奎屯墾區(qū)棉花黃萎病發(fā)生規(guī)律及防控技術(shù)研究

郭天鳳,馬野萍,李國(guó)萍,丁榮榮,蔡曉麗,王國(guó)平,張軍

摘要：測(cè)定了奎屯墾區(qū)棉花黃萎病致病類型，明確了該區(qū)棉花黃萎病發(fā)生與溫、濕度等氣象因子的關(guān)系；通過(guò)黃萎病抗性鑒定，表現(xiàn)耐病的品種（系）有１３個(gè)；利用選擇性培養(yǎng)基以新陸早３５號(hào)為供試材料分析了棉花黃萎病發(fā)病與土壤中黃萎病菌微菌核數(shù)量之間的關(guān)系。獲得了新陸早３５號(hào)菌核含量致病的臨界點(diǎn)。調(diào)查了生物藥劑萎菌凈防治棉花黃萎病的效果。

關(guān)鍵詞：棉花黃萎??；發(fā)生規(guī)律；防控技術(shù)；致病臨界點(diǎn)；奎屯墾區(qū)

中圖分類號(hào)：Ｓ４３５．６２１．２＋４文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：Ａ文章編號(hào)：0439－８114（２０12）05－0928-03

Study on the Occurrence Regulation and Control Technology of Cotton Verticillium Wilt in Kuitun Reclamation Area

ＧＵＯ Ｔｉａｎ－ｆｅｎｇ１a，ＭＡ Ｙｅ－ｐｉｎｇ１a，ＬＩ Ｇｕｏ－ｐｉｎｇ１a，ＤＩＮＧ Ｒｏｎｇ－ｒｏｎｇ１a，ＣＡＩ Ｘｉａｏ－ｌｉ１a，ＷＡＮＧ Ｇｕｏ－ｐｉｎｇ１a，

ＺＨＡＮＧ Ｊｕｎ１a，ＺＨＡＯ Ｆｕ－ｑｉａｎｇ１a，ＺＨＡＮＧ Ｄｏｎｇ－ｂｉｎ1b，ＬＩ Ｊｉａ－ｓｈｅｎｇ１a，ＬＩＵ Ｈａｉ－ｙａｎｇ2，ＹＡＮＧ Ｓｅｎ2

（１a．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ； 1b．Ｒｅｇｉｍｅｎｔａｌ Ｆａｒｍ １２９， Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｄｉｖｉｓｉｏｎ ７， Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ｐｒｏｄｕｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｃｏｎｓｔｒｕｃｔｉｏｎ Ｃｏｒｐｓ， Ｋｕｉtｕｎ ８３３２００，Ｘｉｎｊｉａｎｇ，Ｃｈｉｎａ； 2．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆＰｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ， Ｘｉｎｊｉａｎｇ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ， Ｕｒｕｍｑｉ ８３００００，Ｃｈｉｎａ）

Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｔｙｐｅ ｏｆ ｃｏｔｔｏｎ vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｉｌｔ ｉｎ Ｋｕｉｔｕｎ ｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ ａｒｅａ was determined； ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｔｈｅ ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｏｆ ｃｏｔｔｏｎ vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｉｌｔ ａｎｄ ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ， ｒｅｌａｔｉｖｅ ｍｏｉｓｔｕｒｅ， ｒａｉｎｆａｌｌ was defined． It was ｄｅｍｏｎｓｔｒａｔｅｄ that 13 ｃｕｌｔｉｖａｒｓ ｗｅｒｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ against vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ． Ａｎｄ ｔｈｅ ｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐ ｂｅｔｗｅｅｎ ｄｉｓｅａｓｅ ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ ｏｆ ｃｏｔｔｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｎｕｍｂｅｒ ｏｆ Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ was analyzed ｂｙ ｓｅｌｅｃｔｉｖｅ ｍｅｄｉｕｍ ｗｉｔｈ Ｘｉｎｌｕｚａｏ ３５． Ｔｈｅｎ ｔｈｅ ｃｒｉｔｉｃａｌ ｐｏｉｎｔ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ ｏｆ Ｓｃｌｅｒｏｔｉａ ｏｎ Ｘｉｎｌｕｚａｏ ３５ was obtained； ａｎｄ ｔｈｅ control ｅｆｆｅｃｔｓ ｏｆ ｂｉｏｔｉｃ fｕｎｇｉｃｉｄｅ dａｈｌｉａｅ ｎｅｔ were investigated．

Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ｃｏｔｔｏｎ vｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｗｉｌｔ； ｏｃｃｕｒｒｅｎｃｅ ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ； ｃｏｎｔｒｏｌ ｍｅｔｈｏｄｓ； ｃｒｉｔｉｃａｌ ｐｏｉｎｔ ｏｆ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃｉｔｙ； Ｋｕｉｔｕｎ ｒｅｃｌａｍａｔｉｏｎ ａｒｅａ

由大麗輪枝菌（Ｖｅｒｔｉｃｉｌｌｉｕｍ ｄａｈｌｉａｅ Ｋｌｅｂ．）引發(fā)的棉花黃萎病是土傳植物維管束萎蔫病害，是危害棉花的最重要病害之一。該病在奎屯墾區(qū)致病力明顯增強(qiáng)，發(fā)病時(shí)期不斷提前，極大地影響了棉花的生產(chǎn)和棉農(nóng)的植棉積極性［１，２］。土壤中棉花黃萎病菌的大量積累是該病發(fā)生流行的重要原因［３，４］。目前，防治棉花黃萎病的主要方法是選育與應(yīng)用抗病品種。藥劑防治中使用化學(xué)藥劑對(duì)環(huán)境造成了危害。拮抗微生物和農(nóng)業(yè)措施防病效果都不是很理想［５］。國(guó)外已有報(bào)道，拮抗微生物的種群密度大小與其寄主病原菌種群密度的相關(guān)性是保持防治效果穩(wěn)定的重要條件，其相關(guān)性越大防治的效果越顯著［６，７］。希臘、澳大利亞等國(guó)已將生物防治黃萎病的重點(diǎn)轉(zhuǎn)向黃萎菌的初侵染源——微菌核［８，９］，目前尚未見(jiàn)對(duì)土壤中黃萎病菌核數(shù)量與品種抗病性之間的相互關(guān)系和致病臨界點(diǎn)進(jìn)行研究。因此，明確奎屯墾區(qū)棉花黃萎病的致病類型和發(fā)生發(fā)展規(guī)律，客觀評(píng)價(jià)主栽品種的抗黃萎病能力，深入分析土壤中黃萎病菌核含量與品種抗病性之間的相互關(guān)系和致病的臨界點(diǎn)，對(duì)今后品種布局以及棉花黃萎病的綜合控制有很重要的意義。

１材料和方法

１．１材料和試劑

以新陸早３５號(hào)和農(nóng)七師主栽棉花品種、新育品種等３８份材料為供試材料。采集不同類型棉田的土壤，用直徑10 ｃｍ的網(wǎng)孔直徑為３８ μｍ和１５０ μｍ的網(wǎng)篩過(guò)篩。

選擇性培養(yǎng)基：改良ＭＳＭ培養(yǎng)基［３］（玻璃紙浸出液、蔗糖２ ｇ、ＥＤＴＡ－Ｎａ２ ０．１５ ｇ、２ ｍｏl／Ｌ的ＭｇＳO４·７Ｈ２Ｏ ０．５ ｍＬ、２ ｍｏl／Ｌ的ＫＮＯ３ ５ ｍＬ、1 ｍｏｌ／Ｌ的Ｋ２ＨＰＯ４ ２ ｍＬ，Ｔｅｒｇｉｔｏｌ－ＮＰ１０ １ ｍＬ、Ｂｉｏｔｉｎ 1 ｍｇ、1 ｍｏｌ／Ｌ的ＴＲＩＳ ３５ ｍＬ、ｌ ｍｏｌ／Ｌ的ＴＲＩＳ－ＨＣｌ １５ ｍＬ、瓊脂 １５ ｇ、蒸餾水１ 000 ｍＬ、土霉素５０ ｍｇ／Ｌ、青霉素２００ ｍｇ／Ｌ）。

１．２病菌的篩選

采用土壤水篩法［３］稱取上述土樣2．０ ｇ，共３份，每份分別放入盛有２００ ｍＬ水的三角瓶中，加入玻璃珠以剛好鋪滿三角瓶底部為宜，靜置１０ ｍｉｎ，在２００ ｒ／ｍｉｎ的搖床上搖３０ ｍｉｎ。然后倒入上層孔徑１５０ μｍ、下層孔徑３８ μｍ的雙層細(xì)篩里，在自來(lái)水下將泥土沖洗干凈。將留在下層篩網(wǎng)上的土壤殘留物全部轉(zhuǎn)移到５0 ｍＬ三角瓶中，用無(wú)菌水定容到2０ ｍＬ。將定容好的土樣液用移液槍每次均勻吸?。?ｍＬ于MSM培養(yǎng)基表面均勻涂布，每種培養(yǎng)基接種10皿（接種前將三角瓶中的土樣液充分搖勻），放在超凈工作臺(tái)上吹干，在２５ ℃下黑暗培養(yǎng)，分別在１、２、３、４周后于體視顯微鏡下進(jìn)行檢查。每種培養(yǎng)基10個(gè)皿的檢驗(yàn)結(jié)果數(shù)目之和就是所測(cè)2 ｇ土樣中所含微菌核的量。試驗(yàn)設(shè)３次重復(fù)。

1.3生物藥劑防治

供試藥劑為可濕性粉劑萎菌凈（河北省農(nóng)林科學(xué)院植物保護(hù)研究所提供）。棉花播種前用種子重量10%的藥劑拌種。試驗(yàn)在本所黃萎病圃進(jìn)行，設(shè)拌種處理、未拌種處理、新陸早6號(hào)未拌種處理3種處理方式。設(shè)3次重復(fù)。每處理種植2膜8行，行長(zhǎng)6 m，每小區(qū)18 m2。統(tǒng)一地塊、品種，調(diào)查棉花黃萎病的發(fā)生情況，比較拌種與不拌種對(duì)棉花黃萎病發(fā)生的影響。

２結(jié)果與分析

２．１奎屯墾區(qū)棉花黃萎病菌的致病力

采集奎屯墾區(qū)棉田棉花黃萎病病株，并對(duì)黃萎病菌進(jìn)行了分離、鑒定。病菌菌落在ＰＤＡ平板上正面為灰色，背部為黑色，在２０～２５ ℃條件下生長(zhǎng)最快，３０ ℃下大部分菌株停止生長(zhǎng)；并利用室內(nèi)盆栽、定量蘸根接種法對(duì)分離菌株的致病力進(jìn)行了測(cè)定，結(jié)果表明奎屯墾區(qū)的棉花黃萎病菌的致病力為中等。

２．２奎屯墾區(qū)棉花黃萎病的發(fā)生規(guī)律

棉花黃萎病的發(fā)生情況調(diào)查從５月份持續(xù)到９月份，從３年的調(diào)查結(jié)果（圖１）來(lái)看，棉花黃萎病的發(fā)生均呈上升趨勢(shì)，隨著生育期的進(jìn)程而加重。２０１０年棉花黃萎病發(fā)病較重，是因?yàn)槊藁ìF(xiàn)蕾后持續(xù)適溫，有利于棉花黃萎病的發(fā)生。

２．３棉田土壤中棉花黃萎病微菌核數(shù)量

２０１０年比較了同一品種不同類型棉田土壤微菌核的種群數(shù)量之間的差異，分析了棉花黃萎病發(fā)病與土壤中黃萎病菌微菌核數(shù)量之間的關(guān)系。隨著土壤中菌核數(shù)的增多，棉花黃萎病的發(fā)生程度加重。當(dāng)土壤中菌核數(shù)在０～９個(gè)／ｇ時(shí)，新陸早３５號(hào)表現(xiàn)為耐病，即病情指數(shù)在３５以下；當(dāng)土壤中菌核數(shù)大于９個(gè)／ｇ時(shí)，新陸早３５號(hào)表現(xiàn)為感病。結(jié)果表明新陸早３５號(hào)菌核含量致病的臨界點(diǎn)為９個(gè)／ｇ。

２．４主栽和新育棉花品種的抗病性

２０１０年在人工病圃種植了農(nóng)七師近幾年來(lái)的主栽品種、近年來(lái)審定的新品種、生產(chǎn)上抗性較好的品種以及我所近幾年培育的新品系共３７個(gè)（份），通過(guò)黃萎病抗性鑒定，表現(xiàn)耐病的品種（材料）為：８１－３、Ｇ－９５８、早３３、早３８、早４１、早４２、早４５、早４６、早４９、Ｋｆ２、６２０、Ｌ１、０８－１０６０。

２．５生物藥劑防治效果

利用可濕性粉劑萎菌凈進(jìn)行了防治棉花黃萎病效果試驗(yàn)，從棉花的長(zhǎng)勢(shì)來(lái)看，棉花的整個(gè)生育期拌種處理整齊度好，生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)。從棉花黃萎病的發(fā)生情況看，蕾期、花期藥劑拌種處理效果較好，到了鈴期、吐絮期，隨著棉花黃萎病發(fā)生高峰期的到來(lái)，藥劑拌種效果有所減弱。因此，該藥劑拌種對(duì)于苗期、蕾期的棉花黃萎病有一定的抑制作用。

３討論

本研究應(yīng)用改良的棉花黃萎病菌土壤選擇性培養(yǎng)基進(jìn)行抗性監(jiān)測(cè)具有成本低廉、不需要昂貴儀器設(shè)備等優(yōu)點(diǎn)，可在棉花黃萎病土壤帶菌量普查、病害危害風(fēng)險(xiǎn)及防治效果的監(jiān)測(cè)評(píng)估等方面直接應(yīng)用。但是建立土壤棉花黃萎病有效的定量檢測(cè)方法，受培養(yǎng)基、土壤接種量的影響，同時(shí)還可能受大田土壤采集方法、土壤制備方法以及計(jì)數(shù)方法等因素的影響，這些方面還值得深入探討。

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