丹參酮對(duì)大鼠放射性肝損傷保護(hù)作用的研究

苑蘭惠，史鴻云，李志剛，楊會(huì)彬，蓋曉惠，張戈妹

（河北大學(xué)附屬醫(yī)院放療科，河北保定 071000）

·論 著·

丹參酮對(duì)大鼠放射性肝損傷保護(hù)作用的研究

苑蘭惠，史鴻云，李志剛，楊會(huì)彬，蓋曉惠，張戈妹

（河北大學(xué)附屬醫(yī)院放療科，河北保定 071000）

目的研究丹參酮對(duì)大鼠放射性急性肝損傷的保護(hù)作用。方法健康成年SD大鼠42只，雌雄各半，隨機(jī)分為正常組（14只）、模型組（14只）、實(shí)驗(yàn)組（14只）。實(shí)驗(yàn)組于照射前3d起每天給予腹腔注射丹參酮ⅡA磺酸鈉15mg/kg，模型組和正常組同時(shí)腹腔注射等量生理鹽水。對(duì)模型組、實(shí)驗(yàn)組應(yīng)用醫(yī)科達(dá)加速器6Mv-X線照射上腹部，總劑量20Gy，單次照射法造成大鼠放射性急性肝損傷。測(cè)定大鼠血丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、丙二醛（malondialdehyde，MDA）及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）含量。結(jié)果正常組和模型組、正常組和實(shí)驗(yàn)組、實(shí)驗(yàn)組和模型組的ALT、MDA、TGF-β1比較，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。結(jié)論丹參酮對(duì)大鼠放射性肝損傷具有一定的保護(hù)作用，作用機(jī)制之一可能與其抗氧化活性有關(guān)。

肝腫瘤；丹參酮；放射療法；大鼠

三維適形放射治療為中晚期原發(fā)性肝癌患者提供了一條新的治療途徑［1］。在放射治療的同時(shí)，放射性肝病是其最主要的并發(fā)癥之一，也是影響放射耐受量的最主要因素［1］。本研究通過采用6Mv-X射線照射法建立大鼠放射性急性肝損傷模型，應(yīng)用丹參酮ⅡA治療一定時(shí)間后，考察丹參酮ⅡA對(duì)大鼠血丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶（alanine aminotransferase，ALT）、血清丙二醛（malondialdehyde，MDA）、轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（transforming growth factor-β1，TGF-β1）水平的變化情況來探討丹參酮對(duì)放射性肝損傷的治療保護(hù)作用。

1 材料與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組：健康成年SD大鼠42只，體質(zhì)量160～180g，雌雄各半，隨機(jī)分為正常組（14只）、模型組（14只）、實(shí)驗(yàn)組（14只）。

1.2 大鼠肝損傷模型的建立：所有SD大鼠飼養(yǎng)溫度（23±2）℃，照明時(shí)間為12h/d，飼養(yǎng)1周后進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)組于照射前3d起每天給予腹腔注射丹參酮ⅡA磺酸鈉15mg/kg，模型組和正常組同時(shí)腹腔注射等量生理鹽水。對(duì)模型組、實(shí)驗(yàn)組應(yīng)用醫(yī)科達(dá)加速器6Mv-X線照射上腹部。照射范圍，采用1 000kV/25mA狀態(tài)CT下定位，大鼠仰臥于體模固定板上給予烏拉坦麻醉（濃度25%，500mg/kg），四足固定，上界至膈頂、下界至肝下緣，左、右側(cè)界至腹外側(cè)壁，范圍約2cm×4cm，劑量率為1 000 cGy/min，源皮距100cm，計(jì)算點(diǎn)深度為3cm，總單次量20Gy。

1.3 數(shù)據(jù)采集：實(shí)驗(yàn)組和模型組照射后72h，全部大鼠脫頸椎處死后開腹，抽取腹主動(dòng)脈血約3m L，應(yīng)用自動(dòng)生化分析儀檢測(cè)ALT、比色法檢測(cè)血清MDA，應(yīng)用酶聯(lián)免疫法檢測(cè)血清TGF-β1，具體操作嚴(yán)格按試劑盒說明書。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法：應(yīng)用SPSS10.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，計(jì)量資料以±s表示，兩兩比較采用LSD-t檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

與正常組相比，模型組經(jīng)照射后ALT活性明顯增高，MDA和TGF-β1水平增高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），造模成功，出現(xiàn)肝放射損傷。實(shí)驗(yàn)組ALT活性、MDA和TGF-β1水平升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），應(yīng)用丹參酮后雖減輕肝損傷，但未達(dá)到正常水平。見表1。

與模型組相比，實(shí)驗(yàn)組應(yīng)用丹參酮治療后，ALT活性明顯下降，MDA和TGF-β1水平下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），肝損傷程度減輕，治療有效，見表1。

表1 3組ALT、MDA、TGF-β1的比較

3 討 論

肝組織中含有豐富的ALT，在肝組織受到損害或壞死時(shí)，血清ALT活性明顯升高。在本研究中模型組造模成功，能達(dá)到肝臟明顯損傷，應(yīng)用丹參酮腹腔注射后可明顯降低ALT的水平，可減輕肝損傷程度，可達(dá)到保護(hù)作用。

丹參酮ⅡA是從活血化瘀中藥丹參中提取的脂溶性有效成分，丹參酮類化合物通過與自由基結(jié)合生成高穩(wěn)定性的復(fù)合物，降低自由基活性，從而發(fā)揮抗氧化作用。Niu等［2］研究認(rèn)為丹參酮ⅡA能夠有效防止低密度脂蛋白的氧化和抑制細(xì)胞脂質(zhì)過氧化。續(xù)潔琨等［3］研究發(fā)現(xiàn)丹參酮類化合物對(duì)應(yīng)激負(fù)荷等原因引起肝損傷的保護(hù)作用，可能與其清除自由基、減少氧自由基介導(dǎo)的細(xì)胞損害，抑制脂質(zhì)過氧化損傷的過程有關(guān)。本研究模型組大鼠ALT水平顯著升高，脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物MDA含量顯著增高，肝臟受損明顯。而實(shí)驗(yàn)組ALT、MDA含量降低，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，可見丹參酮能阻止自由基對(duì)肝細(xì)胞膜中不飽和脂肪酸的氧化損傷，保護(hù)了肝細(xì)胞，減少了ALT、MDA的釋放。劉永剛等［4］在考察丹參酮ⅡA對(duì)CCl4和D-半乳糖胺引起的小鼠肝損傷的保護(hù)作用時(shí)也證明丹參酮ⅡA能顯著降低血清ALT水平和肝組織勻漿MDA含量。王宇等［5］研究丹參對(duì)原位肝移植肝臟的缺血再灌注損傷有保護(hù)作用，從而減輕氧自由基及脂質(zhì)過氧化，保護(hù)細(xì)胞膜，改善肝功能。

TGF-β1是公認(rèn)的致肝纖維化的最主要的細(xì)胞因子之一［6］，它與肝組織損傷密切相關(guān)。Seong等［7］觀察正常肝組織照射后受損傷肝組織表達(dá)TGF-β1mRNA早期升高。本研究中，模型組TGF-β1明顯高于正常組，而實(shí)驗(yàn)組的TGF-β1水平明顯下降，結(jié)果表明在放射反應(yīng)中丹參酮可降低TGF-β1的水平，減輕肝損傷的程度，對(duì)治療過程中的輻射損傷具有一定作用。

電離輻射對(duì)肝臟損傷的主要并發(fā)癥是放射性肝炎及纖維化，其發(fā)生機(jī)制尚未完全闡明。它不僅限制了治療的實(shí)施，也降低了患者療效和生存質(zhì)量。本研究初步得出丹參酮對(duì)放射性肝損傷有一定的治療保護(hù)作用，希望能進(jìn)一步應(yīng)用于臨床，使患者從中受益。

［1］ 曾昭沖.肝細(xì)胞癌的放射治療［J］.實(shí)用腫瘤雜志，2007，22（5）：380-384

［2］ NIU XL，ICHIMORIK，YANG X，et al.TanshinoneⅡA inhibits low density lipoprotein oxidation in vitro［J］.Free Radic Res，2000，33（1）：305-312.

［3］ 續(xù)潔琨，栗原博，鄭潔靜等丹參酮類化合物對(duì)小鼠應(yīng)激性肝損傷的保護(hù)作用［J］藥學(xué)學(xué)報(bào)，2006，41（7）：631-635.

［4］ 劉永剛，陳厚昌，蔣義平.丹參酮對(duì)小鼠肝損傷的保護(hù)作用［J］中藥材，2001，24（8）：588.

［5］ 王宇，周杰，蔣曉青.丹參對(duì)原位肝移植大鼠供肝冷保存再灌注損傷的保護(hù)作用［J］.中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù)，2008，12（5）：801-804.

［6］ ZHANG LJ，YU P，LI D，et al.Effect of cytokines on carbon tetrachloride-induced hepatic fibrogenesis in rat［J］.World J Gastroeaterol，2004，10（1）：77-81.

［7］ SEONG J，KIM SH，CHUNG EJ，et al.Early alteration in TGF-beta mRNA expression in irradiated rat liver［J］.Int J Radiat Oncol Biol Phys，2000，46（3）：639-643.

（本文編輯：趙麗潔）

R735.7

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1007-3205（2012）03-0339-02

2011-09-26；

2011-10-31

苑蘭惠（1973-），女，河北保定人，河北大學(xué)附屬醫(yī)院副主任醫(yī)師，醫(yī)學(xué)碩士，從事腫瘤放射治療研究。

10.3969/j.issn.1007-3205.2012.03.038