慢性乙型肝炎T淋巴細(xì)胞表達(dá)與病毒載量相關(guān)性的討論

施長友

慢性乙型肝炎(CHB)嚴(yán)重威脅著人類的生命健康。全球慢性HBV感染者約(3.5～4.0)億人，我國屬于乙型肝炎高發(fā)區(qū)域。HBV感染機(jī)體后出現(xiàn)急性自限性感染、遷延不愈形成慢性感染、以及發(fā)展為肝硬化、肝癌而奪取人的生命?，F(xiàn)階段抗病毒治療慢性乙型肝炎是最常用也是最有效的治療手段之一，然而抗病毒治療療效存在明顯的個體差異，其中基線的HBV-DNA載量與抗病毒應(yīng)答有直接關(guān)系，病毒載量越低抗病毒應(yīng)答率越高［1］。CHB的發(fā)病與治療時機(jī)選擇均與患者免疫相關(guān)，本文就患者的T淋巴細(xì)胞與血清HBV-DNA載量相關(guān)性進(jìn)行討論，報告如下。

對象與方法

1.對象:選取2009年3月～2010年5月間在杭州市第六人民醫(yī)院住院的乙型肝炎患者153例臨床診斷均符合2010年我國新制定的《慢性乙型肝炎防治指南》診斷標(biāo)準(zhǔn)［2］排除其他型肝炎的感染以及引起肝損傷的疾病，其中男性80例，女性73例，年齡15～60歲，平均年齡42.5歲。

2.方法:血清HBV-DNA載量檢測采用實(shí)時熒光定量PCR法，采用試劑為上海之江生物科技有限公司生產(chǎn)，檢測儀器為美國應(yīng)用生物系統(tǒng)公司生產(chǎn)AB7900-384熒光定量核酸檢測儀。T淋巴細(xì)胞亞群檢測采用流式細(xì)胞技術(shù)，所用試劑購自英國Proimmune公司，檢測儀器為EpicsXL-MCL型流式細(xì)胞儀(美國Beckman Coulter公司)。所有檢測項(xiàng)目均嚴(yán)格按照試劑盒說明書進(jìn)行。

3.統(tǒng)計學(xué)方法:采用SPSS 13.0統(tǒng)計分析軟件，兩組間均數(shù)的比較采用t檢驗(yàn)，多組間均數(shù)采用單因素方差分析，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

結(jié) 果

153例CHB患者根據(jù)血清HBV-DNA載量分為HBV-DNA陰性組(病毒載量＜1×103IU/ml)75例，HBV-DNA陽性組(病毒載量≥1×103IU/ml)78例，陰性組非特異性T淋巴細(xì)胞平均值為45.27%±8.25%，非特異性T淋巴細(xì)胞平均值為20.25% ±5.18%。陽性組特異性T淋巴細(xì)胞平均值為25.58%±7.36%，非特異性T淋巴細(xì)胞平均值為33.17% ±6.42%，兩組比較差別有統(tǒng)計學(xué)意義P＜0.05，數(shù)據(jù)統(tǒng)計見表1。

表1 不同HBV-DNA載量患者T淋巴細(xì)胞表達(dá)

討 論

慢性乙型肝炎嚴(yán)重威脅人類的生命健康，已知當(dāng)乙肝病毒HBV進(jìn)入體內(nèi)時其本身并不破壞被感染的肝細(xì)胞，其肝臟損傷機(jī)制主要由機(jī)體免疫系統(tǒng)介導(dǎo)，主要依靠細(xì)胞毒效應(yīng)與非細(xì)胞毒效應(yīng)兩種免疫機(jī)制清除病毒，但在誘導(dǎo)機(jī)體免疫反應(yīng)清除病毒同時也間接的損傷了肝細(xì)胞［3］。T淋巴細(xì)胞主要分為特異性T淋巴細(xì)胞和非特異性T淋巴細(xì)胞，特異性T淋巴細(xì)胞只清除靶細(xì)胞內(nèi)的病毒，而對靶細(xì)胞本身并無損傷，清除方式為非溶細(xì)胞模式，而非特異性T淋巴細(xì)胞則表現(xiàn)的不同，在清除病毒的同時常損傷肝細(xì)胞。

筆者的研究發(fā)現(xiàn)，CHB患者血清HBV-DNA病毒載量的水平與外周血T淋巴細(xì)胞相關(guān)，在HBVDNA載量＜1×103IU/ml時，特異性T淋巴細(xì)胞水平較HBV-DNA≥1×103IU/ml時要高，這恰恰證實(shí)了高病毒載量患者特異性T淋巴細(xì)胞減少無法及時清除病毒，而特異性T淋巴細(xì)胞主要表達(dá)的是CD3+、CD4+等，Chang等［4］報道高病毒復(fù)制的乙肝患者其體內(nèi)CD4+T淋巴細(xì)胞表現(xiàn)為下降的，這與筆者的高病毒載量患者特異性T淋巴細(xì)胞下降一致，邱潔等［5］實(shí)驗(yàn)證明乙型肝炎肝衰竭患者CD3+細(xì)胞數(shù)量明顯減少，此時肝衰竭的主要原應(yīng)為病毒持續(xù)復(fù)制。相反在兩組患者外周血中非特異性T淋巴細(xì)胞則表現(xiàn)的不同，當(dāng)病毒載量較高時非特異性T淋巴細(xì)胞表現(xiàn)的較為活躍，而非特異性T淋巴細(xì)胞在清除病毒時不具有選擇性會連同肝細(xì)胞一同損壞，這也就是臨床上常看到高病毒載量肝功能持續(xù)異常存在的可能原因。顧錫炳等［6］也認(rèn)為慢性乙型肝炎病毒載量的高低與特異性T淋巴細(xì)胞呈負(fù)相關(guān)，與非特異性T淋巴細(xì)胞呈正相關(guān)，胡學(xué)玲［7］的實(shí)驗(yàn)也表明當(dāng)病毒在105～107拷貝/毫升時T淋巴細(xì)胞CD3+、CD4+顯著下降，當(dāng)病毒＞108拷貝/毫升時CD8+T淋巴細(xì)胞顯著升高。

通過筆者的實(shí)驗(yàn)研究可以看出，CHB患者血清HBV-DNA載量與患者外周血T淋巴細(xì)胞相關(guān)，在對CHB治療的同時如能對T淋巴細(xì)胞進(jìn)行檢測這對了解CHB患者機(jī)體免疫狀態(tài)以及選擇抗病毒治療均具有重要意義。

1 謝冬英，林炳亮，徐啟恒，等.阿德福韋酯治療e抗原陽性慢性乙型肝炎的療效預(yù)測指標(biāo)探討［J］.中華肝臟病雜志，2008，16:341-344

2 中華醫(yī)學(xué)會肝病學(xué)分會、感染病學(xué)分會.慢性乙型肝炎防治指南(2010年版)［J］. 中華臨床感染病雜志，2011，4(1):1-13

3 Rushbrook SM，Hoare M，Alexaader GJ.T—regulatory lymphoeytes and chronic vival hepatitis［J］.Exper orlin Biol Vrher，2007，7(11):1689-1703

4 Chang JJ，Thompson AJ，Visvanathan K，et al.The phenotyre of hepatitis B viruv—specific T cells diffef in the liver and blood in Chronic hepatitis virvs infection［J］.Hepatolgy，2007，46(5):1332-1340

5 邱潔，龍啟強(qiáng)，馮艷紅，等.慢性乙型肝炎患者外周血NK細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞計數(shù)變化及其臨床意義［J］.實(shí)用肝臟病雜志，2010，13(3):178-179

6 顧錫炳，楊小娟，王棟，等.慢性乙型肝炎患者HBV DNA水平與細(xì)胞毒性T淋巴細(xì)胞及肝功能的關(guān)系［J］.中華傳染病雜志，2010，25(8):497-499

7 胡學(xué)玲，陳天寶，范公忍，等.慢性乙型肝炎外周血T淋巴細(xì)胞亞群變化及其臨床意義［J］.細(xì)胞與分子免疫學(xué)雜志，2010，26(9):912-913