治療組與對照組P＞0.05，無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，說明用中藥和用激素兩者無明顯差異。

3 討論

CITP又稱免疫性血小板減少性紫癜，屬中醫(yī)學(xué)的血癥、虛勞、發(fā)斑、衄血等范疇。本病是由于免疫功能失調(diào)產(chǎn)生了自身抗血小板抗體［1］，使血小板破壞過多，外周血小板減少，骨髓巨核細(xì)胞數(shù)正常或增多伴，有成熟障礙為主要表現(xiàn)的常見出血性疾病。對于CITP的治療，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)多以調(diào)節(jié)免疫功能入手，主要以激素、大劑量免疫球蛋白、脾切除及免疫抑制劑等治療手段［2］，但存在副反應(yīng)大，價(jià)格昂貴等問題。中醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)論述較多，其中張景岳總結(jié)前人經(jīng)驗(yàn)，指出“動(dòng)血之由，唯火唯氣耳”，以火盛與氣虛、正虛與邪實(shí)兩端，強(qiáng)調(diào)了虛、實(shí)大之氣、陰之虛均可導(dǎo)致紫癜形成的病機(jī)特點(diǎn)［3］。

我們依據(jù)紫癜火盛、氣虛的病機(jī)特點(diǎn)，自擬“生血二號”治療本病。其中炙黃芪、制首烏、山藥益氣滋陰生血；女貞子、阿膠、墨旱蓮、水牛角涼血滋陰止血；牡丹皮、丹參涼血化瘀止血；當(dāng)歸補(bǔ)血活血，化瘀而不傷正；黨參、佛手、建神曲益氣健脾和胃；而商陸現(xiàn)代研究表明據(jù)有抗炎及抗病毒作用［4］，其多種化學(xué)成分對骨髓造血功能有恢復(fù)和重建的能力，對血小板生長有促進(jìn)作用［5］。綜觀全方，共奏益腎滋陰，健脾益氣，活血化瘀，涼血止血之效。

本臨床觀察結(jié)果表明，用藥治療后的產(chǎn)板巨比治療前明顯增加，血小板計(jì)數(shù)明顯升高［6］，這說明“生血二號”能促進(jìn)巨核細(xì)胞向成熟分化，促進(jìn)血小板的生成，同時(shí)減輕了對骨髓巨核細(xì)胞成熟的抑制。從我們的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)觀察結(jié)果發(fā)現(xiàn)中藥組和西藥組同時(shí)治療15天與模型組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，而中藥組與西藥組2組之間無明顯差異［7］，進(jìn)一步說明中藥在治療慢性血小板減少性紫癜方面的安全、可靠，且療效顯著。

［1］周永明，程軍.原發(fā)性血小板減少性紫癜的病機(jī)特點(diǎn)和治療對策.遼寧中醫(yī)雜志，2001，28（12）：714.

［2］時(shí)峰.難治性特發(fā)性血小板減少性紫癜的治療進(jìn)展.疑難病雜志，2006，5（5）：395-397.

［3］張介賓主編.景岳全書［M］.上海；上海科學(xué)技術(shù)出版社，1984：512.

［4］王本祥主編.現(xiàn)代中藥藥理學(xué)［M］.天津；天津科學(xué)技術(shù)出版社，1997：390.

［5］陳學(xué)英，劉普希.治療特發(fā)性血小板減少性紫癜經(jīng)驗(yàn).實(shí)用中醫(yī)學(xué)雜志，2005，21（9）：557.

［6］胡濤，師曉東，馮燕玲.三種血小板減少患兒骨髓巨核細(xì)胞比較.中華兒科雜志，2005，43（3）：183-186.

［7］劉敏，宋明福，趙為軍，王安橋.“生血2號”治療慢性特發(fā)性血小板減少性紫癜36例臨床研究.四川中醫(yī)雜志，2008，26（11）：65-66.

（2011-11-14收稿）

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Impact of ShengxueⅡon Megalocaryocyte in Mice with Idiopathic Thrombocytopenic Purpura

Song Mingfu，Wang Anqiao，Zhu Guolong，et al.
（Yichang Hospital of Traditional Chinese Medicine，College of Traditional Chinese Medicine of Three Gorges University，Post code：443003）

Objective：To observe the impact of ShengxueⅡon megalocaryocyte in bone marrow in mice with idiopathic thrombocytopenic purpura（ITP）.Methods：Thirty male and female mice with thrombocytopenia were treated by Chinese medicine，or by hormone respectively for 15 days，and megalocaryocyte in bone marrow were counted.Results：Either the medicine group or hormone group had significant differences when comparing with the model group（P＜0.01）；but without significant differences when comparing with the normal group（P＞0.05）；There was no significant different between the medicine group and hormone group（P＞0.05）.Conclusion：ShengxueⅡcan promote megalocaryocyte differentiation and produce blood platelet，indicating it is a safer and more effective treatment than hormone for the treatment of idiopathic thrombocytopenic purpura.

Idiopathic thrombocytopenic purpura/Chinese medical therapy；Megalocaryocyte@ShengxueⅡ