標(biāo)本狀態(tài)對(duì)血液檢驗(yàn)結(jié)果的影響

秦建軍

（上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院，上海 021500）

標(biāo)本狀態(tài)對(duì)血液檢驗(yàn)結(jié)果的影響

秦建軍

（上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院崇明分院，上海 021500）

目前臨床上已經(jīng)把血液檢驗(yàn)作為診斷和反映疾病治療效果的一種重要手段，其結(jié)果是診斷疾病、鑒別診斷、臨床用藥觀察的重要依據(jù)。在實(shí)際工作中，血液臨床檢驗(yàn)質(zhì)量控制始終貫穿于分析前、分析中和分析后等環(huán)節(jié)［1］。嚴(yán)格控制標(biāo)本質(zhì)量、減少相關(guān)因素的干擾，才能得到高質(zhì)量的檢驗(yàn)結(jié)果，否則，再好的儀器也得不到臨床準(zhǔn)確、可靠的依據(jù)，從而影響疾病判斷，造成不良結(jié)果。為此，作者經(jīng)過多年的工作經(jīng)驗(yàn)，參考相關(guān)文獻(xiàn)，對(duì)影響血液檢驗(yàn)的標(biāo)本狀態(tài)因素（溶血、黃疸和脂血）進(jìn)行分析，以供探討。

1 溶血標(biāo)本

溶血是臨床檢驗(yàn)中最常見的一種影響因素，它能引起很多指標(biāo)明顯異常。引起標(biāo)本溶血的原因有很多:真空管質(zhì)量不合格，負(fù)壓過大，血液流出過快，產(chǎn)生氣泡［2］;注射器或容器內(nèi)不干凈;抽血時(shí)使用的針頭過小、抽血用力過大、較長(zhǎng)時(shí)間用止血帶、產(chǎn)生過多的泡沫;抽血后未取下針頭直接將血液注入容器內(nèi)、混勻抗凝劑時(shí)用力過大等，有研究者主張抽血時(shí)不扎止血帶，因扎帶可造成局部淤血、缺氧、水腫、溶血等而影響檢驗(yàn)結(jié)果，若確需扎帶，也不宜過緊，且不能超過1 min。溶血的干擾機(jī)制有以下三種。

1.1 血細(xì)胞中高濃度成分逸出，使測(cè)定結(jié)果增高，血細(xì)胞內(nèi)濃度比血漿中濃度明顯高的物質(zhì)有LDH、ACP、AST、K+，只要輕微溶血就可以對(duì)這些項(xiàng)目產(chǎn)生很大影響。另外若某些物質(zhì)的血細(xì)胞內(nèi)濃度低于血清濃度時(shí)，則溶血相當(dāng)于血清被稀釋，重度溶血時(shí)使這些血清成分的檢測(cè)值降低，這類項(xiàng)目主要有Ca2+、Na+、Cl－、UA等。

1.2 血細(xì)胞成分進(jìn)入血清中后因化學(xué)反應(yīng)而引起其它物質(zhì)的濃度改變，如溶血后紅細(xì)胞的磷脂進(jìn)入血清，被血清中的磷酸酯酶水解，其結(jié)果造成血清無(wú)機(jī)磷濃度顯著增高。

1.3 血紅蛋白本身顏色對(duì)檢測(cè)的光學(xué)干擾，血紅蛋白的顏色在431 nm和555 nm波長(zhǎng)附近能使比色、比濁法的吸光度增高，如溶血引起重氮單試劑法膽紅素測(cè)定結(jié)果明顯升高。

實(shí)際上，以上三類干擾在溶血標(biāo)本中同時(shí)存在并可相互作用，因而使受影響的檢測(cè)項(xiàng)目更為復(fù)雜，因此，嚴(yán)格控制標(biāo)本溶血是保證檢驗(yàn)質(zhì)量的重要方面。一般標(biāo)本溶血時(shí)，對(duì)RBC計(jì)數(shù)、紅細(xì)胞比容、血紅蛋白測(cè)定、WBC計(jì)數(shù)、嗜酸性粒細(xì)胞計(jì)數(shù)等有影響，使紅細(xì)胞計(jì)數(shù)降低，溶血越嚴(yán)重，RBC計(jì)數(shù)降低越大。標(biāo)本溶血對(duì)WBC分類有影響，使中性粒細(xì)胞比例明顯降低，淋巴細(xì)胞比例明顯升高，而對(duì)WBC計(jì)數(shù)無(wú)影響。標(biāo)本溶血常常使血小板計(jì)數(shù)升高，其原因是電阻抗法將紅細(xì)胞碎片誤認(rèn)為血小板。實(shí)際工作中應(yīng)避免標(biāo)本溶血，發(fā)現(xiàn)異常分類結(jié)果，應(yīng)通過手工分類法進(jìn)行復(fù)核或重新采取標(biāo)本，因此手工分類法仍為WBC分類的參考方法。標(biāo)本溶血時(shí)，紅細(xì)胞中含量高的成分大量進(jìn)入血清。文獻(xiàn)報(bào)道溶血對(duì)多種成分有影響［3］。標(biāo)本溶血時(shí)如AST、LDH、K+等升高，主要是由于紅細(xì)胞內(nèi)含有大量這些物質(zhì)而引起。有的降低如P、ALP、GGT等，主要是血紅蛋白干擾了這些物質(zhì)的測(cè)定反應(yīng)。因此這類標(biāo)本在審核時(shí)應(yīng)注明標(biāo)本性質(zhì)，嚴(yán)重溶血時(shí)最好是重新采集標(biāo)本。

2 黃疸標(biāo)本

膽紅素對(duì)反應(yīng)結(jié)果產(chǎn)生黃色化合物的比色分析影響很大，一般可以用樣本空白或兩點(diǎn)比色法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法來(lái)消除膽紅素對(duì)黃色結(jié)果的影響，但由于膽紅素不穩(wěn)定，隨著膽紅素被氧化為膽綠素、膽褐素而變色，此時(shí)如果使用兩點(diǎn)法、連續(xù)監(jiān)測(cè)法同樣也不能排除膽紅素對(duì)結(jié)果的干擾。此外，膽紅素作為一種還原劑對(duì)氧化反應(yīng)有干擾，如氧化酶法測(cè)定Glu、三酰甘油（TG）、UA、膽固醇等，因?yàn)槟懠t素可以與上述過程中H2O2分解產(chǎn)生的新生態(tài)氧發(fā)生反應(yīng)，從而使新生態(tài)氧與氧化酶法反應(yīng)中的色源物質(zhì)結(jié)合減少，導(dǎo)致結(jié)果偏低。此時(shí)也可用雙波長(zhǎng)法或設(shè)計(jì)樣本空白消除干擾，亦或當(dāng)外觀檢查發(fā)現(xiàn)是黃疸血清時(shí)可先除蛋白，然后加膽紅素氧化酶預(yù)先將膽紅素氧化成較穩(wěn)定的氧化產(chǎn)物膽褐素，可大大減低甚至消除膽紅素的干擾。對(duì)于黃疸血清標(biāo)本，可導(dǎo)致血磷、高密度脂蛋白結(jié)果明顯偏低［4］，主要原因是黃疸可干擾這些物質(zhì)的測(cè)定反應(yīng)。因此遇到這類血清標(biāo)本應(yīng)在審核時(shí)注明標(biāo)本性質(zhì)。

3 脂血標(biāo)本

在生化檢測(cè)時(shí)，如果遇到直接膽紅素較高，總膽紅素或低密度脂蛋白呈負(fù)值時(shí)，應(yīng)查看標(biāo)本是否是脂血。高脂血癥患者檢測(cè)時(shí)，血紅蛋白測(cè)定和血小板計(jì)數(shù)增高。乳糜血中的乳糜成分主要為CM和VLDL，TG含量達(dá)60%以上，甚至高達(dá)90%，故采用TG濃度來(lái)表示。TG對(duì)Hb的測(cè)定也存在正干擾，當(dāng)TG≥7.0 mmol/L時(shí)，Hb明顯增高，二者之間呈較強(qiáng)的直線相關(guān)性。因?yàn)檠t蛋白是通過光電比色法測(cè)定，乳糜血標(biāo)本使透光度降低，吸光度增加，從而使血紅蛋白的測(cè)定結(jié)果假性增高，相似的實(shí)驗(yàn)結(jié)果也有報(bào)道。在去乳糜后得到準(zhǔn)確的血紅蛋白濃度。血液脂濁可散射光線，所以對(duì)吸光度一般產(chǎn)生正向干擾，導(dǎo)致某些項(xiàng)目如ALB、UA、總蛋白（TP）等測(cè)定結(jié)果偏高，此時(shí)即使使用兩點(diǎn)法或連續(xù)監(jiān)測(cè)法不能排除脂血干擾。而在pH為10以上的環(huán)境中，乳糜中的TG會(huì)皂化，可使血清逐漸變清，使許多比色法測(cè)定如Ca2+、Cr、ALP、TP等結(jié)果產(chǎn)生負(fù)誤差，此時(shí)可以用雙波長(zhǎng)法或設(shè)計(jì)樣本空白消除干擾。在某些實(shí)驗(yàn)室用乙醚處理脂血以消除脂濁對(duì)生化檢驗(yàn)結(jié)果的影響，但是乙醚處理的脂濁標(biāo)本雖然可以排除脂濁對(duì)ALT、AST、TP等指標(biāo)的干擾，但是不能排除對(duì)ALB、GGT、LDH、尿素氮（BUN）、Glu、Ca2+等指標(biāo)的干擾。因此遇到這類血清標(biāo)本應(yīng)在審核時(shí)注明標(biāo)本性質(zhì)。

［1］叢玉隆，鄧新立.醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)室全面質(zhì)量管理體系的概念與建立［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，2001，19（5）:305－309.

［2］張小潔，劉建芝.真空采血標(biāo)本溶血原因分析及預(yù)防措施［J］.護(hù)士進(jìn)修雜志，2001，16（3）:180.

［3］沈伽第.溶血對(duì)臨床生物化學(xué)檢驗(yàn)的干擾和影響［J］.中華醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1994，17（4）:250－253.

［4］劉素蘭，梁華.膽紅素對(duì)磷烏酸鎂沉淀HDL－C的影響及消除方法探討［J］.川北醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，1999，14（1）:88－89.

R446.11

B學(xué)科分類代碼32011

1001－8131（2012）04－0295－01

2012－04－01