埃索美拉唑鎂腸溶微丸的制備及其工藝評(píng)價(jià)

趙玉娜，鄭春麗，朱家壁，劉建平

中國(guó)藥科大學(xué)藥物制劑研究所，南京 210009

埃索美拉唑（Esomeprazole，EMZ），是阿斯利康公司研發(fā)的全球第一個(gè)單一異構(gòu)體質(zhì)子泵抑制劑（proton pump inhibitor，PPI），其主要用于治療胃食管反流病、HP（幽門螺桿菌）陽性的消化性潰瘍及與胃酸有關(guān)的消化系統(tǒng)紊亂性疾病，其口服肝代謝率較低，血藥濃度和生物利用度比奧美拉唑或R-異構(gòu)體高，且抑酸作用更強(qiáng)[1]。EMZ是奧美拉唑的S型光學(xué)異構(gòu)體，與鎂離子成鹽后，改變了其化學(xué)性質(zhì)，不同于奧美拉唑/鈉需要在避光、低溫、防潮等條件下保存。鎂鹽分子中含三個(gè)結(jié)晶水[2]，三水合埃索美拉唑鎂 （esomeprazole magnesium trihydrate，EMZMg，圖1）微溶于水，是顆粒狀結(jié)晶，室溫放置五年以上，不變色，含量不下降。但是，由于EMZ-Mg結(jié)構(gòu)中亞砜基的存在，藥物在酸性介質(zhì)中仍極其敏感，易被酸性化合物催化快速降解。因此，就藥物的穩(wěn)定性而言，顯然口服固體制劑的EMZ-Mg必須被保護(hù)起來以防止其與胃酸的直接接觸，使活性物質(zhì)能夠被完整的傳送到pH值接近中性的及藥物可以被迅速吸收的胃腸道部位[3]。目前國(guó)內(nèi)外上市的大多是腸溶制劑，采用腸溶包衣可有效地保護(hù)藥物免遭胃酸的破壞。本實(shí)驗(yàn)采用空白糖丸芯流化上藥并包衣的方法制備了EMZ-Mg腸溶微丸，以腸溶微丸在人工胃液中的耐酸力及體外溶出度為評(píng)價(jià)指標(biāo)，對(duì)其進(jìn)行處方工藝研究。

圖1 三水合埃索美拉唑鎂的結(jié)構(gòu)式

1 儀器與試藥

高效液相色譜儀（島津SPD-20A紫外檢測(cè)器，LC-20AT泵）；小型流化床包衣機(jī)（沈陽藥科大學(xué)制藥廠）；BT100-2J型恒流泵（保定蘭格恒流泵有限公司）；ZRS-4型智能溶出儀 （天津大學(xué)無線電廠）；BS124S型分析天平 （德國(guó)Sartorious公司）；85-1B型磁力攪拌器（鞏義市予華儀器有限責(zé)任公司）。

EMZ-Mg（江蘇吳中蘇藥醫(yī)藥有限公司，批號(hào)101003）；空白糖丸芯（Non-pareil seeds，德國(guó)JRS公司）；歐巴代03K1922（美國(guó)卡樂康公司）；丙烯酸樹脂（Eudragit L30D-55，上海德固賽輔料公司）；檸檬酸三乙酯（TEC，上海晶純?cè)噭┯邢薰荆涣u丙基甲基纖維素E5（HPMC E5，美國(guó)卡樂康公司）；滑石粉（Talc，廣西桂林航天藥用滑石有限責(zé)任公司）；乙腈（色譜純,山東禹王實(shí)業(yè)有限公司）；其他試劑均為分析純。所用輔料均為藥用級(jí)。

2 方法與結(jié)果

2.1 載藥微丸的制備

采用流化床包衣機(jī)（底噴）對(duì)空白糖丸芯上藥制備含藥微丸。稱取空白糖丸芯20 g置流化床包衣裝置中，原料藥研磨過100目篩，以3%的HPMC E5水溶液為粘合劑，稱取處方量的藥物混懸于HPMC水溶液中，持續(xù)攪拌條件下進(jìn)行流化上藥?？刂茰囟?7～39℃；霧化壓力0.15～0.2 MPa；鼓風(fēng)頻率29.5 Hz；噴液流速0.5～1 mL·min-1。所制藥丸于40℃流化干燥30 min。

2.2 載藥微丸的包衣

EMZ-Mg在小腸上端吸收，故選用在pH 5.5以上可溶的Eudragit L30D-55為腸衣材料。主藥遇酸不穩(wěn)定，而腸衣材料為酸性高分子化合物，pH值大約為3.5，故需在含藥丸芯與腸溶層之間包被隔離層，將藥物與酸性腸衣材料隔離[4]。本制劑選用歐巴代03K19229為隔離包衣材料，采用流化床包衣，工藝如下：2.2.1 隔離包衣 稱取適量歐巴代03K19229，以水為溶媒配制含量為8%的溶液。將所配包衣液在持續(xù)攪拌狀態(tài)下用噴槍噴灑至含藥微丸上，控制床溫40℃，霧化壓力0.2 MPa；鼓風(fēng)機(jī)頻率29.5 Hz；噴液流速0.5 mL·min-1。包衣增重約12%，40℃流化干燥30 min。

2.2.2 腸溶包衣 稱取滑石粉（Talc，抗粘劑）6 g，檸檬酸三乙酯（TEC，增塑劑）3 g，加入適量水中,勻化,緩慢倒入攪拌狀態(tài)下的Eudragit L30D-55（50 g）中，配成聚合物含量為8%的腸溶包衣液。將包好隔離衣的微丸置于流化床中包腸溶衣，包衣結(jié)束后40℃干燥2 h，包衣厚度以隔離小丸增重計(jì)。通過考察不同包衣增重的腸溶微丸在0.1 mol·L-1HCl（人工胃液，SGF）中2 h的穩(wěn)定性情況及pH 6.8的磷酸鹽緩沖液（人工腸液，SIF）中45 min的溶出情況來確定包衣液用量。包衣工藝條件:鼓風(fēng)機(jī)頻率:29.5 Hz；霧化壓力:0.15 MPa；噴液流速:1 mL·min-1；流化溫度:30～35℃。

2.2.3 包衣增重量的確定 經(jīng)過多次反復(fù)的包衣試驗(yàn),隔離層的增重為含藥丸芯重量的12%～15%時(shí),隔離層既能很好地將主藥和腸溶衣完全隔離開,避免藥物與酸性膜材直接接觸而影響藥物的穩(wěn)定性，又不致包衣偏厚影響藥物釋放。幾種不同腸溶增重的微丸在SGF中作用2 h的剩余藥量和SIF中45 min的累計(jì)釋放量如圖2所示。由圖2可知，腸溶衣層的增重為隔離丸重的50%～60%時(shí)，腸溶微丸在SGF中2 h穩(wěn)定（降解量＜10%），在SIF中的溶出情況良好，15 min即可溶出標(biāo)示含量85%的藥物。

當(dāng)腸衣層增重為隔離層丸重的30%～40%時(shí),由于微丸在酸液中不穩(wěn)定,故未測(cè)定其溶出度。當(dāng)腸衣層增重大于隔離層丸重的60%時(shí)，由于腸衣層過厚，微丸在腸液中崩解較慢，45 min后溶出杯中仍殘留少量未崩散的顆粒。因此，本制劑以腸衣層增重55%為優(yōu)選處方。

圖2 腸溶衣增重對(duì)微丸耐酸力及溶出度情況

2.3 EMZ-Mg在釋放介質(zhì)中的穩(wěn)定性研究[5-6]

PPIs類藥物在酸性和中性介質(zhì)中不穩(wěn)定，EMZMg在SIF中的半衰期僅為8 h（37℃）。因此，有必要對(duì)藥物在緩沖液介質(zhì)（SIF）釋放過程中的穩(wěn)定性進(jìn)行研究，為其腸溶制劑的釋放度測(cè)定提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。

按一個(gè)制劑規(guī)格，精密稱取EMZ-Mg原料藥22.4 mg于溶出杯中，將其溶于1000 mL磷酸鹽緩沖液（pH 6.8）中，轉(zhuǎn)速100 r·min-1。分別于0、5、10、15、30、45 min取樣10 mL，0.45 μm微孔濾膜過濾，精密量取續(xù)濾液5 mL，立即加入0.25 mol·L-1的NaOH溶液1 mL，搖勻作為供試樣品。取供試液20 μL注入液相色譜儀，照“2.4.1”項(xiàng)下色譜條件，測(cè)定EMZ-Mg的含量，以0 min藥物含量（C0）為100%，計(jì)算各個(gè)時(shí)間點(diǎn)的剩余藥物（Ct）百分含量。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明：EMZ-Mg在釋放介質(zhì)中較穩(wěn)定，45 min藥物略有分解（約3.02%），能夠滿足釋放度考察的要求，但隨著時(shí)間的延長(zhǎng)，EMZ-Mg分解增加（見表1），因此取樣后應(yīng)該加堿處理并盡量迅速測(cè)定。

表1 EMZ-Mg剩余量與時(shí)間的關(guān)系

2.4 耐酸力及溶出度測(cè)定

2.4.1 色譜條件[7-8]色譜柱：Kromasil C8（150 mm× 4.6 mm，5 μm）；流動(dòng)相：乙腈-0.01 mol·L-1磷酸氫二鈉（pH 7.6）（27∶73）；檢測(cè)波長(zhǎng)：302 nm；柱溫：30℃；流速：1.0 mL·min-1；進(jìn)樣量：20 μL。

2.4.2 耐酸力的測(cè)定[6，9]因EMZ-Mg在酸中迅速分解，故無法直接測(cè)定其在酸中的釋放量，因此需測(cè)定其未釋放的藥物含量，即為耐酸力。取本品，照釋放度測(cè)定法 （《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄XD第二法），以鹽酸溶液（9→1000）750 mL為溶劑，轉(zhuǎn)速100 r·min-1，2 h后停止并取出微丸，用蒸餾水沖洗微丸表面殘留的酸液，濾紙吸干。將小丸轉(zhuǎn)移至100 mL棕色量瓶中，加入無水乙醇20 mL，超聲振蕩5 min，加入0.01 mol·L-1的硼砂溶液60 mL，超聲振蕩5 min，將溶液冷卻至室溫，硼砂溶液定容，搖勻，濾過，取續(xù)濾液1 mL至10 mL量瓶中，硼砂溶液定容，搖勻作為供試液。另取EMZ-Mg對(duì)照品適量，精密稱定，同法配置成對(duì)照品溶液，照高效液相色譜法按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算剩余藥物含量。

取自制腸溶微丸3批（腸溶增重55%），含量及耐酸力測(cè)定結(jié)果見表2。3批樣品耐酸力良好，批次間差異較小。

表2 3批產(chǎn)品的耐酸力測(cè)定結(jié)果（n=6）

2.4.3 溶出度的測(cè)定[6]取自制腸溶微丸3批，照釋放度測(cè)定法 （《中國(guó)藥典》2010年版二部附錄XD第二法），以SGF 750 mL為溶劑，轉(zhuǎn)速100 r·min-1，2 h后，向容器中加入預(yù)熱至37℃的磷酸鈉溶液（0.2 mol·L-1）250 mL，分別于5、10、15、30、45 min取樣，依法操作，HPLC法測(cè)定溶出量，并繪制溶出曲線。

按處方工藝制備3批腸溶微丸樣品（腸溶增重55%），測(cè)定其在人工胃液中作用2 h后，人工腸液中釋放45 min后的溶出度。由圖3可知腸溶微丸在人工腸液中釋放迅速，達(dá)到了速釋的目的。

圖3 EMZ-Mg腸溶微丸在人工腸液中的溶出曲線（n=6）

3 討 論

3.1 EMZ-Mg在酸性pH條件下鎂離子游離，最終以EMZ的形式發(fā)揮藥效。因其對(duì)酸性介質(zhì)不穩(wěn)定，因此為了使藥物口服后不被胃酸破壞，需將其制備成腸溶制劑。EMZ在小腸上端吸收，故選用在pH 5.5以上可溶的Eudragit L30D-55為腸衣材料，以達(dá)到藥物在十二指腸釋放的目的。包衣液pH值在4.0左右，如果直接進(jìn)行腸溶包衣，會(huì)使主藥分解變色。故選用對(duì)藥物無影響的歐巴代作為隔離材料，進(jìn)行保護(hù)性包衣，較好地解決了腸溶微丸的穩(wěn)定性問題。

對(duì)EMZ-Mg在人工胃液中的穩(wěn)定性進(jìn)行考察，結(jié)果表明在《中國(guó)藥典》規(guī)定的釋放時(shí)間內(nèi)（45 min）降解的藥物約為3%，不會(huì)影響釋放度的考察結(jié)果。但是釋放考察完成后樣品應(yīng)盡快測(cè)定，如果放置時(shí)間過長(zhǎng)，藥物同樣容易分解使測(cè)定結(jié)果偏差。

3.2 微丸屬于劑量分散型制劑，口服后子單元在胃腸道迅速分布形成均勻分散的微粒系統(tǒng)，可有效避免由于局部藥物濃度過高對(duì)胃黏膜的刺激性，改善藥物吸收，從而提高生物利用度，也可降低由于進(jìn)食和胃排空等引起的個(gè)體內(nèi)和個(gè)體間差異，避免劑量突釋（dose bumping）現(xiàn)象，保證用藥的安全性[9]。

3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，本制劑具有較好的耐酸力，SGF中作用2 h后，3批微丸的剩余藥量均可達(dá)投藥量的98%以上，由此可預(yù)見本制劑在口服后可有效避免胃酸對(duì)藥物的降解破壞，安全到達(dá)腸道吸收部位，且其溶出迅速完全，15 min即可達(dá)到標(biāo)示量的85%以上，可預(yù)測(cè)藥物能夠在腸道較好的釋放吸收。

該工藝制備的腸溶微丸耐酸力及溶出度均符合《中國(guó)藥典》要求，且有效解決了埃索美拉唑鎂的穩(wěn)定性問題，制備工藝簡(jiǎn)單易行，重現(xiàn)性好，可進(jìn)一步應(yīng)用于工業(yè)化生產(chǎn)。

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