殺蟲劑對煙蚜繭蜂不同發(fā)育階段的毒性

陳德錕， 陳珍珍， 劉長明

福建農(nóng)林大學植物保護學院，農(nóng)業(yè)部亞熱帶農(nóng)業(yè)生物災害與治理重點開放實驗室/福建省昆蟲生態(tài)重點實驗室，福建 福州 350002

煙蚜Myzuspersicae(Sulzer)寄主廣泛,是煙株上的主要害蟲之一(張廣學和鐘鐵森，1983), 在我國煙區(qū)均有分布。煙蚜繭蜂AphidiusgifuensisAshmead屬膜翅Hymenoptera蚜繭蜂科Aphidiidae，是煙蚜的主要天敵，可寄生多種蚜蟲，在自然條件下的寄生率高，容易進行人工繁殖,現(xiàn)在已被廣泛用于煙蚜的生物防治，并取得了良好的效果(畢章寶和季正端，1996; 忻亦芬，1986； 趙萬源等，1980； Fukui,1988)。

長期使用殺蟲劑防治煙蚜不僅會使煙蚜產(chǎn)生抗藥性(Devonshire,1989)，而且會導致天敵發(fā)育畸形甚至死亡，在一定范圍內(nèi)影響煙蚜繭蜂控制害蟲的能力和自身繁殖力(劉慧平等，2006、2007； 王德森等，2012)。煙蚜繭蜂除了羽化后的成蜂在寄主體外，其他蟲態(tài)都在寄主體內(nèi)完成發(fā)育，所以殺蟲劑在殺傷寄主的同時間接地影響了繭蜂(Masonetal.，2002)。寄生蜂不同蟲態(tài)對殺蟲劑的敏感程度有所不同。朱九生等(2009)研究表明，阿維菌素對廣赤眼蜂TrichogrammaevanescensWestwood幼蟲期和卵期無影響，但在預蛹和蛹期用藥后成蜂羽化率下降，羽化后雌蜂壽命縮短；而尹可鎖等(2005)在室內(nèi)分別用除蟲菊素、高效氯氰菊酯、吡蟲啉、啶蟲脒4種殺蟲劑處理蚜繭蜂DiaeretiellarapaeMintosh蛹后，蛹的羽化率沒有顯著變化；李增梅等(2005)研究表明，多殺菌素對菜蛾絨繭蜂Cotesiaplutellae(Kurdjumov)成蜂具有高毒性。目前，有關殺蟲劑對蚜繭蜂蛹、成蟲的影響已有報道(陳家驊等，1989； 尹可鎖等，2005)，但對其在寄主體內(nèi)發(fā)育的卵、幼蟲的研究則相對較少。為此，本試驗研究煙蚜的常用殺蟲劑對煙蚜繭蜂不同發(fā)育階段的毒性，以期為田間合理用藥及更好地協(xié)調(diào)化學防治和生物防治提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1. 1 材料

1. 1. 1 供試寄主植物 煙草種子由福建省煙草農(nóng)業(yè)科學研究所提供，品種為K326，采用漂浮育苗法育苗，待長至7片真葉時移至花盆和大棚中定植待用。

采用離體煙葉飼養(yǎng)煙蚜：養(yǎng)蟲盒(22 cm×14 cm×7 cm)中倒入1%瓊脂溶液，將煙葉剪成比養(yǎng)蟲盒稍小的長方形，待瓊脂溶液冷卻但尚未完全凝固時將剪好的葉片鋪于其上，煙葉正面貼緊瓊脂進行保濕。

1. 1. 2 供試蟲源 煙蚜采自福建農(nóng)林大學作物病蟲害生物防治研究所，移至養(yǎng)蟲盒并置于人工氣溫箱(寧波海曙賽福實驗儀器廠生產(chǎn)，型號為PRX-250B)中飼養(yǎng)若干代后待用。本試驗所用人工氣候箱條件均為(25±1) ℃、光照14L:10D、相對濕度(75±5)%。

煙蚜繭蜂飼養(yǎng)于福建農(nóng)林大學作物病蟲害生物防治研究所煙葉種植大棚；試驗用蜂采自大棚，將煙蚜繭蜂移至人工氣溫箱中飼養(yǎng)若干代后使用。

1. 1. 3 供試藥劑 5%啶蟲脒乳油(濟南金地農(nóng)藥有限公司)、10%順式氯氰菊酯乳油(巴斯夫有限公司)、5%阿維菌素乳油(山東聯(lián)合農(nóng)藥工業(yè)有限公司)、10%吡蟲啉可濕性粉劑(青島金正農(nóng)藥有限公司)。

1. 2 試驗方法

1. 2. 1 4種殺蟲劑對煙蚜及煙蚜繭蜂成蜂的毒性測定 試驗參照李曉磊和劉長明(2009)的蟲體浸漬法。在預試驗的基礎上將農(nóng)藥稀釋成5個系列濃度，以清水作對照。選取有一定數(shù)量煙蚜的葉片放入配制好的藥液中浸泡10 s，取出后迅速用吸水紙將葉片上的藥液吸干并用細毛筆將4齡若蚜100頭挑入預先準備好的煙葉(22 cm×14 cm)背面，采用1.1.1中的離體煙葉飼養(yǎng)煙蚜。蓋好養(yǎng)蟲盒以防煙蚜逃逸，置于智能人工氣候箱內(nèi)培養(yǎng)。48 h后置于體視顯微鏡下檢查死亡蟲數(shù)。用PoloPlus Version 2. 0版軟件計算48 h的LC10、LC50的毒力回歸方程。以LC10作為亞致死劑量供下列試驗備用。

采用試管藥膜法(Liuetal.,2003) 測定殺蟲劑對煙蚜繭蜂的觸殺毒性。將供試藥劑稀釋成田間常用濃度(稀釋2000倍)，取直徑0. 9 cm、長4. 0 cm的玻璃試管3支，分別倒?jié)M藥液，靜置60 s后倒出試管中的藥液。然后將試管置于通風處晾干，每支試管接入12 h內(nèi)羽化的雌、雄煙蚜繭蜂各10頭，用小型注射器在棉團上滴入少量的10%蜜水，并用該棉團封好管口(蜜水一端朝向試管內(nèi)部)，放入人工氣候箱中。每組處理重復3次，以清水作為對照組，分別于處理后2、4、8、12、24 h統(tǒng)計死亡率。

參照李增梅和劉銀泉(2005)的方法測定殺蟲劑對煙蚜繭蜂的胃毒作用。將藥劑用10%蜂蜜水稀釋成田間常用濃度(4種藥劑均稀釋2000倍)，取直徑0. 9 cm、長4. 0 cm的試管3支，向試管內(nèi)接入12 h內(nèi)未飼喂蜜水的雌、雄煙蚜繭蜂各10頭，用取液器取0. 5 mL藥液滴于棉花上，并用棉團將管口封好后放入人工氣候箱中。每組處理重復3次,以飼喂10%蜂蜜水為對照組，分別于處理后2、4、8、12、24 h統(tǒng)計死亡率。

1. 2. 2 煙蚜亞致死濃度殺蟲劑對煙蚜繭蜂各蟲態(tài)的毒性 用單只雌蜂寄生單只煙蚜的方法獲取被寄生的煙蚜30頭(李增梅等，2005)，接到養(yǎng)蟲盒內(nèi)的煙葉上，在產(chǎn)卵后1、4、9 d(相應的煙蚜繭蜂發(fā)育階段為卵、幼蟲、蛹)(趙萬源等，1980)，分別用煙蚜亞致死濃度藥液對煙葉均勻噴霧直到有液滴形成為止，再將養(yǎng)蟲盒置于人工氣候箱中。用藥后每12 h觀察1次，記錄最終僵蚜數(shù)、成蜂的羽化率及雌蜂的比例。試驗重復3次，并設清水作為對照。

1. 3 數(shù)據(jù)處理

煙蚜繭蜂的死亡率、羽化率及雌蜂比例用SPSS 17. 0軟件處理，計算均值及標準誤，差異顯著性通過LSD進行多重比較。

羽化率(%)=羽化蜂數(shù)僵蚜數(shù)×100

雌蜂比例=雌蜂數(shù)總蜂數(shù)

相對毒力指數(shù):選擇順式氯氰菊酯的LC50為標準藥劑，其相對毒力指數(shù)為1,其他藥劑相對毒力指數(shù)的計算公式如下：

相對毒力指數(shù)=順式氯氰菊酯LC50其他藥劑LC50

2 結(jié)果與分析

2. 1 4種殺蟲劑對煙蚜的毒力

阿維菌素對煙蚜4齡若蚜的毒力最高，LC50為1. 630 mg·L-1；其次為啶蟲脒和吡蟲啉,LC50分別為2. 717和12. 236 mg·L-1;順式氯氰菊酯對4齡若蚜毒力最低，LC50為29. 853 mg·L-1。阿維菌素和啶蟲脒的相對毒力指數(shù)較高，分別為18. 31和10. 99(表1)。

表1 殺蟲劑對煙蚜4齡若蚜的毒力Table 1 Toxicity of insecticides to 4th instar larvae of M.persicae

2.2 4種殺蟲劑對煙蚜繭蜂成蜂的觸殺和胃毒作用

各殺蟲劑在大田常用濃度處理下對煙蚜繭蜂成蜂的接觸毒性存在差異(表2)。其中，阿維菌素和啶蟲脒對煙蚜繭蜂有較大的殺傷力，24 h后致死率達到87. 78%和81. 11%；吡蟲啉對煙蚜繭蜂的毒性較低，24 h后致死率為41. 11%，但與對照比較仍存在顯著差異；順式氯氰菊酯對煙蚜繭蜂24 h后的致死率為64. 44%。隨著煙蚜繭蜂接觸藥劑時間的延長，成蜂的死亡率不斷增大。

表2 殺蟲劑對煙蚜繭蜂成蜂的觸殺毒性Table 2 Contact toxicity of insecticides to adults of the parasitoid A.gifuensis

數(shù)值為平均值±標準誤;同列數(shù)據(jù)后附不同小寫字母者表示在0. 05水平上差異顯著(P<0. 05)。

The data in the table are means±SE． The data in the same column followed by the different letter are significantly different at 5% level． The control mortality over 24 h was zero. All treatments are significantly different from the control.

各殺蟲劑在田間使用濃度處理下對煙蚜繭蜂成蜂的胃毒作用存在差異(表3)。2 h后順式氯氰菊酯對成蜂的胃毒作用最強，致死率為20%；阿維菌素和吡蟲啉對成蜂的胃毒作用較弱，致死率均為4. 44%。但24 h后阿維菌素對煙蚜繭蜂的胃毒作用最強，致死率達94. 44%；其次為啶蟲脒，致死率為86. 66%；順式氯氰菊酯和吡蟲啉的胃毒作用相對較弱，致死率分別為67. 78%和61. 11%。

表3 殺蟲劑對煙蚜繭蜂成蜂的胃毒作用Table 3 Stomach toxicity of insecticides to adults of the parasitoid A.gifuensis

數(shù)值為平均值±標準誤;同列數(shù)據(jù)后附不同小寫字母者表示在0. 05水平上差異顯著(P<0. 05)。

The data in the table are means±SE． The data in the same column followed by the different letter are significantly different at 5% level． The control mortality over 24 h was zero. All treatments are significantly different from the control.

2.3 煙蚜亞致死濃度殺蟲劑對煙蚜繭蜂各蟲態(tài)的毒性

在煙蚜繭蜂卵期施用亞致死濃度殺蟲劑后，阿維菌素和啶蟲脒對煙蚜繭蜂成蜂羽化率的影響較大，且與對照組存在顯著差異；但吡蟲啉和順式氯氰菊酯處理后與對照相比差異不顯著。在幼蟲期施藥對煙蚜繭蜂成蜂羽化率存在影響，均顯著低于對照。在蛹期施藥對煙蚜繭蜂成蜂羽化率沒有顯著影響(表4)。

表4 4種殺蟲劑亞致死濃度對煙蚜繭蜂成蜂羽化率的影響Table 4 Emergence rate of A.gifuensis exposed to insecticides at three developmental stages

數(shù)值為平均值±標準誤;同列數(shù)據(jù)后附不同小寫字母者表示在0. 05水平上差異顯著(P<0. 05)。

The data in the table are means±SE． The data in the same column followed by the different letter are significantly different at 5% level．

由表5可知，在煙蚜繭蜂卵期用4種殺蟲劑亞致死濃度處理后，其羽化后雌蟲比例與對照沒有顯著差異；在幼蟲期施藥，阿維菌素處理后的煙蚜繭蜂雌蟲比例顯著高于對照，其他3種藥劑與對照沒有顯著差異；蛹期施藥后煙蚜繭蜂雌蟲比例與對照相比差異不顯著。

表5 4種殺蟲劑亞致死濃度對煙蚜繭蜂雌蜂比例的影響Table 5 Sex ratio of emerging A.gifuensis exposed to insecticides at three developmental stages

數(shù)值為平均值±標準誤;同列數(shù)據(jù)后附不同小寫字母者表示在0. 05水平上差異顯著(P<0. 05)。

The data in the table are means±SE．The data in the same column followed by the different letter are significantly different at 5% level．

3 討論

在成蜂期，煙蚜繭蜂直接接觸殺蟲劑，試驗所用4種殺蟲劑對煙蚜繭蜂均有觸殺和胃毒作用。其中，阿維菌素的毒性最高，在田間應盡量減少使用阿維菌素；吡蟲啉對煙蚜繭蜂的毒性相對較低，需要化學防治時可優(yōu)先考慮。殺蟲劑對煙蚜繭蜂卵期、幼蟲期的影響主要取決于其對寄主的毒性，殺蟲劑先作用于煙蚜之后才作用于其體內(nèi)的煙蚜繭蜂，阿維菌素和啶蟲脒對煙蚜的毒性較強，所以其對煙蚜繭蜂成蜂羽化率均有顯著影響。在煙蚜繭蜂蛹期用藥，對成蜂的羽化率、雌蜂比例均無顯著影響，可能是因為有繭的保護，殺蟲劑較難滲入。

李增梅和劉銀泉(2005)研究表明，阿維菌素對菜蛾絨繭蜂成蜂具有較高的安全性，這與本試驗結(jié)果存在差異，可能是因為2種繭蜂對阿維菌素的敏感度不一樣。尹可鎖等(2005)研究表明，吡蟲啉對蚜繭蜂毒性較低，與本試驗結(jié)果一致；但3%啶蟲脒對蚜繭蜂毒性也較低，與本試驗結(jié)果不同，可能是所用啶蟲脒有效成分含量不同所致；在蛹期施藥對蚜繭蜂的羽化率均沒有影響，與本研究一致。本試驗在室內(nèi)條件下進行，這與田間自然條件有一定的差異，因而關于殺蟲劑在田間對煙蚜繭蜂的毒性還需進一步研究。

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