RRM1蛋白表達(dá)與含吉西他濱方案一線治療晚期非小細(xì)胞肺癌療效關(guān)系的研究

梁劍苗 鄧燕明* 馮衛(wèi)能 胡維維 陳澤程 唐溢聰 張 華 冼海兵 張順達(dá)

（1 廣東省佛山市第一人民醫(yī)院頭頸胸腫瘤內(nèi)科，廣東 佛山 528000；2 廣東省佛山市第一人民醫(yī)院病理科，廣東 佛山 528000）

肺癌是目前最常見的惡性腫瘤之一，非小細(xì)胞肺癌（NSCLC）是肺癌的主要病理類型[1]，吉西他濱聯(lián)合鉑類是晚期NSCLC一線治療的主要化療藥物之一，核苷酸還原酶1（RRM1）是吉西他濱的主要靶點(diǎn)之一。本研究回顧性分析44例使用含吉西他濱方案一線化療的晚期非小細(xì)胞肺癌的RRM1表達(dá)，探討RRM1表達(dá)與吉西他濱療效的相關(guān)性。

1 材料與方法

1.1 研究對(duì)象

收集我院2008年1月至2010年8月一線治療的晚期非小細(xì)胞肺癌患者，入組病例符合以下條件：①經(jīng)組織學(xué)或細(xì)胞學(xué)確診為非小細(xì)胞肺癌；②PS評(píng)分0~1分；③至少有一個(gè)可測量病灶；④使用含吉西他濱方案化療；⑤至少化療2周期。

1.2 治療方案

吉西他濱（美國禮來公司，健擇）1000mg/m2，靜脈滴注，第1天；或聯(lián)合順鉑75mg/m2，靜脈滴注，第1天，或聯(lián)合卡鉑AUC=5，靜脈滴注，第1天。21d為1周期。

1.3 療效評(píng)價(jià)

每化療2周期進(jìn)行療效評(píng)價(jià)，按照實(shí)體瘤療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn)（RECIST1.1版），分為完全緩解（CR）、部分緩解（PR）、穩(wěn)定（SD）和進(jìn)展（PD），客觀有效率（RR）為CR+PR，疾病控制率（DCR）為CR+PR+SD。無疾病進(jìn)展時(shí)間（PFS）為治療開始至腫瘤復(fù)發(fā)或進(jìn)展的時(shí)間；總生存時(shí)間（OS）為治療開始至死亡或末次隨訪的時(shí)間。末次隨訪時(shí)間為2011年12月。

1.4 RRM1表達(dá)的檢測

免疫組織化學(xué)采用Envision二步法，檢測系統(tǒng)試劑盒和RRM1抗體均購自Dako公司，RRM1蛋白表達(dá)陽性為細(xì)胞漿或（和）細(xì)胞核出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。

1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

所有資料采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析，療效分析采用χ2檢驗(yàn)，生存分析采用Kaplan-Meier法，P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 臨床資料

共收集44例肺癌患者資料，其中Ⅲb期6例（13.6%），Ⅳ期38例（86.4%）；男性23例（52.3%），女性21例（47.7%）；中位年齡（57.5±11.5）歲（30~76歲）；腺癌32例（72.7%），鱗癌12例（27.3%）；使用吉西他濱聯(lián)合順鉑方案25例（56.8%），吉西他濱聯(lián)合卡鉑方案15例（34.1%），單藥吉西他濱4例（9.1%）；中位周期數(shù)（4±1.14）周期（2~6周期）。

2.2 RRM1免疫組化結(jié)果

44例患者中，RRM1陽性（+）40.9.8%（18/44），RRM1陰性（-）59.1%（26/44）。

2.3 療效

該研究的44例患者中，PR 17例（38.6%），SD 16例（36.4%），PD 11例（25.0%）；客觀有效率（RR）38.6%（17/44），疾病控制率（DCR）75.0%（33/44）；中位無疾病進(jìn)展時(shí)間（PFS）6.8個(gè)月（5.9~7.7個(gè)月），中位生存時(shí)間（OS）15.4個(gè)月（12.4~18.4個(gè)月）。

2.4 相關(guān)性分析

該研究中，RRM1陽性患者RR為27.8%（5/18），RRM1陰性患者RR為46.2%（12/26），差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.218）；RRM1陽性患者DCR為55.6%（10/18），RRM1陰性患者RR為88.5%（23/26），差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.013）；RRM1陽性患者PFS為5.5個(gè)月，RRM1陰性患者PFS為7.2個(gè)月，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＝0.01）；RRM1陽性患者OS為15.3個(gè)月，RRM1陰性患者OS為18.8個(gè)月，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P=0.127）。見圖1。

圖1 RRM1表達(dá)對(duì)PFS和OS的影響

3 討 論

吉西他濱是嘧啶類抗代謝藥物,為核苷酸還原酶（RR）抑制劑，在細(xì)胞內(nèi)經(jīng)過核苷激酶的作用轉(zhuǎn)化成具有活性的二磷酸核苷（dFdCDP）及三磷酸核苷（dFdCTP），從而抑制DNA合成[2,3]。核苷酸還原酶（ribonucleotide reductase，RR）是DNA合成通路中的限速酶，RRM1是RR的亞單位，是核苷酸結(jié)合位點(diǎn)，控制底物的特異性和整個(gè)酶的活性，同時(shí)也是吉西他濱的結(jié)合位點(diǎn)[4]。

多項(xiàng)研究顯示RRM1表達(dá)可能可預(yù)測吉西他濱化療的療效。Bergman等[5]2005年建立的第一個(gè)體內(nèi)吉西他濱耐藥模型顯示吉西他濱耐藥細(xì)胞株的RRM1 mRNA水平明顯升高。Rosell等[6]采用實(shí)時(shí)PCR檢測100例晚期NSCLC患者病理標(biāo)本RRM1的mRNA水平，發(fā)現(xiàn)RRM1低表達(dá)患者使用吉西他濱聯(lián)合順鉑方案緩解率較高，中位生存期較高表達(dá)患者明顯延長（P=0.009）。Lee JJ等[7]使用免疫組化方法檢測使用吉西他濱為基礎(chǔ)的方案化療的晚期非小細(xì)胞肺癌患者的RRM1表達(dá)水平，研究顯示RRM1陽性患者的總生存期較陰性患者縮短（P=0.022），疾病控制率也低于陰性組（P=0.053）。高志強(qiáng)等[8]使用免疫組化方法檢測吉西他濱聯(lián)合順鉑化療的晚期肺癌患者RRM1蛋白表達(dá)，研究顯示RRM1蛋白高表達(dá)組的化療有效率低于低表達(dá)組（P=0.005）；RRM1高表達(dá)組的1年生存率低于低表達(dá)組（P=0.009）；RRM1蛋白高表達(dá)組的疾病進(jìn)展時(shí)間低于低表達(dá)組（P=0.042）；但兩組的中位生存期無明顯差異（P=0.245）。由于RT-PCR在mRNA水平檢測RRM1表達(dá)，而免疫組化在蛋白水平檢測RRM1表達(dá)，因此mRNA與蛋白表達(dá)之間可能存在一些差異。Gong W等[9]對(duì)18項(xiàng)臨床研究進(jìn)行Meta分析，亞組分析顯示免疫組化似乎乎比RT-PCR技術(shù)更好地預(yù)測晚期非小細(xì)胞肺癌患者使用含吉西他濱化療的客觀反應(yīng)率。本研究也采用免疫組化方法檢測RRM1蛋白表達(dá)，顯示RRM1陰性患者疾病控制率高于陽性患者，無疾病進(jìn)展時(shí)間延長，但有效率及總生存時(shí)間無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。

綜上所述，RRM1表達(dá)水平是吉西他濱治療非小細(xì)胞肺癌的敏感性的重要因素，然而仍需要大型的Ⅲ期隨機(jī)臨床試驗(yàn)明確RRM1是否能作為晚期非小細(xì)胞肺癌吉西他濱方案敏感性及預(yù)后的預(yù)測指標(biāo)。另外，使用何種檢測手段更能預(yù)測臨床療效，如何判斷RRM1表達(dá)水平高低等問題仍需進(jìn)一步研究證實(shí)。

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