避其鋒，擊其虛，可控制豬藍耳病

喻傳洲

（華中農(nóng)業(yè)大學，湖北 武漢 430070）

1987年在美國發(fā)現(xiàn)了豬繁殖與呼吸綜合征（PRRS），俗稱藍耳病，并相繼在美洲和歐洲迅速傳播。自1995年傳入我國以來，藍耳病就像幽靈一樣，一直徘徊在神州大地，給我國養(yǎng)豬業(yè)帶來了巨大損失。與其他一些豬病毒性疾病相比，由于豬藍耳病病毒（PRRSV）（無論是經(jīng)典的、還是高致病性的豬藍耳病病毒）的一些難以被人類駕馭的特性，使此病難以控制，以致被稱為所謂“神秘病”。PRRSV的神秘性主要表現(xiàn)在如下4個方面。

1 PRRSV的致病機理尚不十分清楚

直至最近，田德斌在其博士論文《嵌合動脈炎病毒構(gòu)建及其病毒學特性》的引言中在引用Darwich 等（2010）的研究時仍然指出：藍耳病病毒與其他一些經(jīng)典病毒，如流感病毒、反轉(zhuǎn)錄病毒、皰疹病毒比，未知領(lǐng)域很多，特別是涉及到病毒學機制方面的領(lǐng)域：病毒侵入細胞過程、各種結(jié)構(gòu)蛋白質(zhì)在病毒復(fù)制過程中的作用以及病毒粒子包裝出芽等。正因為如此， 藍耳病的免疫機理至今也不完全清楚。

2 PRRSV能破壞機體免疫機能，逃避免疫系統(tǒng)監(jiān)視，極容易繼發(fā)其他病原的混合感染

PRRSV的危害性主要在于破壞巨噬細胞，巨噬細胞是機體免疫一道防線，能夠吞噬侵入體內(nèi)的細菌和病毒（除藍耳病病毒外），巨噬細胞的破壞造成機體抵抗細菌和病毒能力下降。 PRRSV侵染細胞的方式是首先和豬肺泡巨噬細胞（PAM）上的受體結(jié)合，造成大量PAM裂解，使機體免疫系統(tǒng)遭到損失, 受損崩潰的細胞, 進入血液循環(huán)和淋巴循環(huán),導(dǎo)致病毒血癥的形成及全身淋巴結(jié)的感染。大量研究表明，PRRSV 感染早期可引起豬肺泡巨噬細胞和外周血單核細胞的凋亡，影響細胞免疫和體液免疫功能，導(dǎo)致機體的免疫抑制，從而逃避機體的免疫監(jiān)視。PRRSV逃避體液免疫系統(tǒng)監(jiān)視的可能原因是由于PRRSV氨基酸N-糖鏈存在空間位阻作用而影響中和抗體對中和表位(PNE)的有效識別，從而降低了中和抗體的作用，使PRRSV能夠逃避機體的清除作用與免疫保護；或者是因為中和表位中氨基酸的突變使之與中和抗體的結(jié)合受到影響，從而使中和抗體不能識別PRRSV。鑒于上述原因，如果PRRSV在豬群中不能被凈化，將在整個豬群中發(fā)生循環(huán)感染。并且，極容易引起繼發(fā)其他細菌或病毒（如志賀氏桿菌、 胸膜肺炎嗜血桿菌、偽狂犬病病毒、副流感病毒、豬圓環(huán)病毒II 型等）感染而使疾病的癥狀加重。

3 PRRSV感染后，形成的抗體有效性低

PRRSV抗體的形成機制很復(fù)雜。在其抗體中包括對PRRSV具有中和（殺滅）作用的中和抗體和不具有中和作用的非中和抗體。PRRSV 感染后，其結(jié)構(gòu)中的核衣殼蛋白N和基質(zhì)蛋白M能夠較早誘導(dǎo)機體產(chǎn)生抗體，但無中和作用；囊膜蛋白E產(chǎn)生中和抗體，有一定的免疫保護作用。豬感染PRRSV 后9 d即可用ELISA 方法檢測到特異性抗體（非中和抗體），但中和抗體的產(chǎn)生相對較慢，一般是在感染PRRSV 后4～5周才出現(xiàn)，63～77 d后才慢慢升高，并且之后開始呈下降趨勢。在PRRSV抗體中無用抗體多,有用抗體很少，不僅有用抗體形成晚，而且有效性也低。研究發(fā)現(xiàn)，針對一般病毒, 只需要1個有用抗體就可以中和1個病毒粒子，但是PRRSV 非常特殊，需要10個有用抗體才能中和1個病毒粒子。藍耳病的病毒血癥發(fā)生在中和抗體出現(xiàn)之前，通常所產(chǎn)生的中和抗體不足以控制病毒復(fù)制，不但不能發(fā)揮保護作用，甚至因為下面要提及的ADE作用，可能對豬有害。

當前采用ELISA檢測的PRRSV抗體，并非是中和抗體，其抗體呈陽性只能說明機體被病毒感染，并不意味著會出現(xiàn)臨床癥狀，也不代表具有保護性， 這也是和其他病毒不一樣之處。甚至還有一種觀點認為，因為PRRSV的N蛋白在病毒結(jié)構(gòu)內(nèi)部，當其產(chǎn)生非中和抗體時，也是PRRSV對機體破壞最嚴重的時候。因此，N蛋白抗體水平越高，暗示PRRSV在體內(nèi)的毒力越強。相反，對于一個長期免疫弱毒苗的豬場來說，如果其群體的N蛋白抗體水平越整齊、越低，說明疫苗株的毒力越低、越安全，該豬場越穩(wěn)定。

4 PRRSV抗體依賴性增強作用

所謂PRRSV抗體依賴性增強作用（ADE）是指PRRSV 在感染豬體內(nèi)誘發(fā)中和抗體時, 在低滴度的中和抗體( 亞中和抗體水平)情況下， 不但不能有效地清除血液中的病毒，反而與病毒形成病毒-抗體復(fù)合物，病毒借助抗體的Fc 片段與Fc受體陽性細胞（如PAM 等巨噬細胞）結(jié)合, 促進病毒進入細胞，并感染之。這就是說，在抗體水平較低時，PRRSV的中和抗體不但不能中和PRRSV，反而促進其對豬巨噬細胞的感染。研究表明，PRRSV的ADE作用在豬體內(nèi)外都能表現(xiàn)，妊娠后期的胎兒出現(xiàn)的主動免疫應(yīng)答而形成的抗體對跨胎盤感染的PRRSV的ADE效應(yīng),可能是母豬妊娠后期流產(chǎn)的重要原因之一。

正是因為PRRSV的這些難以駕馭的特性，給疫苗的研究造成了很大困難，所以至今尚無有效的疫苗能很好控制豬藍耳病。雖然當前有多種疫苗（包括滅活苗、弱毒苗、經(jīng)典藍耳病和高致病性藍耳病病毒苗等）在養(yǎng)豬生產(chǎn)中應(yīng)用，但其有效性很難評定。

生產(chǎn)中應(yīng)用得比較多的是弱毒苗，對這類苗的作用，多數(shù)學者的看法是可以應(yīng)對同類型毒株攻毒, 但其機理不全清楚。然而，PRRSV極容易變異，美國Chang 等（2002）在研究中發(fā)現(xiàn)：3頭SPF豬接種藍耳病病毒第7天即發(fā)生變異。用接種豬病料連續(xù)傳遞6 代，在7代所有21頭試驗豬中均分離到3～6個核苷酸發(fā)生變異的藍耳病病毒。由于PRRSV易變特性使其能夠應(yīng)對同類型毒株的攻毒的正面效應(yīng)也受到限制，變異后的PRRSV在基因型上即使僅有1%的差異也沒有交叉保護作用。這或許就是某些豬場使用弱毒苗開始時效果明顯，時間久了又沒有效果的原因。何成鑄(2011）在使用國產(chǎn)弱毒苗的規(guī)?；i場發(fā)現(xiàn)：第1年免疫時，豬群的狀態(tài)穩(wěn)定，但連續(xù)使用4 年左右弱毒苗的豬場出現(xiàn)了毒株變異，疫病難以控制的情況。目前使用的藍耳病病毒疫苗雖不能阻止病毒感染, 但能在一定程度上減輕發(fā)病程度。

同時，藍耳病病毒苗的使用也存在一定負面影響，尤其是對于那些使用弱毒苗全群普免或跟胎免疫的豬場，由于PRRSV具有與抗體共存的特性，弱毒在豬群內(nèi)的長期存在，造成持續(xù)的水平感染和垂直感染；同時還存在弱毒還有返強風險。另外，對母豬的產(chǎn)仔也有不利的影響，Dewey等發(fā)現(xiàn)妊娠期免疫弱毒苗導(dǎo)致活仔數(shù)減少，死胎、木乃伊增多。筆者通過對多個豬場的調(diào)查也發(fā)現(xiàn)了同樣的現(xiàn)象。

總之，藍耳病疫苗的使用，有利有弊。如何用其利、避其弊要因豬群而異。然而，理論和實踐都證明當前的疫苗在控制豬藍耳病方面不具有決定意義。

盡管PRRSV看來“殺氣”十足，難以駕馭，但仍然有其軟肋，可以攻其軟肋達到控制豬藍耳病的目的。PRRSV的軟肋及其采取的措施是：

1）PRRSV在環(huán)境中很不穩(wěn)定，怕熱、怕酸、怕堿、怕干燥。在37 ℃下，感染力僅能保持3～24 h；56 ℃，僅保持6～20 min。pH 值低于6 或高于7.5，病毒感染力迅速喪失。根據(jù)病毒這一特性，通過加強豬舍內(nèi)外環(huán)境和器械的消毒來殺滅病原。普通的消毒劑，如酸堿類（燒堿）、醛類（戊二醛）、季銨鹽類（新潔爾滅）等，殺滅PRRSV都很有效；用脂溶劑（如氯仿和乙醚）去污劑處理后，PRRSV病毒囊膜被破壞，便很快失去感染性。同時，創(chuàng)造良好的豬舍環(huán)境，特別要注意降低豬舍濕度、保持干燥，病毒便難以生存繁衍。

2)感染PRRSV的豬具有自我康復(fù)的能力。這是有別于其他病毒（如豬瘟病毒、豬偽狂犬病毒）的一個重要特性。豬體感染PRRSV后, 由急性感染逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)槌掷m(xù)感染, 隨后康復(fù), 大多數(shù)感染動物最終能夠從機體將病毒清除, 但其機制仍是個謎。感染過PRRSV的豬，如果沒有其他繼發(fā)感染或混合感染，大約4～5個月后被感染豬已不再向外散毒，大部分豬群的抗體就會轉(zhuǎn)陰。根據(jù)病毒這一特性，專家們提出了凈化藍耳病策略。藍耳病凈化方案可以概括為：人工主動感染——封群排毒凈化。

第1步：人工主動感染。人工主動感染就是人為讓PRRSV感染整個豬群。其方法主要有：①用本場陽性豬的病毒血清對每頭豬接種，對接種的血清要求藍耳病病毒毒株單一，進行定量稀釋，接種后并實行有效隔離。②將本場仍在排毒的康復(fù)豬與陰性豬大致按1:10比例同欄混養(yǎng)。③對每頭豬注射PRRSV弱毒苗。后兩者實施較簡便，也較安全，在國內(nèi)豬場應(yīng)用較為普遍。人工感染的重點在后備種豬群，后備豬通過血清馴化、同群感染或疫苗免疫，經(jīng)過穩(wěn)定期后入群，危害最小。

為何要“引狼入室”、進行人工主動感染？這是因為：①被PRRSV感染的豬具有自我康復(fù)的特性，對于不具有這一特性的病毒?。ㄈ缲i瘟、豬偽狂犬病）決不可實施人工主動感染。②動物感染某個毒株后，如果下次再感染相同的毒株，其免疫效力非常高。通常認為這種同源免疫力持續(xù)期很長，但是否是終生的還不是很清楚。這說明豬體對PRRSV誘導(dǎo)的免疫反應(yīng)保持著記憶。在當前國內(nèi)一片“藍”的形式下，即使你的豬場是陰性，還是建議對小豬或后備豬進行安全的人工主動感染（如弱毒苗低劑量免疫），否則，藍耳病或遲或早突然來襲將導(dǎo)致重大損失。③豬體接受低劑量病毒（感染而不使豬發(fā)?。┑乃较?，病原對豬實際上是一種免疫刺激，或者稱為馴化，使豬產(chǎn)生免疫反應(yīng)，提高對病原的免疫力，甚至可以形成豬與病原共生局面。筆者在對一些沒做過藍耳苗免疫、且豬群穩(wěn)定的豬場的調(diào)查中發(fā)現(xiàn)：其豬群并非藍耳病陰性，只不過其豬群抗體保持在一個低而均衡的水平上而已。這種豬群和病原的和平共處實際上也是中醫(yī)中“正邪陰陽平衡”的反應(yīng)。

第2步：封群排毒凈化。封群就是停止引進陰性豬，藍耳病的散毒期約40多d，再長也就是80多d，而凈化則需要2倍的時間，一般是200 d。封群凈化成功的關(guān)鍵就是在封群期間（包括凈化以后的時期）不能再次、反復(fù)被PRRSV感染。因此，有效的生物安全措施十分重要。根據(jù)傳染病發(fā)生的3個必須條件（傳染源—傳染媒介—易感動物），嚴格控制傳染源、徹底阻斷傳染媒介、通過飼養(yǎng)管理增強豬的非特異性免疫力是防止感染的關(guān)鍵。公認的有效措施是：多點式生產(chǎn)、初產(chǎn)和經(jīng)產(chǎn)母豬分線生產(chǎn)和全進全出。防止引種和車輛帶入病原是極為重要的，必要引種時對被引入的豬要進行病原檢測、抗體檢測和隔離，對進場車輛必須嚴格消毒。此外， PRRSV還可以通過氣溶膠（懸浮在空氣中的液態(tài)或固態(tài)微粒）形式傳播。在實踐中，阻止空氣傳入病原是一個很棘手的問題。豬舍安裝空氣過濾設(shè)備無疑是阻止空氣傳播的最好辦法，只是成本太高難以在國內(nèi)普遍推廣。比較現(xiàn)實的做法是在生產(chǎn)規(guī)模較大的豬場，可在公豬站或公豬!安裝空氣過濾設(shè)備。國內(nèi)已有豬場如此，效果不錯。對于沒有條件安裝空氣過濾設(shè)備的豬場，要采取減少空氣傳播幾率的措施：一是保持豬場間有足夠的距離，但在養(yǎng)豬密集地區(qū)很難做到這一點；二是加強豬場周邊環(huán)境（包括豬場建筑的屋頂、圍墻、樹木等）消毒，尤其是周邊疫情流行時期更須加強此項措施。

3)PRRSV對某些抗生素敏感。我們知道，抗生素一般對病毒無效，但某些抗生素（如大環(huán)內(nèi)酯類的泰萬菌素——酒石酸乙酰異戊酰泰樂菌素和替米考星）對PRRSV的感染具有間接抑制作用。其主要作用機制：一是本類藥物能抑制病原菌包括支原體對呼吸道的破壞，保護呼吸道的黏膜免疫；二是此類藥物，尤其是泰萬菌素能刺激巨噬細胞數(shù)量的增長。馬德慧等（2003）用實驗分別考查了泰萬菌素 、替米考星和紅霉素對巨噬細胞的刺激生長作用。 結(jié)果表明,泰萬菌素對巨噬細胞的生長刺激作用均比替米考星和紅霉素高出80% 。E.Thacker（2008）用試驗證實了泰萬菌素對PRRSV的間接抑制作用，試驗將68頭仔豬分成3組，分別給予泰萬 菌 素 100 mg/kg、200 mg/kg， 連續(xù)給藥4周，另設(shè)一個不加藥對照組。給藥7 d后，接種藍耳病強毒VR2385株。結(jié)果顯示用藥組仔豬的增重顯著高于對照組；肺部組織學病變方面，用藥組顯著輕于對照組；臨床癥狀顯著改善。更重要的是，藍耳病在肺部的復(fù)制數(shù)量極顯著低于未用藥組，泰萬菌素可使藍耳病病毒在肺部的拷貝數(shù)降低了80%～85%。由此看來，泰萬菌素（其商品藥名治嗽靜、愛樂新）在協(xié)助控制藍耳病方面有著不可忽視的作用；另外，它對豬肺炎支原體、胞內(nèi)勞森氏菌、豬痢疾密螺旋體等病原的強力殺滅作用在防止病豬的繼發(fā)感染方面起著重要作用。繼發(fā)感染對于感染了藍耳病的豬如同火上加油，助紂為虐，將會給豬群帶來更大的損失。因此，在凈化藍耳病的過程中，適當使用抗菌素控制細菌性疾病的繼發(fā)感染十分必要；當然，對幾種主要的、且已有疫苗有效控制的病毒性疾病（豬瘟、豬偽狂犬病、口蹄疫、乙腦、細小病毒病等）的免疫也是必不可少的。

行將結(jié)束本文之際，解釋一下題意以作為本文的總結(jié)。文章標題中“避其鋒”，是指在當前面對PRRSV難以駕馭的特性、而暫時又無有效疫苗的情況下，不要過度地用疫苗與PRRSV交鋒，不要過高地期望疫苗，應(yīng)避開PRRSV鋒芒；“擊其虛”，就是針對PRRSV的軟肋，采取有效手段而攻之。這樣就可變被動為主動，實現(xiàn)控制豬藍耳病之目的。

略