非ST段抬高心肌梗死和不穩(wěn)定心絞痛患者血漿脂肪激素Chemerin水平及其影響因素研究

范書英，于長安，黎 娜，鄭金剛，彭文華，陳 莉，車 勇，趙 霞，趙桂茹，王 丹，王 勇

非ST段抬高性心肌梗死和不穩(wěn)定心絞痛 (non ST segment elevated myocardial infarction/unstable angina，NSTEMI/UA)是冠狀動(dòng)脈粥樣硬化性心臟病常見的急性臨床事件，嚴(yán)重威脅人類健康，病理基礎(chǔ)為冠狀動(dòng)脈粥樣硬化易損斑塊破裂出血并繼發(fā)血栓形成所致，盡管及時(shí)有效的再灌注治療策略取得了很大成功，但每年因NSTEMI/UA致死和致殘的患者仍不計(jì)其數(shù)，因此，進(jìn)一步明確NSTEMI/UA發(fā)病機(jī)制、尋找新的治療靶點(diǎn)對(duì)NSTEMI/UA的防治具有重要意義。Chemerin是2007年被確認(rèn)的一種新的脂肪細(xì)胞因子，由163個(gè)氨基酸組成，分子量18 kd，主要由脂肪細(xì)胞分泌，可通過自分泌或旁分泌途徑調(diào)節(jié)脂肪細(xì)胞的代謝，并有促炎作用。臨床研究發(fā)現(xiàn)，Chemerin與肥胖和代謝綜合征密切相關(guān)，其分泌失調(diào)被認(rèn)為是肥胖相關(guān)疾病包括高血壓、糖尿病和心血管疾病的主要致病因素之一［1－4］。但NSTEMI/UA患者血漿Chemerin變化并不清楚，因此，本研究重點(diǎn)探討NSTEMI/UA患者血漿Chemerin水平的變化及其影響因素。

1 資料與方法

1.1 病例入選和排除標(biāo)準(zhǔn) 入選標(biāo)準(zhǔn):年齡≥18歲，首次因胸痛入院擬診冠心病并有明確冠脈造影證據(jù)，且不符合排除標(biāo)準(zhǔn)的患者。排除標(biāo)準(zhǔn):心功能不全、瓣膜性心臟病、感染性疾病、惡性腫瘤、風(fēng)濕免疫性疾病、血液系統(tǒng)異常及肝、腎功能異常。

1.2 病例資料 選擇2010年11月—2011年3月首次因胸痛入院并行冠脈造影的患者共121例，均符合上述入選標(biāo)準(zhǔn)。依據(jù)臨床表現(xiàn)和冠脈造影結(jié)果分為3組:冠脈造影陰性的患者作為對(duì)照組 (n=44)、冠脈造影結(jié)果提示≥1支冠狀動(dòng)脈狹窄程度≥50%的患者作為冠心病組，其中符合慢性穩(wěn)定性心絞痛診斷標(biāo)準(zhǔn) (參見2007版中國慢性穩(wěn)定性心絞痛診斷與治療指南)的患者作為穩(wěn)定冠心病組 (n=40)，符合NSTEMI/UA診斷標(biāo)準(zhǔn) (參見2007版不穩(wěn)定性心絞痛和非ST段抬高心肌梗死診斷與治療指南)的患者作為NSTEMI/UA組 (n=37)。3組對(duì)象的年齡、性別、吸煙、高血壓病、糖尿病和高脂血癥病史、體質(zhì)指數(shù)、入院時(shí)收縮壓和舒張壓及心率間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (P＞0.05)，但NSTEMI/UA組心率較對(duì)照組明顯增快(p＜0.05，見表1)。

1.3 研究方法 所有入選病例行冠脈造影，由兩位經(jīng)驗(yàn)豐富的冠心病介入專家獨(dú)立對(duì)造影結(jié)果進(jìn)行評(píng)估。3組中擇期行冠脈造影的患者于入院后第1～2天晨空腹抽血，需急診行冠脈造影的患者于造影前抽血 (由于血漿Chemerin系脂肪激素，晨血漿水平最高，因此并不影響結(jié)果比較)。分離血漿和血清，于－70℃保存。血漿Chemerin水平測定采用酶聯(lián)免疫吸附法 (試劑盒購于 Millipore，Billerica，Ma)，空腹血糖、血脂、肝功能、腎功能等指標(biāo)由自動(dòng)生化分析測定，超敏C反應(yīng)蛋白 (hs－CRP)采用免疫比濁法測定。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 所有數(shù)據(jù)均采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。正態(tài)分布或輕度偏態(tài)分布的計(jì)量資料以 (x±s)表示，多組間兩兩比較采用方差分析和LSD檢驗(yàn)，以p＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;明顯偏態(tài)分布的計(jì)量資料以四分位表示，應(yīng)用Kruskal－Wallis H檢驗(yàn)，多組間兩兩比較以p＜0.017為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。計(jì)數(shù)資料以百分率表示，應(yīng)用χ2檢驗(yàn)。采用Pearson相關(guān)分析分析NSTEMI/UA患者血漿Chemerin水平與其他危險(xiǎn)因素之間的關(guān)系，以p＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組血漿Chemerin與其他生化指標(biāo)水平比較 與對(duì)照組和穩(wěn)定冠心病組比較，NSTEMI/UA組血漿Chemerin水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05)。與對(duì)照組比較，NSTEMI/UA組空腹血糖、肌酐、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、hs－CRP和纖維蛋白原水平明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05)，NSTEMI/UA組空腹血糖、肌酐水平較穩(wěn)定冠心病明顯升高，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義 (p＜0.05，見表2)。

2.2 NSTEMI/UA組患者血漿chemerin與其他生化指標(biāo)的相關(guān)性分析 對(duì)本研究37例NSTEMI/UA患者進(jìn)行Pearson相關(guān)分析顯示，血漿Chemerin水平與白細(xì)胞總數(shù)、中性粒細(xì)胞數(shù)和hs－CRP呈正相關(guān) (r值分別為0.583、0.610、0.608，p＜0.001);與纖維蛋白原呈正相關(guān) (r=0.553，p＜0.001);與空腹血糖和肌酐呈正相關(guān) (r值分別為0.558和0.674，p＜0.001);與入院時(shí)心率呈正相關(guān) (r=0.605，p＜0.001);與其他危險(xiǎn)因素不相關(guān) (見表3)。

表1 3組患者一般臨床資料比較Table 1 Generally clinical datas in NSTEMI/UA patients，stable coronary heart disease patients and controls

表2 3組血漿Chemerin、代謝指標(biāo)、炎癥指標(biāo)和凝血指標(biāo)比較Table 2 The comparison of plasma Chemerin，metabolic indices，inflammation index and blood coagulation index of three groups

表3 NSTEMI/UA組患者血漿chemerin與其他生化指標(biāo)的相關(guān)性分析Table 3 Pearson analysis between plasma chemerin and various parameters for patients with NSTEMI/UA

3 討論

Chemerin是2007年發(fā)現(xiàn)的一種新的脂肪細(xì)胞因子，與能量代謝和炎癥反應(yīng)密切相關(guān)［5－6］。Lehrke 等［7］對(duì)疑似冠心病患者進(jìn)行的研究發(fā)現(xiàn)，血漿Chemerin與傳統(tǒng)心血管病風(fēng)險(xiǎn)因素體質(zhì)指數(shù)、低高密度脂蛋白膽固醇血癥、高三酰甘油血癥和血壓等成正相關(guān)，并與炎癥指標(biāo) hs－CRP、腫瘤壞死因子(TNF)－a、IL－6、脂聯(lián)素和抵抗素等密切相關(guān)。本研究前期發(fā)現(xiàn)，冠心病患者血漿Chemerin水平明顯升高，并與冠狀動(dòng)脈病變支數(shù)呈正相關(guān)［8］，但其是否與冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊的穩(wěn)定性有關(guān)并不清楚，因此進(jìn)行了本研究。

本研究中，與對(duì)照組比較，穩(wěn)定冠心病患者血漿Chemerin水平并無升高;而與對(duì)照組和穩(wěn)定冠心病患者相比，NSTEMI/UA患者血漿Chemerin水平明顯升高，提示NSTEMI/UA患者存在Chemerin分泌異常。眾所周知，NSTEMI/UA是一種高致死性和致殘性疾病，其發(fā)生機(jī)制為在冠狀動(dòng)脈粥樣硬化基礎(chǔ)上發(fā)生了斑塊不穩(wěn)定、破裂出血及繼發(fā)激活血小板和凝血纖溶系統(tǒng)，導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈內(nèi)血栓形成阻塞血流所致。因此，NSTEMI/UA患者血漿Chemerin升高可能是造成斑塊不穩(wěn)定及繼發(fā)破裂出血和血栓形成的原因之一。2010年，Spiroglou等［9］應(yīng)用免疫組化的研究發(fā)現(xiàn)在猝死的NSTEMI/UA患者冠狀動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊中的泡沫細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞中存在Chemerin的高表達(dá)，因此認(rèn)為Chemerin可能是致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化不穩(wěn)定斑塊的炎癥因子之一，可能通過自分泌或旁分泌途徑影響冠狀動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生和發(fā)展。

Chemerin導(dǎo)致冠狀動(dòng)脈粥樣硬化斑塊不穩(wěn)定的機(jī)制主要與其引發(fā)的炎癥反應(yīng)有關(guān)。Chemerin是趨化巨噬細(xì)胞和樹突狀淋巴細(xì)胞的趨化因子，可趨化巨噬細(xì)胞向炎癥部位黏附、聚集、促進(jìn)巨噬細(xì)胞向泡沫細(xì)胞轉(zhuǎn)變以及釋放多種炎性遞質(zhì)如TNF－a、IL－6等［10－11］。已知巨噬細(xì)胞是動(dòng)脈粥樣硬化的主要炎性細(xì)胞，其黏附、聚集、轉(zhuǎn)變成泡沫細(xì)胞及釋放炎性遞質(zhì)在斑塊發(fā)生、發(fā)展、破裂出血及血栓形成所有階段均扮演重要角色，因此Chemerin導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定的機(jī)制之一可能與其引發(fā)的“巨噬細(xì)胞炎”有關(guān)。此外，Chemerin與內(nèi)皮細(xì)胞膜上的CMKL1受體結(jié)合后，可誘導(dǎo)內(nèi)皮細(xì)胞增殖和新生血管叢形成［12］。由于新生血管叢脆性大，容易破裂出血，因而容易導(dǎo)致斑塊進(jìn)展，形成不穩(wěn)定斑塊，并可能觸發(fā)臨床事件。因此，Chemerin導(dǎo)致斑塊不穩(wěn)定的機(jī)制還可能與其促進(jìn)新生血管形成有關(guān)。筆者正在進(jìn)行相關(guān)的基礎(chǔ)研究以進(jìn)一步明確Chemerin作用機(jī)制。

對(duì)NSTEMI/UA患者進(jìn)行的Pearson相關(guān)分析發(fā)現(xiàn)血漿Chemerin水平與心率、收縮壓、空腹血糖、肌酐、白細(xì)胞、中性粒細(xì)胞升高和纖維蛋白原有一定關(guān)系，提示其升高原因可能與交感神經(jīng)激活、能量代謝紊亂、腎功能損傷、炎癥反應(yīng)和凝血激活有關(guān)，但升高的具體機(jī)制目前并不清楚。

近年研究發(fā)現(xiàn)，凝血纖溶系統(tǒng)和炎癥級(jí)聯(lián)反應(yīng)中的絲氨酸蛋白酶包括凝血因子Ⅻa、Ⅶa、纖溶酶、尿激酶纖維蛋白溶酶原激活物 (t－PA)、彈性蛋白酶、組織蛋白酶等均可激活Chemerin，增加其活性，活化的Chemerin可與血小板因子4、血清素和5－羥色胺等共同參與局部血栓形成，因此，Chemerin被認(rèn)為是獲得性免疫反應(yīng)和局部血栓形成的橋梁［13－14］。本研究中 NSTEMI/UA患者血漿 Chemerin水平與纖維蛋白原密切相關(guān)，提示Chemerin還可能通過與凝血纖溶系統(tǒng)之間的相互作用參與了斑塊破裂后的血栓形成過程。

此外，本研究中，除了血漿chemerin分泌異常外，NSTEMI/UA患者還存在血糖血脂代謝異常、腎功能損傷和急性炎癥反應(yīng)，與既往研究結(jié)果一致，因此本文不做重點(diǎn)分析。

綜上，NSTEMI/UA患者血漿Chemerin水平明顯升高，提示Chemerin在NSTEMI/UA發(fā)病過程中具有重要作用，可能是新的致NSTEMI/UA的炎癥因子之一;其升高原因可能與交感神經(jīng)激活、炎癥反應(yīng)、血糖代謝、腎功能損傷和凝血纖溶系統(tǒng)激活有一定關(guān)系。

1 Bozaoglu K，Bolton K，McMillan J，et al.Chemerin is a novel adipokine associated with obesity and metabolic syndrome［J］.Endocrinology，2007，148(10):4687 －4694.

2 Ernst MC，Sinal CJ.Chemerin:at the crossroads of inflammation and obesity［J］.Trends Endocrinol Metab，2010，21(11):660－667.

3 Wang Z，Nakayama T.Inflammation，a link between obesity and cardiovascular disease［J］.Mediators Inflamm，2010，2010:535 －918.

4 Bozaoglu K，Segal D，Shields KA，et al.Chemerin is associated with metabolic syndrome phenotypes in a Mexican－American population［J］.JClin Endocrinol Metab，2009，94(8):3085 －3088.

5 Goralski KB，Sinal CJ.Elucidation of chemerin and chemokine－like receptor－1 function in adipocytes by adenoviral－mediated shRNA knockdown of gene expression ［J］.Methods Enzymol，2009，460:289－312.

6 Gualillo O，González－Juanatey JR，Lago F.The emerging role of adipokines as mediators of cardiovascular function:physiologic and clinical perspectives［J］.Trends Cardiovasc Med，2007，17(8):275 －283.

7 Lehrke M，Becker A，Greif M，et al.Chemerin is associated with markers of inflammation and components of the metabolic syndrome but does not predict coronary atherosclerosis ［J］.Eur J Endocrinol，2009，161(2):339－344.

8 范書英，黎娜，于長安，等.冠心病患者血漿Chemerin水平的變化及其影響因素［J］.臨床心血管病雜志，2012，28(1):31－33.

9 Spiroglou SG，Kostopoulos CG，Varakis JN，et al.Adipokines in periaortic and epicardial adipose tissue:differential expression and relation to atherosclerosis［J］.J Atheroscler Thromb，2010，17(2):115 －130.

10 Parlee SD，Ernst MC，Muruganandan S，et al.Serum chemerin levels vary with time of day and are modified by obesity and tumor necrosis factor－ α ［J］.Endocrinology，2010，151(6):2590－2602.

11 Hart R，Greaves DR.Chemerin contributes to inflammation by promoting macrophage adhesion to VCAM－1 and fibronectin through clustering of VLA －4 and VLA －5 ［J］.J Immunol，2010，185(6):3728－339.

12 Bozaoglu K，Curran JE，Stocker CJ，et al.Chemerin，a novel adipokine in the regulation of angiogenesis［J］.J Clin Endocrinol Metab，2010，95(5):2476－2485.

13 Du XY，Zabel BA，Myles T，et al.Regulation of chemerin bioactivity by plasma carboxypeptidase N，carboxypeptidase B (activated thrombin－activable fibrinolysis inhibitor)，and platelets［J］.J Biol Chem，2009，284(2):751－758.

14 Qu Z，Chaikof EL.Interface between hemostasis and adaptive immunity［J］.Current Opinion in Immunology，2010，22:634 －642.