仙丹升血顆粒的制備及質(zhì)量控制

潘良平，李 林，龍 鳳，曾友志，彭賢東，張 燕

(四川省南充市中心醫(yī)院，四川 南充 637000)

仙丹升血顆粒是根據(jù)本院臨床經(jīng)驗(yàn)方新研制的醫(yī)院制劑，由仙鶴草、牡丹皮、墨旱蓮等藥材組成，具有滋陰養(yǎng)血、清熱涼血的功效，用于治療陰虛血熱所致的出血及血小板減少癥見上述證候者?，F(xiàn)將其制備及質(zhì)量控制方法報(bào)道如下。

1 儀器與試藥

BP211D型分析天平(德國(guó)賽多利斯股份公司)；硅膠G(青島海洋化工廠)。三七皂苷R1對(duì)照品(批號(hào)為110745－200415)，梔子苷對(duì)照品(批號(hào)為110749－200714)，虎杖對(duì)照藥材(批號(hào)為111575－201002)，均由中國(guó)藥品生物制品檢定所提供；仙丹升血顆粒(批號(hào)分別為100901，100902，100903)，由本院制劑室提供；輔料為藥用級(jí)，水為重蒸餾水，試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 處方與制備

仙鶴草480g，牡丹皮480g，梔子240g，黃芪320g，當(dāng)歸160g，地黃320g，墨旱蓮480g，虎杖480g，加10倍量的水浸泡2 h后，煎煮1.5 h，再加6倍量的水煎煮2次，每次各1 h，合并煎液，濾過(guò)，濾液濃縮至相對(duì)密度1.20～1.24(80℃)的清膏，加入乙醇使含醇量達(dá)60%，充分?jǐn)嚢?，靜置24 h，分取上清液，濾過(guò)，濾液回收乙醇至無(wú)醇味，濃縮成相對(duì)密度1.30～1.32(60℃)的稠膏，加入三七(微粉)、蔗糖，制成顆粒，干燥，制成1 000g，即得。

2.1 質(zhì)量控制

2.2.1 性狀

本品為黃色至黃棕色顆粒；氣香，味甜，味微苦。

2.2.2 薄層色譜鑒別

三七：取本品細(xì)粉15g，加甲醇50mL，回流30min，濾過(guò)，濾液蒸干，用水20mL分次轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，再用水飽和的正丁醇提取2次，每次20mL，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。同法制成缺三七的陰性對(duì)照品溶液。另取三七皂苷R1對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以氯仿－甲醇－水(13∶7∶2)的下層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃烘至斑點(diǎn)顯色清晰，置紫外365 nm下檢視。結(jié)果供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)，陰性對(duì)照品溶液色譜則無(wú)此斑點(diǎn)。見圖1。

梔子：取本品細(xì)粉15g，加甲醇50mL，回流30min，濾過(guò)，濾液蒸干，用水20mL分次轉(zhuǎn)移至分液漏斗中，再用水飽和的正丁醇提取2次，每次20mL，合并正丁醇液，蒸干，殘?jiān)蛹状?mL使溶解，作為供試品溶液。同法制成缺梔子的陰性對(duì)照品溶液。另取梔子苷對(duì)照品，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯－甲酸－冰醋酸－水(10∶0.5∶0.5∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，噴以香草醛硫酸試液，110℃加熱至斑點(diǎn)清晰。結(jié)果供試品溶液色譜中，在與對(duì)照品溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照品溶液色譜則無(wú)此斑點(diǎn)。見圖2。

虎杖：取本品細(xì)粉10g，用三氯甲烷提取2次，每次20mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?mL使溶解，作為供試品溶液。同法制備缺虎杖的陰性對(duì)照品溶液。另取虎杖對(duì)照藥材2g，加甲醇30 mL，超聲15min，濾過(guò)，蒸干，殘?jiān)铀?0mL使溶解，用三氯甲烷提取2次，每次20mL，合并三氯甲烷液，蒸干，殘?jiān)尤燃淄?mL使溶解，制成對(duì)照藥材溶液。照薄層色譜法[1]試驗(yàn)，吸取上述3種溶液各10μL，分別點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以石油醚(30～60℃)－甲酸乙酯－甲酸(15∶1∶1)的上層溶液為展開劑，展開，取出，晾干，置氨蒸氣中熏至斑點(diǎn)清晰。結(jié)果供試品溶液色譜中，在與對(duì)照藥材溶液色譜相應(yīng)位置上顯相同顏色的斑點(diǎn)，陰性對(duì)照品溶液色譜則無(wú)此斑點(diǎn)。見圖3。

圖1 三七薄層色譜圖 圖2 梔子薄層色譜圖 圖3 虎杖薄層色譜圖

2.2.3 檢查

粒度、水分、裝量差異、溶化性、微生物限度檢查均符合顆粒劑有關(guān)規(guī)定。

2.2.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

加速試驗(yàn)：試制仙丹升血顆粒經(jīng)過(guò)6個(gè)月加速試驗(yàn)后，各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化。對(duì)比影響因素試驗(yàn)，各影響因素對(duì)試制仙丹升血顆粒并沒(méi)有顯著的綜合作用。說(shuō)明試制仙丹升血顆粒較穩(wěn)定，推測(cè)有效期為12個(gè)月。

長(zhǎng)期試驗(yàn)：試制仙丹升血顆粒，經(jīng)12個(gè)月的室溫留樣，各項(xiàng)指標(biāo)均無(wú)明顯變化，符合顆粒劑的相關(guān)要求。

2.2.5 乙醇浸出物

根據(jù)本品工藝，本品藥材的有效部分大部分為醇溶性，因此采用乙醇為溶劑，測(cè)定其浸出物的量來(lái)控制產(chǎn)品質(zhì)量。按照文獻(xiàn)[1]浸出物測(cè)定法進(jìn)行檢測(cè)。取本品細(xì)粉5g，精密稱定，置100mL錐形瓶中，精密加入70%乙醇50mL，密閉，稱定質(zhì)量，靜置1 h后，回流1 h，冷卻，密塞，稱定質(zhì)量，用70%乙醇補(bǔ)足減失的質(zhì)量，搖勻，用干燥濾器濾過(guò)，精密量取濾液25mL，置已干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，蒸干，105℃烘3 h，精密稱定，計(jì)算，乙醇浸出物大于7.0%。結(jié)果3批中試樣品批號(hào)分別為100901，100902，100903乙醇浸出物分別為8.4%，9.8%，7.9%，檢查結(jié)果均符合規(guī)定。

3 討論

三七為貴重藥材，三七中含有人參皂苷Rb1、人參皂苷Rg1及三七皂苷R1。參照文獻(xiàn)[1]中三七的鑒別方法，選用三七皂苷R1為對(duì)照品，分別用以氯仿－甲醇－水(13∶7∶2)的下層溶液、三氯甲烷－乙酸乙酯－甲醇－甲酸(10∶5∶2∶0.2)為展開劑，結(jié)果均檢出了三七皂苷R1，陰性無(wú)干擾，但以前者效果更佳。

梔子中梔子苷含量高且為主要有效成分[2]。在梔子的薄層鑒別中，選用梔子苷為對(duì)照品，展開系統(tǒng)比較了三氯甲烷－丙酮－甲酸(7∶1∶1)和乙酸乙酯－甲酸－冰醋酸－水(10∶0.5∶0.5∶1)，陰性無(wú)干擾，但以系統(tǒng)前者效果更佳。文獻(xiàn)[3]中用50%硫酸乙醇溶液顯色，但本研究采用噴香草醛硫酸溶液顯色效果較好。

目前針對(duì)虎杖有效成分研究，多以單一成分為主，如大黃素、白藜蘆醇、白藜蘆醇苷等。本研究采用虎杖對(duì)照藥材，以文獻(xiàn)[1]鑒別虎杖使用的展開劑，石油醚(30～60℃)－甲酸乙酯－甲酸(15∶1∶1)的上層溶液，置氨蒸氣中熏至顯紅色斑點(diǎn)，但容易褪去，故以直接檢視日光下的橙黃色斑點(diǎn)進(jìn)行替代。

[1]國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典(一部).北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2010：194，附錄34.

[2]彭 婕，錢之玉，劉同征，等.京尼平苷和西紅花酸保肝利膽作用的比較[J].中國(guó)新藥雜志，2003，12(2)：105－108.

[3]朱 玉，劉紅霞，魏愛卿.薄層掃描法測(cè)定情感利膽粉劑中梔子苷的含量[J].藥物分析雜志，1998，18(增刊)：40－41.