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    卡式微柱凝膠方法在血型鑒定中的應(yīng)用及價(jià)值

    2012-04-05 01:59:12袁碧和重慶市墊江縣人民醫(yī)院輸血科408300
    檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)與臨床 2012年15期
    關(guān)鍵詞:卡式微柱血型

    袁碧和(重慶市墊江縣人民醫(yī)院輸血科 408300)

    隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的迅猛發(fā)展,輸血已經(jīng)成為一門涉及多個(gè)學(xué)科的新興學(xué)科。輸血作為一種特殊的治療手段可挽救患者生命,而準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血方法對(duì)安全輸血起著非常重要的作用。安全輸血是輸血工作中的重點(diǎn),必須保證血型鑒定、交叉配血等輸血相關(guān)檢測(cè)百分之百正確,因?yàn)?.1%的誤差可能就會(huì)危及受血者的健康,甚至是生命。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步,卡式微柱凝膠方法(簡(jiǎn)稱卡式法)已在全國(guó)各級(jí)醫(yī)院中普遍運(yùn)用,逐步取代了已使用百年傳統(tǒng)式的血型血清學(xué)技術(shù)。相對(duì)于從前國(guó)內(nèi)各級(jí)醫(yī)院傳統(tǒng)的血型鑒定及配血試驗(yàn)來(lái)說(shuō),卡式法結(jié)果準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)單、時(shí)間短、試劑用量小、環(huán)境污染?。?-3]。2009年1月至2011年12月對(duì)本院需輸血治療的1 435例住院患者用卡式法進(jìn)行血型鑒定及配血,現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

    1 資料與方法

    1.1 一般資料 2009年1月至2011年12月本院需輸血治療的住院患者1 435例,其中男730例,女705例,年齡5~70歲,平均(25.49±13.65)歲。抽取肘靜脈3mL,肝素抗凝,同時(shí)分別用卡式法和手工鹽水法進(jìn)行血型鑒定。

    1.2 試劑 抗A、抗B血清購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司,抗D單克隆血清由長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供,ABO、RhD血型鑒定Cellbind微柱凝膠卡由荷蘭皇家血液基金會(huì)有限公司提供。鹽水購(gòu)自天圣制藥集團(tuán)股份有限公司。操作及結(jié)果判定按使用說(shuō)明書進(jìn)行。

    1.3 儀器 免疫微柱孵育器和血型血清學(xué)離心機(jī)由長(zhǎng)沙英泰儀器有限公司提供。

    1.4 方法

    1.4.1 手工鹽水法 按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》[4]規(guī)定,正向定型和反向定型用試管法進(jìn)行。

    1.4.2 卡式法 按荷蘭皇家血液基金會(huì)有限公司Cellbind微柱凝膠卡血型鑒定操作手冊(cè)進(jìn)行:取微柱凝膠卡分別標(biāo)明ABO/D正、反定型卡各1張,標(biāo)記患者姓名、住院號(hào)和日期等,撕去卡上部的錫紙膜。在A、B、D孔內(nèi),各加入0.5%受檢紅細(xì)胞45μL,再分別加入20μL抗A、抗B、抗D血清。在A1、B孔內(nèi)各加入45μL的0.5%A、B型紅細(xì)胞懸液,再加入45μL受檢血清。900r/min離心2min,1 480r/min離心3min,4 400r/min離心5min,取出觀察結(jié)果。按微柱凝膠卡說(shuō)明書提示標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果,紅細(xì)胞完全降至柱底者為陰性,完全或部分被阻擋于凝膠內(nèi)者為陽(yáng)性。

    2 結(jié) 果

    在1 435例送檢血樣中,微柱凝膠法一次性正確率正定型為100.0%,反定型為99.7%;手工鹽水法一次性正確率正定型為99.3%,反定型為98.9%。兩種方法血型鑒定正確率比較見表1。1 435例血樣共檢測(cè)RhD型12例,占0.83%。正反定型不相符者30例,將血液紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次,再進(jìn)行重復(fù)鑒定,有6例為紅細(xì)胞濃度異常,10例血漿中含有纖維蛋白,5例為紅細(xì)胞懸液不新鮮。其余9例正反定型不符者,進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)2例有抗IgG抗體(腫瘤),3例自身凝集(多發(fā)性骨髓瘤),2例有嚴(yán)重冷凝集(凝血功能障礙),2例紅細(xì)胞被抗體致敏(自身免疫性溶血性貧血)。

    表1 兩種方法血型鑒定結(jié)果比較

    續(xù)表1 兩種方法血型鑒定結(jié)果比較

    3 討 論

    隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展,安全輸血日益受到人們的重視。目前,大多數(shù)醫(yī)院在進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)時(shí)還在應(yīng)用鹽水法、酶法、聚凝胺法等傳統(tǒng)方法,這些方法靈敏度較低,操作繁瑣,需反復(fù)洗滌紅細(xì)胞,自動(dòng)化程度低,試驗(yàn)全過(guò)程不宜標(biāo)準(zhǔn)化,且影響因素多,不利于臨床采取正確的診治手段??ㄊ椒ㄊ墙陙?lái)被推薦使用的,是微柱凝膠技術(shù)與上述傳統(tǒng)方法結(jié)合的產(chǎn)物,其既克服了傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn),又具有靈敏度、準(zhǔn)確性高等優(yōu)點(diǎn),為臨床安全輸血提供了很好的保障[5-6]。

    本研究結(jié)果顯示,正反定型不相符者30例,有6例為紅細(xì)胞濃度異常,10例血漿中含有纖維蛋白,4例為紅細(xì)胞懸液不新鮮。紅細(xì)胞濃度或過(guò)高或離心不徹底,血清中含纖維蛋白、出現(xiàn)細(xì)胞“凝塊”、細(xì)菌污染、反定型紅細(xì)胞懸液不新鮮等,可能導(dǎo)致卡式法呈假陰性或假陽(yáng)性[7]。因此,準(zhǔn)確的紅細(xì)胞濃度是卡式法正確操作的關(guān)鍵之一,文獻(xiàn)報(bào)道2%為最佳紅細(xì)胞濃度。

    本研究結(jié)果表明,9例正反定型不符者,進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)2例有抗IgG抗體(腫瘤),3例自身凝集(多發(fā)性骨髓瘤),2例有嚴(yán)重冷凝集(凝血功能障礙),2例紅細(xì)胞被抗體致敏(自身免疫性溶血性貧血),說(shuō)明某些疾病可引起的自身凝集、冷凝集等,引起的抗原減弱,會(huì)影響卡式法鑒定結(jié)果,應(yīng)予以重視。

    本研究結(jié)果表明,卡式法鑒定血型,其正確率及反應(yīng)強(qiáng)度均高于手工鹽水法,且操作簡(jiǎn)便、快速、省時(shí)、省力,樣本、試劑用量少,易于觀察結(jié)果,并可以長(zhǎng)時(shí)間保存血型鑒定樣本(保存1周以上),有利于事后復(fù)查。同時(shí),卡式法結(jié)果的判讀易于標(biāo)準(zhǔn)化,最大限度減少了操作人員主觀因素的影響。但由于卡式法成本略高于手工鹽水法,因此,作者建議對(duì)門診患者采用手工鹽水法,而對(duì)住院患者則采用卡式法。

    綜上所述,卡式法是一種靈敏、安全的血型鑒定技術(shù),對(duì)于提高血型檢驗(yàn)質(zhì)量有明顯的促進(jìn)作用,為臨床安全輸血提供了很好的保障,但由于成本略高于手工鹽水法,可應(yīng)用于住院患者血型鑒定。

    [1] 劉永霞.凝聚胺法與微柱凝膠法在臨床配血中的應(yīng)用比較[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2012,21(3):266-267.

    [2] 鐘月華,羅鐵軍,黃華華,等.微柱凝膠法與凝聚胺法在交叉配血中的比較研究[J].廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào),2010,27(2):296-297.

    [3] 趙小燕,王風(fēng)玉,張英,等.兩種方法在交叉配血中聯(lián)合應(yīng)用的效果評(píng)價(jià)[J].中國(guó)醫(yī)藥指南,2009,7(14):22-23.

    [4] 葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:135.

    [5] 楊瑩,譚雅玲,蔣永青.卡式配血在臨床輸血中的應(yīng)用價(jià)值[J].實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué),2011,29(3):332.

    [6] 葉巧國(guó),楊毓,何靜,等.微柱凝膠卡式法在交叉配血及不規(guī)則抗體檢測(cè)中的應(yīng)用[J].現(xiàn)代醫(yī)院,2011,11(12):59-61.

    [7] 王小平.微柱凝膠法應(yīng)用于血型鑒定[J].廣州醫(yī)藥,2007,38(2):60-61.

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