生化分析儀不同標(biāo)本用量與精密度的關(guān)系

邢文娟

（天津市寶坻區(qū)寶坻中醫(yī)醫(yī)院，天津 301800）

生化分析儀不同標(biāo)本用量與精密度的關(guān)系

邢文娟

（天津市寶坻區(qū)寶坻中醫(yī)醫(yī)院，天津 301800）

目的 評(píng)價(jià)生化分析儀不同標(biāo)本用量與精密度的關(guān)系。方法隨機(jī)收集7份不同乳酸脫氫酶（LDH）濃度新鮮血清標(biāo)本，用日立7600－020全自動(dòng)生化分析儀，對(duì)標(biāo)本分別按常規(guī)測(cè)定參數(shù)和相應(yīng)參數(shù)按比例增加后兩種方式進(jìn)行LDH測(cè)定，每次每個(gè)標(biāo)本重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算出均值（X）、標(biāo)準(zhǔn)差（S）和變異系數(shù)（CV%）。結(jié)果各標(biāo)本LDH測(cè)定均值在參數(shù)調(diào)整后均比調(diào)整前略有升高;CV%值在參數(shù)調(diào)整后均比調(diào)整前減低。結(jié)論適當(dāng)按比例加大標(biāo)本和試劑用量，可減低測(cè)量不精密度。

生化分析儀;參數(shù);乳酸脫氫酶;變異系數(shù)

在實(shí)際工作中，發(fā)現(xiàn)自動(dòng)生化分析儀上測(cè)量不精密度常因?yàn)樗?biāo)本量偏小而較大的現(xiàn)象。為探討標(biāo)本用量對(duì)測(cè)定結(jié)果精密度的影響，我們以乳酸脫氫酶（LDH）為例，按比例適當(dāng)加大標(biāo)本和試劑用量，測(cè)試其參數(shù)調(diào)整前后的酶活性濃度，揭示標(biāo)本量大小與精密度的關(guān)系，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實(shí)驗(yàn)儀器:日立（Hitachi）7600－020全自動(dòng)生化分析儀。上海復(fù)星長(zhǎng)征公司生產(chǎn)試劑，批號(hào):D100533。質(zhì)控物質(zhì):Beckman公司，質(zhì)控血清批號(hào):M603192（低值）、M603193 （高值）。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)樣本:隨機(jī)收集7份不同LDH濃度的本院門(mén)診及住院病人新鮮血清標(biāo)本（其濃度范圍盡可能覆蓋該項(xiàng)目的可報(bào)告范圍）。

1.2 方法

按照操作規(guī)程，實(shí)驗(yàn)前對(duì)儀器進(jìn)行常規(guī)維護(hù)與保養(yǎng)，并按常規(guī)方法對(duì)儀器用c.f.a.s進(jìn)行校準(zhǔn)，然后測(cè)定質(zhì)控物，室內(nèi)質(zhì)控結(jié)果在控時(shí)才進(jìn)行樣本測(cè)定。

1.2.1 將LDH測(cè)定參數(shù)設(shè)為:樣本量4 uL，試劑Ⅰ160 uL，試劑Ⅱ40uL。以此參數(shù)對(duì)每份標(biāo)本重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算出均值（X）、標(biāo)準(zhǔn)差（S）和變異系數(shù)（CV%）。

1.2.2 將LDH測(cè)定參數(shù)調(diào)整為:樣本量6 uL，試劑Ⅰ240 uL，試劑Ⅱ60uL。以此新參數(shù)對(duì)每份標(biāo)本重復(fù)測(cè)定20次，計(jì)算出均值（X）、標(biāo)準(zhǔn)差（S）和變異系數(shù)（CV%）。

為了減少測(cè)量不精密度對(duì)結(jié)果的影響，參數(shù)調(diào)整前后的兩次測(cè)定均在一個(gè)批次實(shí)驗(yàn)中完成。

2 結(jié)果

所有檢測(cè)數(shù)據(jù)均未出現(xiàn)離群點(diǎn)。參數(shù)調(diào)整前后的實(shí)驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表1，從表中可以發(fā)現(xiàn)，參數(shù)調(diào)整后的測(cè)定基本上不影響原有的測(cè)定結(jié)果，但各樣本的CV%值均比調(diào)整前明顯降低。

表1 測(cè)定參數(shù)調(diào)整前后LDH測(cè)定結(jié)果（X，CV%）

3 討論

精密度是表示測(cè)定結(jié)果中隨機(jī)誤差大小程度的指標(biāo)，也是指同一樣本在一定條件下多次重復(fù)測(cè)定得到的一系列單次測(cè)定值之間的接近程度。精密度評(píng)價(jià)實(shí)驗(yàn)是評(píng)價(jià)獨(dú)立實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的單個(gè)儀器所用的方法以及儀器精度的實(shí)驗(yàn)。全自動(dòng)生化分析儀雖然穩(wěn)定性好，但在測(cè)量過(guò)程中也難免受各種因素的干擾，王時(shí)南發(fā)現(xiàn)，在生化分析儀上用終點(diǎn)發(fā)測(cè)定時(shí)，適當(dāng)縮小R/S，在一定程度上可提高測(cè)定結(jié)果的精密度［1］。我們?cè)诠ぷ髦邪l(fā)現(xiàn)，有些測(cè)定項(xiàng)目由于標(biāo)本用量少而影響精密度的問(wèn)題，針對(duì)此問(wèn)題設(shè)計(jì)了本實(shí)驗(yàn)，探討適當(dāng)修改儀器參數(shù)（標(biāo)本量和試劑量）能否改進(jìn)測(cè)量的精密度。

自動(dòng)生物化學(xué)分析儀的參數(shù)就是儀器工作的指令，操作者通過(guò)設(shè)置正確的參數(shù)控制儀器完成一系列復(fù)雜而有序的操作程序。指揮儀器工作的參數(shù)很多，有些參數(shù)是在生產(chǎn)制造中設(shè)置好的，如機(jī)械操作、計(jì)算機(jī)軟件等，只需選擇就可進(jìn)行工作。操作者需進(jìn)行的參數(shù)設(shè)置是指進(jìn)行某個(gè)測(cè)試項(xiàng)目時(shí)的具體操作指令，主要包括樣品量、試劑量、測(cè)定方法、校正方法、反應(yīng)時(shí)間、測(cè)定波長(zhǎng)和控制因素等。樣品與試劑量的確定一般按照試劑說(shuō)明書(shū)上的比例，并結(jié)合儀器的特性進(jìn)行設(shè)置［2］。只有參數(shù)設(shè)置合理，結(jié)果才能真實(shí)可靠［3］。本實(shí)驗(yàn)在原有測(cè)定參數(shù)的基礎(chǔ)上，根據(jù)儀器的特性，在保證稀釋倍數(shù)不變的情況下，在樣品和試劑的最小加樣量范圍內(nèi)適當(dāng)按比例增加樣本量和試劑量，結(jié)果證明，按照調(diào)整后的參數(shù)測(cè)定基本上不影響原有的測(cè)定結(jié)果，而各樣本CV%值均有不同程度減低，說(shuō)明適當(dāng)增加樣本量可改進(jìn)測(cè)定的精密度，減少實(shí)驗(yàn)誤差。

因?yàn)橥辉囼?yàn)應(yīng)用不同廠家的試劑，如果不分別作最佳條件測(cè)試，其結(jié)果會(huì)差異很大。對(duì)同一患者來(lái)說(shuō)，不同廠家的試劑使用同一參數(shù)，甚至同一廠家不同批號(hào)試劑對(duì)酶等實(shí)驗(yàn)都可能得到明顯差異的結(jié)果［4］。因此在本實(shí)驗(yàn)中，我們注意到此問(wèn)題，應(yīng)用的是同一廠家同一批號(hào)的試劑，這樣就避免了批間誤差，減少了其他因素對(duì)本實(shí)驗(yàn)的干擾，從而保證了測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性。

從本實(shí)驗(yàn)可以看出，在稀釋倍數(shù)不變的基礎(chǔ)上，適當(dāng)增加標(biāo)本和試劑用量，可有效改進(jìn)測(cè)定的精密度。

［1］王時(shí)南.4種分析參數(shù)測(cè)定血清總蛋白精密度的評(píng)價(jià)［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2007，16（1）:100－101.

［2］周新，涂植光.臨床生物化學(xué)和生物化學(xué)檢驗(yàn)［M］.3版.人民衛(wèi)生出版社.2004:510.

［3］石寅皓.全自動(dòng)生化分析儀限額參數(shù)的設(shè)置［J］.臨床檢驗(yàn)雜志，1998，16（2）:95.

［4］朱勇.七種酶的不同批號(hào)試劑對(duì)血清標(biāo)本測(cè)定結(jié)果的比較［J］.陜西醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)雜志，1998，13（3）:5.

R392－33

B學(xué)科分類(lèi)代碼31099

1001－8131（2012）04－0287－01

2012－03－27