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    椒目化學(xué)成分及藥理作用研究進(jìn)展*

    2012-01-25 01:09:55卿秦劍歐
    中國中醫(yī)急癥 2012年5期
    關(guān)鍵詞:亞麻酸花椒哮喘

    李 卿秦 劍歐 燕

    (1.重慶中藥研究院,重慶 400065;2.重慶市食品藥品檢驗(yàn)所,重慶 401121;3.成都中醫(yī)藥大學(xué),四川 成都 610075)

    椒目為蕓香科(Rutaceae)花椒屬植物花椒(Zanthoxylum bungeanum Maxim)的干燥成熟種子,我國大部分地區(qū)均有分布。該藥味苦、辛,性寒,有小毒,具有利水、平喘之功,主治水腫脹滿、痰飲喘逆等癥。椒目主要含有脂肪酸、揮發(fā)油、氨基酸和微量元素等成分。藥理學(xué)研究表明,椒目具有抗血栓形成、調(diào)血脂、平喘鎮(zhèn)咳及抗炎等藥理作用。本文對椒目化學(xué)成分以及藥理活性作一綜述,以期為進(jìn)一步研究開發(fā)提供有價(jià)值的參考。

    1 化學(xué)成分研究

    1.1 脂肪酸 試驗(yàn)分析發(fā)現(xiàn)[1],花椒種籽油由棕櫚酸、棕櫚油酸、硬脂酸、油酸、亞油酸、亞麻酸及在該種籽油中未見報(bào)道的十七碳烯酸組成。主要成分油酸、亞油酸、亞麻酸的混合含量高達(dá)57.549%~87.907%。王捷頻等[2]將椒目仁樣品酯化后,采用氣相色譜法檢測α-亞麻酸含量,結(jié)果表明在該色譜條件下測得椒目仁油中α-亞麻酸的平均含量為70.47%,說明椒目仁油中含有較多的α-亞麻酸。楊倩等[3]將椒目皂化酸解得有利的混合脂肪酸,依次經(jīng)梯度冷凍、尿素包合及硝酸銀絡(luò)合,得到高純度α-亞麻酸,其含量高達(dá)91.6%以上;并采用傳統(tǒng)壓榨技術(shù)、超臨界CO2流體萃取儀和化學(xué)試劑(石油醚、甲醇、乙醚、丙酮等)萃取等提取椒目仁油,以提油的收油率、α-亞麻酸含量等為指標(biāo),經(jīng)比較發(fā)現(xiàn)適于工業(yè)化生產(chǎn)椒目仁油的方法依次是壓榨>超臨界CO2流體萃取>化學(xué)萃取法[4]。

    1.2 揮發(fā)油 趙興紅等[5]采用閃蒸-毛細(xì)管氣相色譜-質(zhì)譜法分析了椒目中的揮發(fā)性成分,鑒定出19個(gè)化合物,占總色譜峰面積的70.53%,其中芳樟醇、月桂烯量較高,分別為18.5%、10.2%。李迎春等[6]采用GC-MS技術(shù)分析了椒目超臨界CO2萃取物,分離出59個(gè)組分,鑒定出其中35種化合物,占出峰總面積的96.22%。單萜、倍半萜及其含氧衍生物占4.03%。任世禾等[7]采用GC法對5個(gè)產(chǎn)地椒目藥材中檸檬烯的量進(jìn)行了測定,結(jié)果顯示,河南產(chǎn)椒目揮發(fā)油中檸檬烯量最高。不同產(chǎn)地椒目中檸檬烯的量差異顯著,其原因可能與生長條件、采收時(shí)期及加工貯存方法等有關(guān)。

    1.3 微量元素 莊世宏等用原子吸收分光光度法對精制后的椒目油進(jìn)行分析,結(jié)果顯示,椒目油中含有Na、Ca、K、Mg、Fe、Sr、Mn 等 13 種礦物元素,其中 Na、Ca、K、Mg 量較高,F(xiàn)e、Zn、Sr、Mn也較豐富,重金屬元素鉛、鎘的量符合食用衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)。楊倩等[8]采用樹脂分離與原子熒光光譜法相結(jié)合,建立了中藥椒目中砷的層次分離的形態(tài)分析方法,發(fā)現(xiàn)了椒目中的砷以無機(jī)態(tài)砷為主;甲醇-水(4∶1)對椒目中砷的浸提率高,椒目水可煎出總砷的53.7%~62.3%。涂劍波等[9]采用原子吸收分光光度法,分析了不同產(chǎn)地椒目中的鋅含量及其形態(tài)。結(jié)果發(fā)現(xiàn)椒目中的鋅以水可煎出態(tài)為主;不同產(chǎn)地椒目鋅含量不同,但水可煎出態(tài)總鋅百分率、有機(jī)態(tài)總鋅百分率基本接近。

    1.4 氨基酸 李桂華等[10]經(jīng)實(shí)驗(yàn)分析證實(shí),脫脂椒目仁中含有多種氨基酸,包括甘氨酸、丙氨酸、天門冬氨酸、蘇氨酸、胱氨酸、絲氨酸、谷氨酸等17種氨基酸。必需氨基酸的量與大豆相比,除賴氨酸較低外,其余必需氨基酸量均高于大豆,說明椒目是一種較完全的蛋白質(zhì)資源。

    1.5 維生素 李桂華等[10]采用HPLC法對椒目油中的生育酚進(jìn)行測定。結(jié)果表明每10 g藥材中含α-生育酚27.1 mg,γ-生育酚0.3 mg,維生素E總量為274 mg。其中維生素E類型、量與紅花籽油、花生油類似,屬維生素E量中等的油脂。

    1.6 其他成分 王文澤等[11]還從椒目的乙酸乙酯萃取物中分離并鑒定出表兒茶素、槲皮素、24-烯-緩阿爾廷酮、辛二酸等4種化合物。椒目油中還含有很高的蠟質(zhì)(15%~20%),且主要存在于其種殼中。其蠟質(zhì)主要是一些高分子的脂肪酸與甾醇或脂肪醇(C26-C36)形成的醋,在較低溫度下(25℃以下)易結(jié)晶析出。椒目中除含有27.1%的油脂外,還含有30.23%的粗纖維及10%左右的水分、灰分及揮發(fā)性物質(zhì)。

    2 藥理學(xué)研究

    2.1 抗血栓作用 椒目的抗血栓成分主要是脂肪酸類的亞麻酸。早在90年代,研究者就花椒籽仁中α-亞麻酸含量為17%~24%。亞麻酸在體內(nèi)參與磷脂的合成,并代謝轉(zhuǎn)化為人體必需的EPA(二十碳五烯酸)和DHA(二十二碳六烯酸)。如今諸多研究發(fā)現(xiàn)亞麻酸缺乏是導(dǎo)致人類老年癡呆、癌癥、心腦血管疾病、高血壓、高血脂、糖尿病等疾病的重要誘因[12-13]。α-亞麻酸及其代謝物具有益智、保護(hù)視力、調(diào)血脂、降血壓、抑制血小板聚集、抗血栓形成、延緩衰老、抗過敏及抑制癌癥的發(fā)生和轉(zhuǎn)移等作用[14]。楊倩等[15]從椒目中提取和純化獲得高純度的α-亞麻酸,采用小鼠和大鼠在體血栓形成和肺動(dòng)脈栓塞等模型,分別觀察試藥對血小板在動(dòng)、靜脈旁路中絲線上的沉積、肺動(dòng)脈栓塞小鼠的死亡率、體外血小板聚集和出凝血時(shí)間等指標(biāo)。研究發(fā)現(xiàn)50 mg/kg,100 mg/kg和250 mg/kg高純度α-亞麻酸及混合不飽和脂肪酸(α-亞麻酸/亞油酸=1∶1)給小鼠灌胃治療 10 d,顯著延長出、凝血時(shí)間,明顯降低膠原蛋白-腎上腺素誘發(fā)性肺動(dòng)脈栓塞小鼠的死亡率;另外還發(fā)現(xiàn)35 mg/kg,70 mg/kg和175 mg/kg高純度α-亞麻酸及混合不飽和脂肪酸給大鼠灌胃治療10 d,明顯抑制血小板在動(dòng)-靜脈旁路中絲線上的沉積和大鼠體外血小板聚集。說明從椒目中提純的高純度α-亞麻酸和其混合不飽和脂肪酸均具有明顯抗血小板聚集和溶栓藥理作用,并具有一定量效關(guān)系;同時(shí)還發(fā)現(xiàn),當(dāng)α-亞麻酸/亞油酸=1∶1時(shí),其抗血栓藥理活性優(yōu)于同劑量高純度的α-亞麻酸。

    2.2 調(diào)血脂作用 衡亮等[16]利用花椒仁油對實(shí)驗(yàn)性高脂血癥小鼠給藥,發(fā)現(xiàn)給藥組血清膽固醇、三酰甘油、低密度脂蛋白顯著降低;高密度脂蛋白升高明顯,并呈現(xiàn)一定的量效關(guān)系;血細(xì)胞比容、血漿黏度、全血高切黏度、全血低切黏度、紅細(xì)胞聚集指數(shù)、高切還原黏度、低切還原黏度與模型組比較均顯著降低,紅細(xì)胞變形指數(shù)顯著升高;連續(xù)給藥對小鼠肝細(xì)胞有一定保護(hù)作用。說明花椒仁油具有治療小鼠高脂血癥的作用。劉永英等[17]在花椒仁油對實(shí)驗(yàn)性高脂血癥大鼠脂質(zhì)代謝的影響實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)花椒仁油組的膽固醇,三酰甘油,HBV,LBV降低,高密度脂蛋白增高,而肝組織勻漿的超氧化物岐化酶、氧化氫酶活性及抑制羥自由基能力均增強(qiáng),丙二醛含量降低。說明了花椒籽仁油具有調(diào)節(jié)血脂作用。肖會敏等[18]在椒目仁油對實(shí)驗(yàn)性高脂血癥家兔實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,給藥組能明顯降低膽固醇、三酰甘油、血液黏度以及明顯升高高密度脂蛋白。證明了椒目仁油調(diào)節(jié)血脂的作用主要依賴其中不飽和脂肪酸即α-亞麻酸與亞油酸,其調(diào)節(jié)血脂的效果隨著椒目仁油劑量的增加而加強(qiáng),同時(shí)隨著使用時(shí)間的延長而加強(qiáng)。

    2.3 平喘鎮(zhèn)咳及抗炎作用 任周新等[19]研究發(fā)現(xiàn)椒目榨油的平喘效果強(qiáng)于水煎劑。并且椒目乙醇提取物的平喘作用強(qiáng)于水提物,可以認(rèn)為椒目平喘不宜水煎。實(shí)驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)了椒目醇提物有明顯的止咳作用。陳洪謙等[20]研究發(fā)現(xiàn)椒目油不但能有效治療哮喘,而且還能有效防止氣道重建,其作用機(jī)制可能是抑制了Ⅲ型膠原和增殖細(xì)胞核抗原的生成。氣道重建是頑固性哮喘反復(fù)發(fā)病的基礎(chǔ)。而目前評價(jià)任何一個(gè)治療哮喘藥物,除了平喘、止咳之外,還要評價(jià)其是否有防止哮喘氣道重建的作用。謝柏梅等[21]在進(jìn)行椒目油對豚鼠哮喘模型肺組織中肥大細(xì)胞及血漿類胰蛋白酶的影響實(shí)驗(yàn)時(shí),發(fā)現(xiàn)椒目油能有效地減少哮喘豚鼠肺肥大細(xì)胞數(shù)量,抑制肥大細(xì)胞脫顆粒、釋放類胰蛋白酶。而肥大細(xì)胞特有的類胰蛋白酶是肥大細(xì)胞脫顆粒的標(biāo)志物,具有增高氣道反應(yīng)性、促進(jìn)炎癥細(xì)胞聚集及刺激多種細(xì)胞增殖的作用。說明椒目油能有效地治療哮喘。王俊琴等[22]觀察椒目油A2對哮喘支氣管嗜酸性粒細(xì)胞(EOS)浸潤與CD34細(xì)胞及骨髓粒系動(dòng)員的影響時(shí)發(fā)現(xiàn)椒目油A2和潑尼松顯著地減輕肺組織支氣管炎性反應(yīng)的病變程度如組織腫脹、重構(gòu)、增生、上皮細(xì)胞脫落等,抑制變應(yīng)源致敏刺激機(jī)體所致EOS增多和浸潤,明顯地減少哮喘小鼠氣管周圍及骨髓中EOS密度,抑制骨髓中幼粒細(xì)胞向嗜酸性粒細(xì)胞分化,同時(shí)支氣管區(qū)及骨髓中CD34+白細(xì)胞介素(IL)-5、CD34+IL-5R、CD34+CCR-3細(xì)胞數(shù)顯著減少,這與肺組織內(nèi)IL-5、IL-4、GM-CSF等細(xì)胞因子水平降低有關(guān)。

    王俊琴等[23]還觀察到椒目油A2能顯著減少哮喘小鼠各時(shí)點(diǎn)肺組織EOS、淋巴細(xì)胞(LY);降低各時(shí)點(diǎn)支氣管肺泡灌洗液中IL-5、IL-4,升高IFN-γ的水平;下調(diào)肺組織中細(xì)胞黏附分子-1、血管內(nèi)皮黏附分子-1、核因子抑制蛋白-α激酶、磷酸化核因子抑制蛋白的表達(dá),上調(diào)腫瘤壞死因子受體1和磷酸化核因子-KB65蛋白表達(dá)水平。

    趙睿等[24]進(jìn)行椒目油對支氣管哮喘豚鼠模型肺泡灌洗液中IL-4、IFN-γ水平及肺組織中NF-κB的影響,發(fā)現(xiàn)椒目油能有效降低豚鼠BALF中IL-4水平,升高IFN-γ含量,同時(shí)降低氣道高反應(yīng)性和NF-κB在哮喘豚鼠支氣管上皮中的表達(dá)。在過敏性疾病中,IL-4可以提高B細(xì)胞和單核/巨噬細(xì)胞CD23的表達(dá)及合成、可促進(jìn)B細(xì)胞自分泌、調(diào)控IgE的合成、活化巨噬細(xì)胞分泌炎性因子參與氣道炎癥的形成。

    戚好文等[25]用椒目油丸治療病程2年以內(nèi)的早期支氣管哮喘患者30例,用藥前后分別做肺功能、氣道激發(fā)試驗(yàn),同時(shí)檢測血清陽離子蛋白、免疫球蛋白及血嗜酸粒細(xì)胞數(shù),這些檢查項(xiàng)目在用藥前必須是異常結(jié)果,治療4周為1個(gè)療程。結(jié)果所有哮喘患者經(jīng)4周治療后臨床癥狀及體征和肺功能FEV、FVC、MMF、PEF較治療前都有明顯改善。說明椒目油丸能有效地治療早期哮喘患者,其機(jī)制是椒目油丸能降低哮喘氣道炎癥。

    3 結(jié) 語

    花椒的果皮藥食皆宜,備受人們喜愛。而椒目作為花椒去皮后的種子,價(jià)廉易得,長期以來未受到人們的重視,被當(dāng)做廢棄物。但令人欣慰的是椒目的藥理學(xué)研究如今取得了很大的進(jìn)展,對它的化學(xué)成分也有了更多的認(rèn)識,人們逐漸變廢為寶,對椒目進(jìn)行開發(fā)利用。但目前椒目研究基本上還停留在實(shí)驗(yàn)研究階段,對其有效成份的提取分離工作進(jìn)行得還不夠深入,對其藥理作用的機(jī)理研究還應(yīng)更加系統(tǒng)深入。總之,對椒目的基礎(chǔ)研究還有很多工作要做,相信在不久的將來,椒目定能在人們的日常保健中發(fā)揮越來越重要的作用。

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