頂空毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定鹽酸洛哌丁胺中殘留溶劑

胡猛慎，洪志玲，黃劍英(廈門市藥品檢驗(yàn)所，福建廈門361012)

鹽酸洛哌丁胺(loperamide hydrochloride)，化學(xué)名為N，N-二甲基-α，α-二苯基-4-(對(duì)氯苯基)-4-羥基-1-哌啶丁酰胺鹽酸鹽，是一種抗腹瀉藥，有膠囊劑、顆粒劑等制劑，臨床用于各種非感染性腹瀉有很好療效且副作用較低，是一種安全有效的口服止瀉藥［1］。由于該原料藥在合成過程中使用到甲醇、異丙醇、甲基異丁酮等多種有機(jī)溶劑，曾有文獻(xiàn)報(bào)道氣相色譜法分析其中4種有機(jī)溶劑的殘留［2］。本文采用頂空毛細(xì)管氣相色譜法同時(shí)對(duì)鹽酸洛哌丁胺中甲醇、異丙醇、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、甲基異丁酮、甲苯、苯9種溶劑殘留進(jìn)行檢測(cè)，結(jié)果表明方法簡便準(zhǔn)確。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 島津GC2010AF氣相色譜儀(配有FID檢測(cè)器);島津色譜工作站;PE TurboMatrix40自動(dòng)頂空進(jìn)樣器;Hitachi BEBICON空壓機(jī);SPH-300氫氣發(fā)生器;AL-204-IC萬分之一分析天平。

1.2 試藥 鹽酸洛哌丁胺供試品(批號(hào):10091011、10091012、10091013，由某藥企提供);氮?dú)鉃楦呒兊?二甲亞砜(DMSO)、甲醇、異丙醇、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、氯仿、甲基異丁酮、甲苯、苯均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件與頂空條件 色譜柱:DB-624毛細(xì)管柱，規(guī)格30 m×0.32 mm×0.25 μm;載氣:高純氮;流速:2.0 ml/min;柱溫:程序升溫，初始溫度35℃維持16 min，以每分鐘5℃升溫至50℃，維持2.5 min，再以每分鐘40℃升溫至120℃，維持3 min，再以每分鐘40℃升溫至200℃，維持1min;進(jìn)樣器溫度為200℃;分流比1∶1;檢測(cè)器為氫火焰離子化檢測(cè)器(FID)，檢測(cè)器溫度為250℃，氫氣40 ml/min，空氣400 ml/min，尾吹30 ml/min。頂空瓶加熱溫度100℃，加熱時(shí)間25 min，進(jìn)樣環(huán)110℃，傳輸線120℃，進(jìn)樣時(shí)間0.12 min。

2.2 對(duì)照品溶液的配制 分別精密稱取0.266 2 g三氯甲烷、0.011 0 g苯置100 ml量瓶中，用DMSO稀釋至刻度;另分別精密稱取0.027 2 g甲醇、0.051 3 g異丙醇、0.012 4 g正己烷、0.071 5 g乙酸乙酯、0.020 9 g四氫呋喃、0.010 3 g甲基異丁酮、0.011 3 g甲苯于100 ml量瓶，加入適量DMSO稀釋，再精密移取前述100 ml量瓶中溶液2.0 ml至該量瓶中，以DMSO稀釋至刻度，搖勻，作為殘留溶劑對(duì)照儲(chǔ)備液。精密移取對(duì)照儲(chǔ)備液5.0 ml于50 ml量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，精密量取5.0 ml，置頂空瓶中，密封，作為混合對(duì)照品溶液。

2.3 供試品溶液的配制 精密稱取鹽酸洛哌丁胺樣品0.5 g，置20 ml頂空瓶中，精密加入二甲亞砜5 ml，密封，作為供試品溶液。

2.4 專屬性試驗(yàn) 分別取DMSO和混合對(duì)照品溶液，按上述色譜條件進(jìn)行頂空分析，結(jié)果見圖1，表明溶劑DMSO中的少量雜質(zhì)不干擾殘留溶劑的分析，且各組分峰之間分離度符合規(guī)定，理論塔板數(shù)均大于5 000。

圖1 空白溶劑(A)和混合照品溶液(B)氣相色譜圖1-甲醇(4.4 min);2-異丙醇(7.8 min);3-正己烷(10.9 min);4-乙酸乙酯(15.4 min);5-四氫呋喃(16.3 min); 6-三氯甲烷(16.7 min);7-苯(19.4 min);8-甲基異丁酮(24.8 min);9-甲苯(25.1 min);10-二甲亞砜(28.7 min)。

圖2 供試品溶液氣相色譜圖1、4-溶劑峰(7.3 min，28.7 min);2-乙酸乙酯(15.4 min); 3-四氫呋喃(16.3 min)

2.5 線性關(guān)系 分別精密移取2.2項(xiàng)下的殘留溶劑對(duì)照儲(chǔ)備液1.0、3.0、5.0、7.0、10.0 ml于50 ml量瓶中，用DMSO稀釋至刻度，搖勻，作為1～5號(hào)濃度系列對(duì)照品溶液，各精密量取5.0 ml置頂空瓶中，密封，作為工作對(duì)照品溶液，在上述頂空氣相色譜條件下分析，測(cè)定各溶劑的峰面積，以各溶劑峰面積Y對(duì)濃度X(μg/ml)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果各組分在對(duì)應(yīng)濃度范圍內(nèi)均呈良好線性，見表1。

表1 殘留溶劑組分的線性方程與范圍

2.6 精密度試驗(yàn) 取混合對(duì)照品溶液按上述色譜條件平行進(jìn)樣6次，結(jié)果甲醇、異丙醇、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、三氯甲烷、苯、甲基異丁酮、甲苯峰面積的RSD分別為0.9%、0.8%、2.6%、0.8%、0.5%、2.5%、3.2%、0.8%、0.6%，均符合《中國藥典》2010年版二部規(guī)定的殘留溶劑外標(biāo)法精密度試驗(yàn)的要求(RSD不大于10%)［3］，表明方法重現(xiàn)性良好。

2.7 回收率試驗(yàn) 精密稱取批號(hào)為10091013的供試品9份(其中含乙酸乙酯0.01%、四氫呋喃0.001%，未檢出其他溶劑)置20 ml頂空瓶，每份0.5 g，分3組，每組3份，分別精密加入“2.5”線性項(xiàng)下的2、3、4號(hào)濃度對(duì)照品溶液5.0 ml，按上述色譜條件分析，計(jì)算各組分回收率，結(jié)果平均回收率(n=9)甲醇為96.0%(RSD=1.2%)、異丙醇為97.4%(RSD=0.8%)、正己烷為95.2%(RSD= 2.6%)、乙酸乙酯為99.4%(RSD=1.7%)、四氫呋喃為97.6%(RSD=1.8%)、三氯甲烷為96.2% (RSD=2.9%)、苯為102.3%(RSD=2.8%)、甲基異丁酮為98.5%(RSD=0.9%)、甲苯為95.9% (RSD=0.8%)。

2.8 檢測(cè)限 逐步稀釋混合對(duì)照品溶液，按上述色譜條件進(jìn)樣，結(jié)果甲醇、異丙醇、正己烷、乙酸乙酯、四氫呋喃、三氯甲烷、苯、甲基異丁酮、甲苯的最低檢測(cè)限(S/N=3)分別為0.326、0.616、0.007、0.086、0.0502、3.19、0.132、0.124、0.136 μg/ml。

2.9 樣品測(cè)定 取3批鹽酸洛哌丁胺供試品按“2.3”項(xiàng)下制備供試品溶液進(jìn)行頂空進(jìn)樣分析，結(jié)果見表2。

3 小結(jié)

本文選用中等極性的DB-624毛細(xì)管柱［4～6］，采用程序升溫可使9種有機(jī)溶劑到完全分離，提高效率，可用于鹽酸洛哌丁胺中殘留溶劑的控制。

表2 3批鹽酸洛哌丁胺樣品殘留溶劑的分析結(jié)果(n=2)

三氯甲烷與苯的規(guī)定限度較低且在檢測(cè)器中響應(yīng)值較弱。鑒于殘留溶劑為限度檢查，方法學(xué)中未考察定量限。

［1］ 陶 寅，蔡錫明.鹽酸洛哌丁胺的合成［J］.四川化工，1996，17(3):22.

［2］ 谷高強(qiáng)，周 坤，黃淑萍，等.氣相色譜法測(cè)定鹽酸洛哌丁胺中四種有機(jī)溶劑殘留量［J］.中國醫(yī)藥，2009，4(7):528.

［3］ 中國藥典2010年版.二部［S］.2010:附錄61.

［4］ 戴壽灃，陳貴斌，陳 悅.頂空毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定注射用頭孢哌酮舒巴坦鈉中殘留溶劑［J］.海峽藥學(xué)，2012，24(2): 53.

［5］ 姚 靜，吳建敏，高家敏，等.頂空GC測(cè)定纈沙坦原料有機(jī)溶劑殘留量［J］.中國藥事，2009，23(7):681.

［6］ 龔愛琴.頂空毛細(xì)管氣相色譜法測(cè)定氟苯尼考中殘留溶劑［J］.海峽藥學(xué)，2011，23(7):79.