不同檢測(cè)方法探討幽門螺桿菌感染與Barrett食管之間的關(guān)系

陳耀明，顏士巖，范建高

1.上海市崇明縣堡鎮(zhèn)人民醫(yī)院消化內(nèi)科，上海 202157;2.上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬新華醫(yī)院消化內(nèi)科

H.pylori感染與消化性潰瘍、胃癌以及胃黏膜相關(guān)性淋巴樣組織淋巴瘤(mucosa-associated lymphoid tissue，MALT)等上消化道疾病的發(fā)病密切相關(guān)。已經(jīng)得到消化界的公認(rèn)。但是H.pylori感染在Barrett食管發(fā)生發(fā)展中的作用目前研究結(jié)論尚不一致［1-3］。有研究表明H.pylori是食管黏膜的保護(hù)因子，與Barrett食管的發(fā)生無關(guān)［2］。但亦有人持相反意見，認(rèn)為H.pylori是食管黏膜損害的致病因子［3］。本研究擬采用快速尿素酶法、病理中性復(fù)紅染色法及13C呼氣試驗(yàn)等不同的方法檢測(cè)Barrett食管患者和非胃食管反流病及Barrett患者H.pylori感染率，比較各組間H.pylori陽性率的差異并分析與臨床病理參數(shù)之間的關(guān)系，以期了解H.pylori感染與Barrett食管之間的關(guān)系，為臨床進(jìn)一步診療提供實(shí)驗(yàn)及理論依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 選取我院2007年3月－2010年3月3年間在我院參與研究行電子胃鏡檢查，同時(shí)行13C呼氣試驗(yàn)并明確診斷為Barrett食管患者84例，其中男56例，女28例，男∶女為2∶1，年齡16～89歲，中位年齡52.8歲。Barrett食管的診斷標(biāo)準(zhǔn)參照2006年三亞Barrett食管診治共識(shí)即為內(nèi)鏡下發(fā)現(xiàn)并被病理組織學(xué)證實(shí)在食管與胃黏膜交界的連接線(gastroesophageal junction，GEJ)以上出現(xiàn)的任何長度的鱗狀上皮伴有腸上皮化生(intestinal metaplasia，IM)的柱狀上皮取代，即Barrett食管的病變必須是在胃食管交界線以上出現(xiàn)含有杯狀細(xì)胞的特殊柱狀上皮。選擇同期無消化道癥狀的內(nèi)鏡檢測(cè)陰性的正常體檢者84例作為正常對(duì)照。并分別收集各組人員的臨床病理資料。

1.2 電子胃鏡下活檢 Barrett食管組分別在食管遠(yuǎn)端3、6、9、12點(diǎn)方向每隔2 cm做4象限活檢取材，正常對(duì)照組在食管下段齒狀線下方取材。所有患者病例均同時(shí)在胃竇部取材。部分樣本立即使用快速尿素酶檢測(cè)板進(jìn)行H.pylori檢測(cè)并登記檢測(cè)結(jié)果，部分標(biāo)本經(jīng)10%中性緩沖福爾馬林固定液固定，石蠟包埋，各連續(xù)切片2張，1張行HE(蘇木素伊紅)染色用于病理診斷，另1張用中性復(fù)紅染色行H.pylori病理檢測(cè)。

1.3 H.pylori感染的診斷 采用快速尿素酶(RUT)試驗(yàn)(RUT采用HPUT2H104胃幽門螺桿菌快速診斷試劑盒，由福建三強(qiáng)生物化工有限公司提供，按照說明書進(jìn)行操作及結(jié)果判定)和中性復(fù)紅染色法對(duì)食管下段齒狀線下方及胃竇黏膜活檢樣本進(jìn)行H.pylori檢測(cè)感染，兩種方法之一陽性者判定為H.pylori感染陽性。同時(shí)收集相應(yīng)患者的13C呼氣試驗(yàn)結(jié)果(利用北京華亙安邦科技有限公司的13C紅外光譜分析儀檢測(cè)13C標(biāo)記的CO2含量，＞4.0為陽性)，陽性者即判斷為H.pylori感染。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 運(yùn)用SPSS 11.0軟件進(jìn)行分析，組間數(shù)據(jù)比較采用t檢驗(yàn)及χ2檢驗(yàn)，P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 快速尿素酶法及中性復(fù)紅病理檢測(cè)法H.pylori檢測(cè)情況

2.1.1 食管下段黏膜H.pylori檢測(cè)情況:在Barrett食管組、正常對(duì)照組食管下段黏膜中均可檢出H.pylori，檢出率分別為 14.3%(12/84)和 16.7%(14/84)，兩組間H.pylori檢出率無顯著性差異(P＞0.05)。其中Barrett食管組H.pylori陽性病例中6例為伴腸化的Barrett食管患者，占 42.9%(6/14)，單純 Barrett食管患者8 例，占57.1%(8/14)。

2.1.2 胃竇部 H.pylori感染情況:在正常對(duì)照組、Barrett食管組胃竇部黏膜 H.pylori陽性率分別為61.9%(52/84)和45.2%(38/84)，胃竇黏膜 H.pylori陽性率在兩組間有顯著差異(P＜0.05)。H.pylori陽性的Barrett食管患者反酸、噯氣等臨床癥狀顯著少于H.pylori陽性的正常對(duì)照組。

2.213C呼氣試驗(yàn)法H.pylori檢測(cè)情況13C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)H.pylori陽性的患者BE組為64.3%(54/84)，對(duì)照組為66.7%(56/84)。13C呼氣法顯示BE組與對(duì)照組H.pylori陽性率無顯著差異(P＞0.05)。

3 討論

H.pylori感染是否與GERD及BE呈負(fù)相關(guān)是近年來爭論的話題之一［4-6］，一方面，H.pylori感染導(dǎo)致累及胃體時(shí)胃酸分泌減少，根除H.pylori后腺體炎癥減輕或萎縮部分逆轉(zhuǎn)，胃酸分泌增加，這可能是根除H.pylori后GERD發(fā)生率增加的重要原因;另一方面，H.pylori感染導(dǎo)致血清促胃液素濃度增高，而促胃液素可提高食管下段括約肌的壓力，防止胃食管反流。另外H.pylori可以產(chǎn)生尿素酶，尿素酶分解尿素產(chǎn)生氨，氨是強(qiáng)有力的中和物質(zhì)，能夠?qū)ξ杆徇M(jìn)行中和，升高胃內(nèi)pH值，減輕反流的胃內(nèi)容物對(duì)食管的腐蝕，可能對(duì)胃食管反流及其引起的BE也有一定保護(hù)作用［7-8］。據(jù) Rugge等［9］報(bào)道，BE 患者胃內(nèi) H.pylori感染率為35.85%(19/53)，其中 CagA+菌株感染率為15.09%(8/53)，與自然人群相比，BE患者的 H.pylori感染率較低，尤其是CagA+菌種，提示H.pylori感染，尤其是CagA+菌株感染可能是BE發(fā)生的保護(hù)因素。而2005年歐洲的Maastricht-3共識(shí)卻認(rèn)為H.pylori感染對(duì)GERD及BE的發(fā)生發(fā)展具有保護(hù)作用的觀點(diǎn)缺乏足夠的客觀證據(jù)。我們的研究結(jié)果顯示:采用快速尿素酶法及中性復(fù)紅病理檢測(cè)法檢測(cè)H.pylori顯示胃竇部H.pylori陽性率在BE組與正常對(duì)照組間有顯著差異，其中BE組陽性率顯著低于正常對(duì)照組，然而，采用13C呼氣試驗(yàn)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)H.pylori感染率在兩組間無顯著差異。說明無論是快速尿素酶法還是中性復(fù)紅病理檢測(cè)法檢測(cè)H.pylori均具有一定的局限性，因?yàn)樵搩煞N檢測(cè)方法陽性與否只能說明活檢組織的H.pylori感染情況，而不能說明患者胃及食管H.pylori感染情況。該兩種檢測(cè)方法 H.pylori陽性說明患者有H.pylori感染，陰性不能完全排除H.pylori感染。而13C-尿素呼氣試驗(yàn)則可以準(zhǔn)確地證明有無H.pylori感染。目前越來越多的研究顯示13C-尿素呼氣試驗(yàn)是目前最安全、準(zhǔn)確的無創(chuàng)性檢查H.pylori的方法，國際公認(rèn)的檢測(cè)幽門螺桿菌的“金標(biāo)準(zhǔn)”，在評(píng)價(jià)H.pylori感染與BE之間的關(guān)系應(yīng)該盡可能使用更為可靠的13C-尿素呼氣試驗(yàn)來檢測(cè)H.pylori，然而這方面的研究甚少，我們使用13C-尿素法來檢測(cè)患者H.pylori感染狀況，其初步研究結(jié)果顯示H.pylori感染在正常對(duì)照組與BE組間無差異，未見H.pylori感染對(duì)BE的保護(hù)效應(yīng)跡象?？傊?，H.pylori感染與BE的確切關(guān)系尚需要大樣本的研究來證實(shí)，H.pylori在Barrett食管發(fā)病中的作用目前尚不十分明確，因此，對(duì)于H.pylori陽性的Barrett食管患者是否進(jìn)行根除治療一直存在爭議［10-11］。今后需要進(jìn)一步明確在哪些情況下或者哪些人群中進(jìn)行根除H.pylori，要對(duì)根除治療的相對(duì)收益和可能的危害進(jìn)行分析評(píng)價(jià)，以協(xié)助臨床選擇最佳的治療方案。

既往大量研究顯示，H.pylori主要定植于柱狀上皮，而不能定植于食管鱗狀上皮［12-13］。本組結(jié)果發(fā)現(xiàn):在Barrett食管組、正常對(duì)照組食管下段黏膜中均可檢出 H.pylori，檢出率分別為 14.3%(12/84)和16.7%(14/84)，兩組間H.pylori檢出率無顯著性差異(P ＞ 0.05)。多項(xiàng)研究［14-15］提示 H.pylori感染與GERD和Barrett食管的發(fā)生無關(guān)。

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