真菌殼聚糖的研究進(jìn)展

王偉平，陳德容，杜予民

(1.湖北工業(yè)大學(xué) 發(fā)酵工程省部共建教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，湖北 武漢 430068；2.武漢大學(xué)資源與環(huán)境科學(xué)學(xué)院，湖北 武漢 430072)

殼聚糖(Chitosan)是甲殼素的部分脫乙酰產(chǎn)物，也天然存在于一些真菌的細(xì)胞壁中，是自然界唯一大量存在的堿性多糖，具有陽(yáng)離子聚電解質(zhì)性和多功能基團(tuán)反應(yīng)性，易于化學(xué)修飾，安全無(wú)毒，具生物相容性和生物降解性[1，2]，在工業(yè)、醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等領(lǐng)域得到了深入的研究和廣泛的應(yīng)用[3～8]。隨著人們對(duì)殼聚糖及其衍生物應(yīng)用研究的逐漸深入，對(duì)殼聚糖及其制品的需求大幅度增長(zhǎng)。

市售殼聚糖是由甲殼素經(jīng)強(qiáng)堿熱解法脫乙酰制備，而甲殼素利用蝦、蟹等的外殼采用化學(xué)法生產(chǎn)，這種生產(chǎn)方法原料來(lái)源受限制、產(chǎn)品性能不穩(wěn)定、環(huán)境污染嚴(yán)重。因此，人們對(duì)采用真菌培養(yǎng)法直接生產(chǎn)殼聚糖進(jìn)行了系列研究。作者在此綜述了國(guó)內(nèi)外真菌殼聚糖的合成機(jī)理、菌種選育、發(fā)酵工藝優(yōu)化及提取方法等方面的研究進(jìn)展。

1 合成機(jī)理

殼聚糖在真菌體內(nèi)的生物合成與其它多糖一樣，是一個(gè)相當(dāng)復(fù)雜的生物化學(xué)過(guò)程。Davis 等[9]在研究魯氏毛霉(Mucorrouxii)合成殼聚糖的機(jī)理時(shí)發(fā)現(xiàn)，該菌中存在著甲殼素合成酶(CS)和甲殼素脫乙酰酶(CDA)，首先通過(guò)CS催化細(xì)胞中存在的氨基糖核苷酸即尿苷二磷酸-N-乙酰-D-葡糖胺(UDP-GlcNAc)轉(zhuǎn)變成N-乙酰-D-葡糖胺即甲殼素，甲殼素通過(guò)CDA脫去乙?；?，形成殼聚糖。此類菌體中不僅存在甲殼素，也存在殼聚糖，真菌殼聚糖由兩種酶——CS和CDA縱向作用才能合成，二者缺一不可，CS和CDA的活性強(qiáng)弱決定著殼聚糖合成量的多少，UDP-GlcNAc是甲殼素和殼聚糖合成的共同底物；合成速率不單由菌體內(nèi)源庫(kù)大小決定，添加外源物如N-乙基-D-葡糖胺可改變合成速率、自由N-乙酰-D-葡糖胺和蛋白酶能促進(jìn)合成，該合成必需Mg2+或Mn2+存在，但受多氧菌素D抑制。Gamow等[10]報(bào)道，甲殼素最初的脫乙酰作用是在一種特殊的酶促進(jìn)下，甲殼素鏈更易和胞外的脫乙酰酶作用。對(duì)此，Kafeotzopoulos等[11]認(rèn)為：甲殼素分子剛形成時(shí)，分子間未完全鍵合，CDA易接近新生甲殼素分子的乙?；鶊F(tuán)而起作用；一旦甲殼素結(jié)晶成微纖維狀，CDA難進(jìn)入分子內(nèi)部，故難以脫除乙?；DA對(duì)未成熟的剛形成的甲殼素有脫乙酰作用，對(duì)已形成的甲殼素(無(wú)論是膠質(zhì)還是粉末)的活性則很低，因此殼聚糖能被散布在細(xì)胞表面的甲殼素合成酶在甲殼素鏈結(jié)晶化以前優(yōu)先合成，細(xì)胞壁中殼聚糖和甲殼素的比例由到達(dá)細(xì)胞表面的CS的多少?zèng)Q定。

Domek等[12]研究表明Mucorracemosus有酵母態(tài)和菌絲態(tài)兩種形態(tài)，二者化學(xué)成分相似，但菌絲態(tài)甲殼素和殼聚糖產(chǎn)量是酵母態(tài)的3倍。呈菌絲態(tài)時(shí)，幾丁質(zhì)和殼聚糖處于絲狀真菌細(xì)胞壁最內(nèi)層，臨近質(zhì)膜，呈放射狀，是真菌菌絲尖端延長(zhǎng)部位的主要組分，幾丁質(zhì)與殼聚糖的生成與真菌菌絲的生長(zhǎng)關(guān)系密切，絲狀真菌生長(zhǎng)在菌絲體頂端動(dòng)態(tài)延伸[13]，這被認(rèn)為是由于合成胞囊的合成酶包含在頂端細(xì)胞原生質(zhì)膜上的細(xì)胞壁內(nèi)所導(dǎo)致的[14]。呈酵母態(tài)時(shí)，細(xì)胞壁化合物在整個(gè)細(xì)胞壁外均勻分布，導(dǎo)致球體形態(tài)。據(jù)推測(cè)，酵母態(tài)細(xì)胞原生質(zhì)膜合成胞囊不像菌絲態(tài)受特殊位點(diǎn)的限制。Duran等[15]認(rèn)為，在酵母態(tài)，甲殼素合成酶以不活躍酶原形式均勻存在于原生質(zhì)膜中，由蛋白酶將受限制的酶原帶到胞囊的特殊位點(diǎn)導(dǎo)致甲殼素沉積。因此，可以通過(guò)提高菌絲態(tài)菌絲體的產(chǎn)量或菌絲體中殼聚糖的產(chǎn)率來(lái)實(shí)現(xiàn)殼聚糖產(chǎn)量的增長(zhǎng)[16]。

2 菌種選育

2.1 菌種篩選

不同菌綱真菌細(xì)胞壁多糖的主要成分不一樣，具體見(jiàn)表1。

表1 真菌細(xì)胞壁多糖的主要成分

由表1可知，接合菌綱真菌是細(xì)胞壁含有甲殼素和殼聚糖的典型。其中毛霉目包含種類最多、形態(tài)最多樣化，代表種為毛霉屬(Mucor)、根霉屬(Rhizopus)和犁頭霉屬(Absidia)。真菌殼聚糖的研究主要集中在這三種菌。也有報(bào)道從半知菌綱黑曲霉和青霉菌絲體中提取殼聚糖，但黑曲霉和青霉細(xì)胞壁只含甲殼素、不含殼聚糖，所得殼聚糖仍由甲殼素經(jīng)強(qiáng)堿或酶法[17]脫乙酰得到。

不同真菌殼聚糖的菌產(chǎn)量和產(chǎn)率不同，分子量和脫乙酰度等理化特性差異也很大。Wu等[18]利用酵母膏蛋白胨葡萄糖(YPD)培養(yǎng)基液態(tài)發(fā)酵比較了黑曲霉(Aspergillusniger)和魯氏毛霉(Mucorrouxii)產(chǎn)殼聚糖的能力，證實(shí)Aspergillusniger不產(chǎn)殼聚糖，Mucorrouxii的殼聚糖產(chǎn)率為12.49%，乙?；潭葹?9.5%，結(jié)晶度比蝦殼殼聚糖低。Amorim等[19]利用YPD培養(yǎng)基液態(tài)發(fā)酵比較了Mucorracemosus和Cunninghamellaelegans產(chǎn)殼聚糖的能力，發(fā)現(xiàn)M.racemosus的殼聚糖產(chǎn)量比C.elegans高40%；培養(yǎng)100 h，菌體干重分別達(dá)到25 g·L-1和15 g·L-1，殼聚糖產(chǎn)率分別為3.5%和2.0%，DD分別為51%和80%。Miyoshi等[20]從5株不同種類菌體中篩選殼聚糖生產(chǎn)菌株，發(fā)現(xiàn)Absidiacoerulea產(chǎn)率最高，達(dá)10.4%，乙?；潭茸畹?，分子量為100～450 kDa，比化學(xué)法殼聚糖的分子量(120～1500 kDa)低。Davoust等[21]利用發(fā)酵罐培養(yǎng)對(duì)15株Absidia菌進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)Absidiarepens殼聚糖產(chǎn)率最高，產(chǎn)量為2.8 g·L-1。Hu等[22]對(duì)33株真菌進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)Absidiaglauca殼聚糖產(chǎn)率最高，為7.4%，產(chǎn)量最高為0.646 g·L-1，該菌吸附Cu2+能力最強(qiáng)，吸附能力比蟹殼殼聚糖高。Shimahara等[23]利用復(fù)合培養(yǎng)基從32株Rhizopus菌株中提取殼聚糖，產(chǎn)量為0.330～0.645 g·L-1。Suntornsuk 等[24]利用大豆和綠豆豆粕培養(yǎng)4株真菌，在大豆豆粕培養(yǎng)基上培養(yǎng)Rhizopusoryzae時(shí)殼聚糖產(chǎn)量最高，為4.3 g·(kg大豆豆粕)-1。Tan等[25]對(duì)接合菌綱的13株真菌進(jìn)行篩選，發(fā)現(xiàn)Gongronellabutleri殼聚糖產(chǎn)率最高，為7.0%，產(chǎn)量為0.47 g·L-1。

2.2 菌種誘變

由于缺乏好的殼聚糖高產(chǎn)菌株的平板篩選方法，菌種誘變的相關(guān)報(bào)道不多。Maw等[26]利用紫外誘變Gongronellabutleri、應(yīng)用酶聯(lián)免疫反應(yīng)篩選高產(chǎn)菌，具體是通過(guò)篩選出甲殼素脫乙酰酶酶活高的菌株而完成的。高產(chǎn)菌株的殼聚糖產(chǎn)量和甲殼素脫乙酰酶酶活均提高2倍。

3 發(fā)酵工藝優(yōu)化

3.1 固、液態(tài)發(fā)酵方法比較

Crestini 等[27]利用Lentinusedodes分別進(jìn)行液態(tài)和固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)殼聚糖，液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)量為0.12 g·L-1，DD隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)而增大，為5.5%～12.5%；固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)量為6.18 g·(kg小麥稈培養(yǎng)基)-1，為目前資料顯示固態(tài)發(fā)酵殼聚糖產(chǎn)量最高值，DD隨著培養(yǎng)時(shí)間的延長(zhǎng)基本沒(méi)有變化，為10.1%～12.5%。Nwe等[28]利用土豆或土豆浸出物為培養(yǎng)基主要成分并添加不同的氮源，分別進(jìn)行固態(tài)和液態(tài)發(fā)酵Gongronellabutleri產(chǎn)殼聚糖，液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)量為0.6 g·L-1[相當(dāng)于6 g·(kg發(fā)酵培養(yǎng)基)-1]，分子量為(0.7～1.2)×105Da，DD為94%～96%；固態(tài)發(fā)酵產(chǎn)量為3.7 g·(kg發(fā)酵培養(yǎng)基)-1，固態(tài)發(fā)酵利于產(chǎn)生低分子殼聚糖，分子量為(0.25～0.38)×105Da，DD為92%～96%。Wang等[29，30]分別利用固態(tài)發(fā)酵和液態(tài)發(fā)酵培養(yǎng)Absidiacoerulea，均得到5～10 kDa的低分子量殼聚糖，固態(tài)發(fā)酵所得殼聚糖產(chǎn)量為6.12 g·(kg土豆片培養(yǎng)基)-1，利用YPD培養(yǎng)基液態(tài)搖瓶發(fā)酵所得殼聚糖產(chǎn)量在0.6 g·L-1左右。

3.2 碳源、氮源

微生物生產(chǎn)殼聚糖要和化學(xué)法競(jìng)爭(zhēng)，必須使用更便宜的碳源、氮源。

Amorim等[31]利用甜甘蔗汁或糖蜜為廉價(jià)碳源發(fā)酵Syncephalastrumracemosum，氮源為0.3%酵母膏，當(dāng)添加最佳碳源甜甘蔗汁(30 g蔗糖·L-1)時(shí)，搖瓶殼聚糖得率為30 mg·(g蔗糖)-1，5 L發(fā)酵罐殼聚糖得率為50 mg·(g蔗糖)-1(即1.5 g·L-1)。G?ksungur[32]利用處理和未處理的甜菜糖蜜作碳源搖瓶培養(yǎng)Rhizopusoryzae，發(fā)現(xiàn)加未處理甜菜糖蜜、糖濃度40 g·dm-3的殼聚糖產(chǎn)量最高，達(dá)0.961 g·L-1；利用未處理的甜菜糖蜜作碳源的合成培養(yǎng)基發(fā)酵罐培養(yǎng)，在起始糖濃度為45.37 g·dm-3、通氣速度為2.10 vvm、攪拌速度為338.93 r·min-1的條件下，殼聚糖產(chǎn)量最高，為1.1 g·L-1，殼聚糖菌絲體產(chǎn)率均為8%～10%。

McGahren等[33]利用10～400 L的不同發(fā)酵容器發(fā)酵Absidiacoerulea產(chǎn)殼聚糖，結(jié)果表明，葡萄糖、糖蜜等都是好的碳源，培養(yǎng)基需要添加高濃度的胺鹽、微量元素和酵母膏，利用氨氣流加維持pH值4.5，菌絲體干重最高可達(dá)25 g·L-1，菌體為米粒樣小球，易收集和過(guò)濾。

Chatterjee等[34]利用糖蜜鹽、PDB和YPG等不同培養(yǎng)基三角瓶液態(tài)發(fā)酵Mucorrouxii產(chǎn)殼聚糖，產(chǎn)量分別為0.61 g·L-1、0.51 g·L-1和0.57 g·L-1。Nitar等[35]利用GongronellabutleriUSDB 0201甜土豆片和不同濃度的尿素在26 ℃培養(yǎng)7 d，結(jié)果表明，尿素加量為7.2 g·(kg底物)-1、起始pH值為5.5時(shí)，菌絲體產(chǎn)量最高，為38 g·(kg底物)-1，殼聚糖產(chǎn)率為10.5 g·(100 g菌絲體)-1，DD為89%；和Arcidiacono等[36]液態(tài)發(fā)酵研究結(jié)果一致。

有機(jī)廢水也可作為真菌殼聚糖的培養(yǎng)基。Yokoi等[37]研究表明，蒸餾廢水是培養(yǎng)Absidiaatrospra和Gongronellabutleri產(chǎn)殼聚糖的良好營(yíng)養(yǎng)源，甜土豆蒸餾廢水培養(yǎng)Gongronellabutleri，殼聚糖產(chǎn)量達(dá)0.73 g·L-1。

3.3 添加劑

Jaworska等[16]考察了添加Fe2+、Mn2+、Cu2+、胰蛋白酶和甲殼素對(duì)Absidiaorchidis產(chǎn)殼聚糖的影響。結(jié)果表明，添加Fe2+、Mn2+利于菌絲體增長(zhǎng)，26 ℃培養(yǎng)48 h的殼聚糖產(chǎn)量分別從0.40 g·L-1增長(zhǎng)到1.28 g·L-1和1.84 g·L-1；添加Fe2+、Mn2+降低了甲殼素脫乙酰酶的活性，對(duì)殼聚糖產(chǎn)率影響不大；添加Cu2+抑制菌體生長(zhǎng)；添加胰蛋白酶和甲殼素對(duì)Absidiaorchidis產(chǎn)殼聚糖沒(méi)有影響。有報(bào)道表明，培養(yǎng)中加入洋地黃苷，殼聚糖會(huì)提高產(chǎn)量3倍，洋地黃苷通過(guò)分裂甲殼素合成酶，將甲殼素鏈分解開(kāi)，在結(jié)晶成微晶體前被脫乙酰酶作用[9]。

Chatterjee等[38]添加植物生長(zhǎng)激素如赤霉素、吲哚乙酸、吲哚丁酸和激動(dòng)素到糖蜜-鹽培養(yǎng)基中，可提高M(jìn)ucorrouxii菌絲體和殼聚糖的產(chǎn)量，分別從12%提高到17.4%、從34%提高到69%，其中添加赤霉素效果最好，1 L培養(yǎng)基中添加3 mg赤霉素可提高殼聚糖產(chǎn)量69%，DD不變，但分子量由于激素的添加增大了50%。Chatterjee等[39]還發(fā)現(xiàn)，乳清培養(yǎng)基中添加植物生長(zhǎng)激素能促進(jìn)Rhizopusoryzae產(chǎn)殼聚糖，菌體產(chǎn)量提高19%～32%，但殼聚糖產(chǎn)率增長(zhǎng)相對(duì)較小(1.7%～14.3%)，其中添加赤霉素時(shí)菌體和殼聚糖產(chǎn)量提高最大，1 L乳清培養(yǎng)基中添加0.1 mg·L-1赤霉素可提高殼聚糖產(chǎn)量50%。殼聚糖產(chǎn)量提高的原因可能是添加激素提高了甲殼素脫乙酰酶的活性。Yoshihara等[40]認(rèn)為培養(yǎng)基中添加5～12 g·L-1D-阿洛酮糖利于Rhizopusoryzae細(xì)胞壁中殼聚糖的合成。

3.4 接種量、溶氧

Davoust等[21]在10 L發(fā)酵罐中培養(yǎng)Absidiarepens產(chǎn)殼聚糖。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，高產(chǎn)殼聚糖的最好方法是保證真菌快速生長(zhǎng)和提高菌絲體產(chǎn)量。菌體的生長(zhǎng)速度與發(fā)酵時(shí)的菌體形態(tài)密切相關(guān)，對(duì)于藍(lán)色犁頭霉，接種孢子的數(shù)量越多，起始生長(zhǎng)速度越快，但菌體會(huì)提前達(dá)到生長(zhǎng)平衡，從而導(dǎo)致最終菌體產(chǎn)率降低。液態(tài)發(fā)酵攪拌速度太低以及接種濃度過(guò)高均會(huì)嚴(yán)重影響菌體生長(zhǎng)。進(jìn)一步研究菌體形態(tài)對(duì)殼聚糖產(chǎn)量的影響發(fā)現(xiàn)，利用大的攪拌槳葉輪加快轉(zhuǎn)速時(shí)，會(huì)形成直徑更小、更結(jié)實(shí)的小球，同時(shí)避免漿狀體的出現(xiàn)，漿狀體的菌體產(chǎn)率比小球產(chǎn)率低。溶氧量在轉(zhuǎn)速200 r·min-1時(shí)下降迅速，菌體長(zhǎng)成漿狀；但轉(zhuǎn)速升至350 r·min-1時(shí)，菌體變?yōu)?～3 mm小球。漿狀和2～3 mm小球均抑制菌體生長(zhǎng)，而0.5 mm小球利于菌體生長(zhǎng)。在對(duì)數(shù)期，無(wú)論形態(tài)如何，菌體中殼聚糖的產(chǎn)率穩(wěn)定；在穩(wěn)定期，產(chǎn)率從18%持續(xù)提高至23%，即產(chǎn)量2.8 g·L-1。并對(duì)分批培養(yǎng)和連續(xù)培養(yǎng)進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)連續(xù)培養(yǎng)會(huì)由于缺乏新的生長(zhǎng)點(diǎn)而導(dǎo)致產(chǎn)率較低。

Wu等[41]研究發(fā)現(xiàn)，藍(lán)色犁頭霉培養(yǎng)過(guò)程中對(duì)溶氧的需求很高，且對(duì)剪切力的強(qiáng)度敏感。利用改進(jìn)的有2個(gè)通信內(nèi)網(wǎng)管的改良?xì)馍桨l(fā)酵罐液態(tài)培養(yǎng)產(chǎn)生的菌絲體的產(chǎn)量比傳統(tǒng)的氣泡塔式及600 r·min-1攪拌式發(fā)酵罐的高2倍，殼聚糖最高產(chǎn)量為3.16 g·L-1，比300 r·min-1攪拌式發(fā)酵罐的產(chǎn)量高55%，是目前資料顯示液態(tài)發(fā)酵殼聚糖產(chǎn)量最高值。

3.5 培養(yǎng)時(shí)間

不同生長(zhǎng)階段真菌的幾丁質(zhì)和殼聚糖含量不同，通常對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期含量較高[9，23,25,33,42]。對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期過(guò)后，菌體量仍然繼續(xù)增長(zhǎng)，但殼聚糖量逐漸減少。這可能是由于，殼聚糖由新生成的甲殼素經(jīng)脫乙酰酶作用而得到，在對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，由于菌體積極生長(zhǎng)，游離的殼聚糖相當(dāng)高；到穩(wěn)定期后，真菌細(xì)胞壁發(fā)生了生理學(xué)改變，殼聚糖被甲殼素和其它多糖所綁定，與其它細(xì)胞壁物質(zhì)結(jié)合得更加牢固，使提取變得困難。因此，對(duì)數(shù)生長(zhǎng)末期的殼聚糖產(chǎn)量最高，盡管穩(wěn)定期菌絲體產(chǎn)量最高，但獲得的殼聚糖較少，應(yīng)在對(duì)數(shù)期收獲菌絲體，以對(duì)數(shù)生長(zhǎng)末期作為菌種篩選的培養(yǎng)期。Amorim等[19]則認(rèn)為更多的殼聚糖在對(duì)數(shù)期早期，由脫乙酰酶作用產(chǎn)生，可能早期甲殼素結(jié)晶度不高，因而更易被酶作用。

3.6 pH值

Rane等[43]報(bào)道pH值對(duì)藍(lán)色犁頭霉產(chǎn)殼聚糖及殼聚糖的DD有影響，可能是因?yàn)槊撘阴Ｃ冈谧钸m合pH值下轉(zhuǎn)化甲殼素為殼聚糖的效果更佳。Kafeotzopoulos等[11]研究發(fā)現(xiàn)，Mucorrouxii甲殼素脫乙酰酶作用的最適pH值為4.5，殼聚糖分子量隨著pH值的增加而增大，在pH值5.46和5.59時(shí)分別為251 kDa和317 kDa。

4 提取方法

與從蝦、蟹殼中提取的傳統(tǒng)方法相比，用絲狀真菌生產(chǎn)殼聚糖分離工藝簡(jiǎn)便，絲狀真菌可利用其自身酶的催化作用得到殼聚糖，只需用稀堿和稀酸簡(jiǎn)單處理就可以得到純度相當(dāng)高的制品，大大簡(jiǎn)化了提取工藝，降低了生產(chǎn)成本。

Domek等[12]用熱NaOH去除Mucorracemosus菌絲體中的蛋白質(zhì)后，剩下的就是甲殼素和殼聚糖。Synowiecki等[44]利用Mucorrouxii液態(tài)發(fā)酵產(chǎn)殼聚糖，用2% NaOH提取菌絲體，90 ℃脫蛋白質(zhì)2 h，10%乙酸60 ℃提取殼聚糖6 h，隨后將pH值調(diào)到9.0，得到殼聚糖，甲殼素和殼聚糖的產(chǎn)率分別為8.9% 和7.3%。

McGahren等[33]對(duì)3種不同提取方法進(jìn)行了比較，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，強(qiáng)酸利于殼聚糖的提取，但導(dǎo)致殼聚糖水解、粘度降低，培養(yǎng)91 h的菌體產(chǎn)量達(dá)23 g·L-1；1% HCl回流15 min,殼聚糖產(chǎn)率最高(達(dá)12.5%)、粘度最低(為5.3 cP)、純度為85%。Niederhofer等[45]認(rèn)為水洗會(huì)洗去低分子殼聚糖，改用乙醇洗滌，利用藍(lán)色犁頭霉液態(tài)培養(yǎng)，得到重均分子量為4.5×104g·mol-1、數(shù)均分子量為1.7×104g·mol-1的殼低聚糖，殼低聚糖產(chǎn)率為2.9%。

Nwe等[46]研究發(fā)現(xiàn)選擇合適的提取方法對(duì)殼聚糖的產(chǎn)量影響很大。利用1 mol·L-1NaOH在45 ℃下提取13 h、0.35 mol·L-1乙酸在95 ℃下提取5 h殼聚糖，菌絲體基質(zhì)沒(méi)有破壞，得到的是自由殼聚糖，Gongronellabutleri和Absidiacoerulea的殼聚糖產(chǎn)量分別為2 g·(100 g菌絲體)-1和6.5 g·(100 g菌絲體)-1；而將1 mol·L-1NaOH換作11 mol·L-1NaOH，得到產(chǎn)量8～9 g·(100 g菌絲體)-1的復(fù)合殼聚糖，其原因是在強(qiáng)堿的作用下，更多甲殼素脫乙酰變成了殼聚糖。

5 結(jié)語(yǔ)

已有的研究表明，根據(jù)合成途徑代謝調(diào)控，通過(guò)菌種選育，優(yōu)化營(yíng)養(yǎng)成分、培養(yǎng)條件或提取方法，可以進(jìn)一步提高真菌殼聚糖的產(chǎn)量或產(chǎn)率，從而使真菌發(fā)酵法工業(yè)化生產(chǎn)殼聚糖成為可能，以替代現(xiàn)有的有生產(chǎn)缺陷的化學(xué)生產(chǎn)方法。

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