三種不同染色方法在TCT(液基細(xì)胞學(xué))檢查中的應(yīng)用

蔡中文

湖北省蘄春縣人民醫(yī)院，湖北 蘄春 435300

近幾年來，采用液基細(xì)胞學(xué)取樣進(jìn)行陰道脫落細(xì)胞檢查在國內(nèi)外得到很大的普及，它改變了傳統(tǒng)的手工涂片的方法，制片效果好，利于觀察，陽性檢出率高，是細(xì)胞病理學(xué)檢查的一大改革。液基制片后的染色效果直接關(guān)系到檢測(cè)的結(jié)果，細(xì)胞學(xué)的常用染色方法有瑞氏染色、巴氏染色、H-E染色，效果都不錯(cuò)。但對(duì)于液基細(xì)胞學(xué)來說，通過比較，H-E染色效果是最理想的選擇。

1 材料與方法

1.1 液基細(xì)胞制片，使用的是孝感亞光醫(yī)用電子技術(shù)有限公司生產(chǎn)的細(xì)胞保存液 (成分為：乙醇、甲醇、氯化鈣、碳酸氫鈣、葡萄糖等)通過VCT-2000細(xì)胞制片機(jī)、95%酒精固定30min、水沖洗，分別用瑞氏、巴氏、H-E三種染色法。

1.2 瑞氏染色：在液基細(xì)胞涂片上滴數(shù)滴瑞氏染液，覆蓋整個(gè)細(xì)胞薄層，后再按1∶2加倍沖液，染色10min。

1.3 巴氏染色：液基細(xì)胞涂片置蘇木素3min、水沖洗、鹽酸酒精分化5S，水沖洗堿水反藍(lán)，95%酒精一過，桔黃一過，95%酒精洗3次，EA-50染色2min，95%酒精1min、無水酒精2min、無水酒精5min、二甲苯2min中性樹膠封片。

1.4 H-E染色，液基細(xì)胞涂片置蘇木素5min，水沖洗，10%鹽酸酒精分化5S，水沖洗0.5%，伊紅染色2min，水沖洗，95%酒精1min，無水酒精2min，無水酒精5min，二甲苯2min，中性樹膠封片。

2 結(jié)果

染色后鏡下發(fā)現(xiàn)

瑞氏染色：偏藍(lán)灰，細(xì)胞核、細(xì)胞漿對(duì)比不明顯;

巴氏染色：大部分著色較好，色彩鮮艷，不足部分為部分細(xì)胞偏紅核周有伊紅著色較深處，與核分界不清;

H-E染色：細(xì)胞核、細(xì)胞質(zhì)染色分明，紅蘭適度。

3 討論

在傳統(tǒng)的細(xì)胞涂片中，瑞氏染色效果較好，因其省時(shí)、方便、快捷，而被廣泛采用，但此法適用于血片，胸腹水，淋巴穿刺液涂片，但在液基細(xì)胞保存液中，細(xì)胞保存時(shí)間可較長，適合大批量細(xì)胞學(xué)篩查，因含防腐劑對(duì)細(xì)胞的影響而對(duì)染色的要求較高，細(xì)胞學(xué)檢查中，核的變化是主要因素，把細(xì)胞核染好，核漿對(duì)比鮮明是最重要的。瑞氏染液對(duì)液基細(xì)胞染色不好，核漿對(duì)比不鮮明，瑞氏染色過程中不易掌握，易污染，故不采用。巴氏染液對(duì)大部分來自上皮和間皮的標(biāo)本染色較好，細(xì)胞核結(jié)構(gòu)清晰，分色明顯，透明度好，胞漿著色鮮艷，色彩豐富鮮艷，胞內(nèi)結(jié)構(gòu)清晰，染色效果好，是細(xì)胞病理學(xué)檢查常用的方法，尤其是觀察女性雌激素水平對(duì)陰道上皮細(xì)胞的影響。少數(shù)有部分細(xì)胞核偏紅，核周有伊紅著色較深處，與核分界不清的情況，并且染色時(shí)間長、操作繁瑣。H-E染色透明度好，核漿對(duì)比鮮明，染液的滲透性強(qiáng)，適合液基細(xì)胞染色。

H-E染色不理想的彌補(bǔ)，如染色較淺，可分別進(jìn)行蘇木素及伊紅復(fù)染;如用蘇木素使涂片染色過深，后用鹽酸酒精處理，可以去除過多的染色，隨時(shí)用顯微鏡觀察涂片，直到背景干凈、至滿意為止。

［1]張賽霞，張立群.幾種血涂片染色方法比較［J].實(shí)用醫(yī)技雜志，2007，3(14)7.

［2]栗艷玲，朱東新，等.液基細(xì)胞學(xué)及TBS診斷報(bào)告系統(tǒng)［J].中外醫(yī)學(xué)研究，2010，(8)：190.