毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定角鯊烯軟膠囊中角鯊烯含量

宗萬(wàn)里，曲淑霞，魯 剛

（威海市產(chǎn)品質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)所，山東 威海 264209）

角鯊烯又名鯊烯, 鯊萜, 是一種高度不飽和烴類化合物, 其系統(tǒng)命名為2, 6, 10, 15, 19, 23-六甲基- 2, 6,10, 14,18, 22-二十四碳六烯，分子式為C30H50，相對(duì)分子量為410.7。角鯊烯在常溫下為無(wú)色油狀液體， 通常以富含此組分的大鯊魚肝為原料進(jìn)行提取[1]。近年來(lái)，由于明確角鱉烯具有滲透、擴(kuò)散、殺菌作用，無(wú)論是日服或涂敷于皮膚上，都能攝取大量的氧，加強(qiáng)細(xì)胞新陳代謝，消除疲勞，從而已成為功能明確的活性成分，在功能性食品中應(yīng)用廣泛[2]。角鯊烯含量的分析方法有氣相色譜法[3-8]、液相色譜法[9]，氣相色譜-質(zhì)譜法[10-11]。其中氣相色譜法測(cè)定保健食品中角鯊烯含量所使用色譜柱多以填充柱為主。目前，隨著色譜技術(shù)的發(fā)展，填充柱已逐漸被毛細(xì)管柱所取代，并且填充柱的檢測(cè)靈敏度較低，本文以強(qiáng)極性毛細(xì)管氣相色譜法檢測(cè)保健食品中角鯊烯含量，靈敏度高，角鯊烯保留時(shí)間適中，是一種準(zhǔn)確、可靠、快速的分析方法。

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 主要儀器與試劑

氣相色譜儀：GC2010型，帶氫火焰檢測(cè)器，日本島津公司；分析天平：FC204型，精度為0.1mg，上海精密科學(xué)儀器有限公司；角鯊烯標(biāo)準(zhǔn)品：99.9%，0.5mL/支，中國(guó)藥品生物制品檢定所；毛細(xì)管色譜柱：AC20，SGE International Pty.Ltd；正己烷：分析純，天津市瑞金特化學(xué)品有限公司。

1.2 色譜參考條件

色譜柱：毛細(xì)管色譜柱SGE AC20(PEG20M，30m×0.53 mm×1μm)；載氣（氮?dú)猓┝魉贋?6mL/min，恒定流速控制；氫氣流速為60mL/min；空氣流速為400mL/min；WBI進(jìn)樣口溫度：250℃；柱溫：230℃； 檢測(cè)器溫度：250℃，尾吹40ml/mL。

1.3 溶液配制

1.3.1 標(biāo)準(zhǔn)貯備液的配制

精密稱取角鯊烯500mg，置于100 mL 容量瓶中，正己烷溶解至刻度,搖勻。得5000μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

分別精密量取0.5mL、1 mL、2 mL、4mL、8mL的標(biāo)準(zhǔn)貯備液至100mL容量瓶中，用正己烷稀釋至刻度，得25μg/mL、50μg /mL、100μg /mL、200μg /mL、400μg/mL的系列標(biāo)準(zhǔn)溶液。每個(gè)濃度取1μL直接注入氣相色譜儀進(jìn)行分析。

1.3.3 供試品溶液的配制（樣品前處理）

稱取膠囊內(nèi)容物20mg至100 mL容量瓶中，加入正己烷溶解并定容至刻度，搖勻，吸取1μL注進(jìn)氣相色譜儀進(jìn)行分析。同時(shí)以甘油原料為空白樣品進(jìn)行樣品空白分析。

2 結(jié)果與討論

2.1 色譜圖

在1.2色譜條件下，得到角鯊烯標(biāo)準(zhǔn)樣品、空白樣品、空白加標(biāo)樣品的色譜圖，如圖1～圖3所示，角鯊烯保留時(shí)間為6.5min左右。表明實(shí)驗(yàn)結(jié)果良好。

2.2 標(biāo)準(zhǔn)曲線和最低檢出限

在實(shí)驗(yàn)條件下，以峰面積y為縱坐標(biāo)、質(zhì)量濃度c/(μg/ml)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得線性方程，以基線噪聲3倍峰面積對(duì)應(yīng)的質(zhì)量濃度為檢出限(RSN=3)[12]，回歸方程、相關(guān)系數(shù)及檢出限見表1。

2.3 精密度和加標(biāo)回收試驗(yàn)

取甘油原料進(jìn)行加標(biāo)回收試驗(yàn)，向0.4g甘油中添加0.1g角鯊烯標(biāo)準(zhǔn)樣品，即得角鯊烯含量為20%的樣品。按上述提取步驟進(jìn)行提取，重復(fù)6次。按1.2色譜條件進(jìn)行測(cè)定，精密度和回收率計(jì)算結(jié)果列于表2，由表2數(shù)據(jù)可知，采用本方法角鯊烯的平均回收率為99.20%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為0.23%，滿足實(shí)驗(yàn)要求。

圖1 質(zhì)量濃度為200μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)樣品

圖2 樣品加標(biāo)

圖3 空白樣品

表1 回歸曲線的基本參數(shù)

表2 按照本方法樣品添加回收和精密度實(shí)驗(yàn)

3 結(jié)語(yǔ)

本實(shí)驗(yàn)采用毛細(xì)管氣相色譜法對(duì)角鯊烯軟膠囊中角鯊烯含量進(jìn)行測(cè)定，并進(jìn)行了方法學(xué)考察。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本方法出峰時(shí)間快，方法可行，結(jié)果準(zhǔn)確，可用來(lái)有效地控制角鯊烯軟膠囊質(zhì)量。該方法也為含角鯊烯成分的藥品及保健品質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)的建立提供參考。

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