苦參素注射液對(duì)環(huán)磷酰胺所致大鼠全血細(xì)胞及骨髓造血功能影響

曲震理

環(huán)磷酰胺為氮芥與磷酰胺基結(jié)合而成的化合物，是臨床常用的烷化劑類免疫抑制劑?？捎糜谥委煾鞣N自身免疫性疾病，即能抑制細(xì)胞增殖，非特異性殺傷抗原敏感性小淋巴細(xì)胞，限制其轉(zhuǎn)化為免疫母細(xì)胞。但環(huán)磷酰胺在長(zhǎng)期應(yīng)用過程中會(huì)出現(xiàn)骨髓抑制，主要表現(xiàn)為白細(xì)胞減少。苦參素注射液主要用于慢性乙肝治療。本文觀察苦參素注射液對(duì)環(huán)磷酰胺所致大鼠全血細(xì)胞和骨髓造血的影響。

1 材料和方法

1.1材料

1.1.1動(dòng)物 選擇雄性SD大鼠共45只，均為3月齡。平均體重中(270±35)g，由華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，許可證號(hào):SCXK(鄂)2010-0007。標(biāo)準(zhǔn)固型飼料分組喂養(yǎng)。

1.1.2實(shí)驗(yàn)藥品 苦參素注射液:江蘇正大天晴藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字:H20057479，批號(hào):110609。注射用環(huán)磷酰胺:山西普德藥業(yè)有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字:H14023686，批號(hào):110409。

1.1.3試劑和儀器 電子天平，上海?？惦娮觾x器廠生產(chǎn);全血細(xì)胞檢測(cè)儀，中科專利商標(biāo)有限責(zé)任公司提供。

1.2方法

1.2.1分組和模型制備 所選45只SD雄性大鼠隨機(jī)分為3組，每組15只。分別為:對(duì)照組、模型組、苦參素組。參考郭平所述血虛證動(dòng)物模型研究概況［1］，采用環(huán)磷酰胺制備模型:模型組和苦參素組均給予環(huán)磷酰胺每天90 mg/kg，腹腔注射，1次/d，連續(xù)應(yīng)用7 d。

1.2.2給藥方法 造模第3天開始給藥，苦參素組大鼠給予苦參素注射液，60 mg/(kg·d)，1次/d，連續(xù)應(yīng)用10 d。

1.2.3觀察指標(biāo) 末次給藥3 h后，采用電子天平秤取每組大鼠體重，而后采用10%水合氯醛300～350 mg腹腔注射麻醉大鼠，進(jìn)行腹主動(dòng)脈取血，采用全血細(xì)胞分析儀檢測(cè)外周全血細(xì)胞數(shù)。腹主動(dòng)脈取血后，剪取大鼠股骨，采用生理鹽水沖洗，沖洗液無血色后用注射液抽取骨髓，做骨髓涂片后送檢，觀察骨髓有核細(xì)胞數(shù)改變情況。

1.2.4統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件SPSS 14.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，采用單因素方差分析及組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0.05，顯示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

實(shí)驗(yàn)過程中對(duì)照組大鼠毛色光亮、活動(dòng)正常、飲食和大小便正常;模型組大鼠毛色無光澤、活動(dòng)減少、食欲減退、倦怠、嗜睡等;苦參素組大鼠活動(dòng)、食欲、精神狀態(tài)等方面均較模型有所改善。其中模型組實(shí)驗(yàn)過程死亡3只，苦參素組死亡2只。三組觀察指標(biāo)記錄結(jié)果比較:模型組大鼠體重較對(duì)照組顯著下降(P＜0.05);苦參素組大鼠體重較模型組顯著升高(P＜0.05);模型組白細(xì)胞計(jì)數(shù)和血小板計(jì)數(shù)分別與對(duì)照組比較，均顯著下降(P＜0.05);苦參素組白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)較模型組顯著增加(P＜0.05);模型組骨髓有核細(xì)胞計(jì)數(shù)顯著低于對(duì)照組(P＜0.05);苦參素組骨髓有核細(xì)胞數(shù) 顯著高于模型組(P＜0.05)。見表1.

表1 三組觀察指標(biāo)結(jié)果比較

3 討論

環(huán)磷酰胺是氮芥與磷酰胺基結(jié)合而成的化合物。環(huán)磷酰胺在體外無抗腫瘤活性，進(jìn)入體內(nèi)后先在肝臟中經(jīng)微粒體功能氧化酶轉(zhuǎn)化成醛磷酰胺，而醛酰胺不穩(wěn)定，在腫瘤細(xì)胞內(nèi)分解成酰胺氮芥及丙烯醛，酰胺氮芥對(duì)腫瘤細(xì)胞有細(xì)胞毒作用。環(huán)磷酰胺可干擾DNA及RNA功能，尤以對(duì)前者的影響更大，它與DNA發(fā)生交叉聯(lián)結(jié)，抑制DNA合成，對(duì)S期作用最明顯。環(huán)磷酰胺對(duì)各種良、惡性腫瘤具有較好的療效。但在應(yīng)用過程中，環(huán)磷酰胺會(huì)產(chǎn)生相關(guān)毒副反應(yīng)，如有致畸性、骨髓抑制、白細(xì)胞減少等，限制了環(huán)磷酰胺的臨床應(yīng)用。苦參素注射液主要成分是氧化苦參堿［2］，研究表明，氧化苦參堿具有利尿、抗病原體、免疫作用，有研究發(fā)現(xiàn)氧化苦參堿對(duì)肺癌、胃癌細(xì)胞誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞增殖具有抑制作用［3，4］。

本文實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組比較，模型組大鼠應(yīng)用環(huán)磷酰胺后，其精神狀態(tài)差、食欲減退、體重下降、行動(dòng)遲緩;而苦參素組大鼠在精神狀態(tài)、食欲、活動(dòng)等方面均較模型組顯著改善，說明苦參素注射能夠改善環(huán)磷酰胺大鼠的全身狀態(tài)。模型組大鼠應(yīng)用環(huán)磷酰胺后，其白細(xì)胞和血小板均較對(duì)照組顯著降低，說明環(huán)磷酰胺可導(dǎo)致大鼠白細(xì)胞和血小板減少，而苦參素組應(yīng)用苦參素注射液后，其白細(xì)胞和血小板計(jì)數(shù)較模型組顯著升高，說明苦參素注射液能夠升高環(huán)磷酰胺大鼠的白細(xì)胞和血小板。模型組大鼠骨髓有核細(xì)胞較對(duì)照組顯著減少，而苦參素組大鼠骨髓有核細(xì)胞較模型組顯著升高，說明苦參素注射液能夠有效改善環(huán)磷酰胺致骨髓抑制狀。綜上所述，苦參素注射液能夠減輕環(huán)磷酰胺所致大鼠全血細(xì)胞減少，改善環(huán)磷酰胺大鼠骨髓造血功能。

［1］郭平.血虛證動(dòng)物模型研究概況.山東中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，30(1):83.

［2］郜娜，喬海靈.康艾注射液和苦參素注射液在大鼠體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué).中國藥理通訊，2009，26(2):68.

［3］周愛玲，羅琳，茅家慧，等.苦參素對(duì)實(shí)驗(yàn)性肝纖維化的防治作用及對(duì)MMP-2表達(dá)的影響.中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2004，9(10):1096.

［4］孫麗梅，劉靜，劉會(huì)彬.苦參素聯(lián)合甘草酸苷對(duì)濕疹患者輔助T細(xì)胞免疫功能的影響.中國中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)雜志，2011，10(2):99-100.