腦梗死患者血清抵抗素水平與超敏C反應(yīng)蛋白的相關(guān)性

岳 紅， 楊 波， 趙仁亮

抵抗素(resistin)是近年來發(fā)現(xiàn)的一種與胰島素抵抗密切相關(guān)的多肽類激素，由 Steppan等［1］于2001年在研究抗糖尿病藥物噻唑烷二酮(TZDs)的作用機(jī)制時(shí)首次報(bào)道。抵抗素在動(dòng)脈粥樣硬化性疾病中的作用機(jī)制也在進(jìn)一步研究之中。

本研究通過檢測急性動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死患者血清抵抗素與超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)的水平變化，探討二者在腦梗死發(fā)病中的相互作用，為腦血管病的防治提供理論依據(jù)和臨床指導(dǎo)。

1 研究對象與方法

1．1 對象 (1)腦梗死組:82例，其中男48例，女34例，年齡42～80歲，平均(61．2±12．3)歲。診斷符合全國第四屆腦血管病學(xué)術(shù)會(huì)議修訂的動(dòng)脈粥樣硬化性血栓性腦梗死的診斷標(biāo)準(zhǔn)，均為前循環(huán)腦梗死，發(fā)病72h內(nèi)入院。既往有明確的糖尿病、心肌梗死、心功能不全、甲狀腺疾病、胰腺疾病、惡性腫瘤、肝腎功能不全史以及近期感染、妊娠患者及自身免疫性疾病者均排除在外。(2)健康對照組:50例，其中男29例，女21例，年齡45～78歲，平均(58．1±10．3)歲。為同期健康體檢者，排除心腦血管病、糖尿病、自身免疫性疾病、惡性腫瘤及新近發(fā)生感染性疾病。對所有研究對象均做標(biāo)準(zhǔn)的身高、體質(zhì)量、腰圍、臀圍、收縮壓(SBP)、舒張壓(DBP)的測量，并計(jì)算體質(zhì)量指數(shù)(BMI)及腰臀比(WHR)。

1．2 方法 腦梗死患者于入院次日清晨、對照組在任意天清晨空腹肘靜脈采血6ml，分兩管。一管立即加入含有EDTA-Na2和抑肽酶的試管內(nèi)，充分混勻后離心(3000r/min，0 ～4℃，10min)，取上清－70℃凍存待測血清抵抗素、瘦素、胰島素(FINS)。另一管送檢超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)、血糖和血脂。計(jì)算定量胰島素敏感性檢測指數(shù)(quantitative insulin sensitivity check index，QUICKI)［2］:QUICKI=1/［lg空腹血清胰島素(mIU)/L+lg空腹血糖(mg/dl)］。血清抵抗素濃度、瘦素濃度采用ELISA法測定，試劑盒分別購自美國phoenix pharmaceuticals Inc和美國DSL公司。胰島素水平采用放射免疫法測定。hs-CRP、空腹血糖(FBG)、三酰甘油(TG)、總膽固醇(TC)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)均采用全自動(dòng)生化分析儀測定。

2 結(jié)果

2．1 腦梗死組和正常對照組臨床基線資料的比較 兩組的年齡和BMI的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0．05)，腦梗死組的 WHR、SBP和 DBP均明顯高于正常對照組(P＜0．01)(見表1)。

2．2 腦梗死組和正常對照組血清抵抗素、hs-CRP的比較 腦梗死組血清抵抗素和hs-CRP均明顯高于正常對照組(P＜0．05)(見表2)。

2．3 血清抵抗素水平與hs-CRP的單因素相關(guān)性分析 對全部受試者的血清抵抗素水平與hs-CRP進(jìn)行單因素相關(guān)性分析顯示，抵抗素與hs-CRP呈顯著正相關(guān)(r=0．252，P＜0．05)。

2．4 抵抗素影響因素的多元逐步回歸分析以抵抗素為因變量，其他所有觀察指標(biāo)為自變量對腦梗死組進(jìn)行多元逐步回歸分析，結(jié)果顯示，抵抗素與hs-CRP、BMI、SBP、LDL-C 呈顯著正相關(guān)(P＜0．05)，而與 HDL-C、QUICKI呈顯著負(fù)相關(guān)(P＜0．05)(見表3)。

表1 兩組基線資料的比較

表2 兩組血清抵抗素和hs-CRP的比較(±s)

表2 兩組血清抵抗素和hs-CRP的比較(±s)

觀察指標(biāo) 對照組(n=50) 腦梗死組(n=82) t值 P值抵抗素(μg/L)hs-CRP(mg/L)28．34 ±6．32 3．24 ±1．06 39．46 ±11．65 7．53 ±2．87 6．209 10．144 0．000 0．000

表3 抵抗素影響因素的多元逐步回歸分析

3 討論

3．1 抵抗素的生理功能與調(diào)節(jié)因素 抵抗素屬于富含半胱氨酸的RELM(resistin like molecules)/FIZZ分泌蛋白家族，在人體的編碼序列定位于19號染色體上。循環(huán)中的抵抗素主要以三聚體和六聚體存在，在生物體中起主要生理功能的是低聚體形式。抵抗素的表達(dá)具有組織特異A性，人類抵抗素表達(dá)水平最高是在骨髓，外周血單核(PMBC)/巨噬細(xì)胞高表達(dá)抵抗素基因，巨噬細(xì)胞浸潤的AS動(dòng)脈瘤可檢測到抵抗素的分泌［3］，提示其與AS的相關(guān)性。

作為脂肪因子，抵抗素復(fù)雜的生理功能受到了國內(nèi)外研究者的共同關(guān)注。抵抗素是脂肪細(xì)胞分化成熟的反饋調(diào)節(jié)因子，并與IR及糖尿病的發(fā)生密切相關(guān)［1］。糖尿病人體內(nèi)抵抗素水平顯著升高;db/db小鼠血漿抵抗素水平上調(diào)［1］;對由飲食誘導(dǎo)的肥胖、IR、高血糖小鼠使用抵抗素抗體中和治療后，觀察到血糖的降低和胰島素敏感性顯著提高。多種因素對于抵抗素具有調(diào)節(jié)作用。除葡萄糖、胰島素及過氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)外，多種炎癥相關(guān)細(xì)胞因子與抵抗素的表達(dá)水平相關(guān)，提示抵抗素是連接 IR 與炎癥的紐帶［4～7］。

3．2 急性腦梗死患者血清抵抗素水平的變化本研究測定動(dòng)脈粥樣硬化性腦梗死及正常對照者的血漿抵抗素水平，發(fā)現(xiàn)腦梗死組顯著高于對照組，提示抵抗素可能在腦梗死發(fā)生和發(fā)展過程中發(fā)揮著重要的作用，結(jié)論與以往研究一致［8，9］。大量流行病學(xué)資料顯示，抵抗素與動(dòng)脈粥樣硬化具有相關(guān)性。作為一種促炎因子，抵抗素可以通過導(dǎo)致內(nèi)皮功能失調(diào)，促平滑肌增殖遷移，促巨噬細(xì)胞的脂質(zhì)沉積，導(dǎo)致脂質(zhì)代謝紊亂等途徑，促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化的發(fā)生與發(fā)展［4］。抵抗素具有抵抗胰島的作用，機(jī)制可能是與胰島素敏感組織上的受體結(jié)合，對胰島素信號通路上的多個(gè)位點(diǎn)起作用。基因重組的抵抗素能降低胰島素激發(fā)的脂肪細(xì)胞的糖攝取及胰島素的敏感性;體外細(xì)胞學(xué)試驗(yàn)顯示，抵抗素可使胰島素誘導(dǎo)的脂肪細(xì)胞5T3-L1對葡萄糖的攝取減少，而抵抗素抗體則起相反作用。抵抗素與脂肪分泌的另一種多肽類激素瘦素聯(lián)合影響機(jī)體的能量代謝和平衡，可能是聯(lián)系心腦血管功能和代謝功能之間的橋梁，并通過其參與腦梗死的發(fā)生［8］。

3．3 腦梗死患者血清抵抗素水平與超敏C反應(yīng)蛋白的關(guān)系 CRP是一種能與肺炎球菌莢膜C多糖物質(zhì)反應(yīng)的急性期反應(yīng)蛋白，目前被公認(rèn)為是與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系密切的炎癥標(biāo)志物［10］。CRP的傳統(tǒng)測定方法因缺乏較高的靈敏度己不足以預(yù)測心腦血管事件的危險(xiǎn)，隨著檢驗(yàn)技術(shù)的發(fā)展以及新的儀器和相關(guān)試劑的出現(xiàn)，目前臨床常規(guī)CRP的測定不僅能定量而且能夠達(dá)到微量快速，在低濃度CRP測定范圍內(nèi)有很高的準(zhǔn)確度。近年報(bào)道的膠乳增強(qiáng)的免疫散射比濁法、免疫透射比濁法和免疫發(fā)光法等檢測低限可達(dá)0．005～0．1Omg/L，用這些方法所進(jìn)行的CRP的測定稱為超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)。

臨床研究表明，CRP水平的增高與急性腦梗死的發(fā)生有關(guān)，急性腦梗死患者血清CRP水平顯著高于正常對照組，血清CRP濃度升高將預(yù)示著腦卒中或血管斑塊的不穩(wěn)定，直接發(fā)揮致炎作用而影響腦梗死的病情和預(yù)后［11，12］。CRP水平增高與急性腦梗死病情嚴(yán)重程度之間的關(guān)系已有報(bào)道［11，13］。許多大規(guī)模前瞻性研究支持hs-CRP為心、腦血管疾病獨(dú)立危險(xiǎn)因子，內(nèi)科醫(yī)生健康研究(PHS)［14］入選健康男性1086例，測定hs-CRP基線水平，隨訪5年中，出現(xiàn)心肌梗死、卒中、靜脈血栓形成的543例，未出現(xiàn)上述事件的543例男性作為對照。結(jié)果表明:在吸煙和非吸煙hs-CRP基線水平皆為預(yù)測腦梗死和心肌梗死獨(dú)立且強(qiáng)有力的預(yù)測因子;與其他傳統(tǒng)及新出現(xiàn)的危險(xiǎn)因素相比，hs-CRP預(yù)測未來心、腦血管危險(xiǎn)價(jià)值更好，而聯(lián)合hs-CRP和TC/HDL-C比值進(jìn)行危險(xiǎn)分層則更有價(jià)值。Paul M認(rèn)為“如果你的目的是確定患者發(fā)生心腦血管疾病風(fēng)險(xiǎn)有多高，那么hs-CRP試驗(yàn)加上標(biāo)準(zhǔn)膽固醇篩選，將很可能大大提高你的診斷能力”［15］。

本研究結(jié)果顯示，腦梗死組的血清hs-CRP濃度明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，進(jìn)一步證實(shí)hs-CRP與腦梗死有關(guān)，與以往研究結(jié)果相符。其原因可能是動(dòng)脈粥樣硬化是炎癥性疾病，長期慢性炎癥刺激導(dǎo)致局部白細(xì)胞或血小板對內(nèi)皮細(xì)胞黏附性和通透性的增加，促使血凝，誘導(dǎo)產(chǎn)生血管活性因子和細(xì)胞因子等，導(dǎo)致CRP合成增多，內(nèi)皮細(xì)胞損害，使擴(kuò)血管物質(zhì)釋放減少，從而增加內(nèi)皮細(xì)胞與血小板和白細(xì)胞的黏附，導(dǎo)致血管病變和血栓形成。

本研究還對抵抗素的諸多影響因素進(jìn)行了多元逐步回歸分析，hs-CRP仍被列入回歸方程。血清抵抗素濃度與hs-CRP濃度呈明顯正相關(guān)，其原因可能是肥大的脂肪細(xì)胞分泌IL-6增多(CRP主要由IL-6誘導(dǎo)肝合成)，而IL-6認(rèn)為是最具有內(nèi)分泌特征的細(xì)胞因子，可增加急性炎癥反應(yīng)產(chǎn)物而促進(jìn)動(dòng)脈粥樣硬化。Morrow等［16］研究表明，BMI≥30的患者CRP水平是BMI≤25患者的兩倍。脂肪細(xì)胞通過CRP介導(dǎo)分泌的抵抗素與免疫系統(tǒng)密切相關(guān)，組成內(nèi)分泌和免疫網(wǎng)絡(luò)，可能與糖代謝和心腦血管病的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)。

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