藥品微生物限度檢查與藥品質量研究

王定貴

1 檢驗環(huán)境產(chǎn)生的影響

微生物限度檢查必須在一個單獨的潔凈度非常高的實驗室內(nèi)才能進行，并且實驗室還必須配置單獨的空氣凈化系統(tǒng)。其潔凈度應大于等于10 000級，要求局部潔凈度達到100級，下水道不能安裝在操作間內(nèi)。每次操作之前以及操作結束都必須用苯扎溴銨溶液(濃度為0.1%)或別的消毒液操作臺以及會受到污染的死角進行擦拭，再開啟層流凈化裝置。此外，在緩沖間必須配備洗手盆、無菌衣、口罩、帽以及鞋套等保護用品。同時在操作臺上配備藥物天平、火柴、乙醇燈以及橡皮乳頭等。確保潔凈實驗室溫度維持在18℃～26℃之間，室內(nèi)的相對濕度應保持在40% ～60%之間。必須注意的是，檢驗所使用的陽性菌操作必須在單獨的陽性菌實驗室內(nèi)，嚴禁與供試品檢驗共同使用一個潔凈實驗室［1］。

2 檢驗人員自身的影響

2.1 缺乏無菌方面的知識。大部分的藥品檢驗員覺得，藥典所要求的微生物限度標準通常較為寬松，所規(guī)定的菌落計數(shù)也不是很嚴格，從而影響了對檢品的染菌控制。

2.2 操作水平較差，操作不夠規(guī)范。很多藥品檢驗員對檢驗程序、實驗條件等并未進行嚴格控制，同時也未嚴格遵守藥典的操作規(guī)范實施檢驗，造成檢品檢驗結果出現(xiàn)錯誤。

3 檢品自身的影響

3.1 檢品自身的特性。檢品自身所具有的特性也會對微生物限度檢查的結果產(chǎn)生較大影響，主要包括兩點:①生態(tài)、自然環(huán)境具有的不確定性:藥品很容易受到外部微生物的污染，這種類型的污染具有多樣性、其污染程度也難以確定。②活體具有易變性的特點:藥典中的檢驗對象是活的微生物，這正是檢品的獨特之處。

3.2 檢品中的抑菌成分所產(chǎn)生的影響。很多中西都含有抑菌成分，盡管部分檢品所含的并非已知的抑菌成分，然而在菌落計數(shù)的時候發(fā)現(xiàn)這種成分對菌落有抑菌的功效，從而影響到對檢品的結果判斷。

3.3 檢品對培養(yǎng)溫度所產(chǎn)生的影響。之前的檢驗數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)，針對部分含菌量非常高的檢品，將其置于30℃的溫度進行培養(yǎng)，菌落在七十二小時之內(nèi)生長比較慢，因此需要在藥典規(guī)定的時間之內(nèi)增加培養(yǎng)的時間。

4 培養(yǎng)基產(chǎn)生的影響

4.1 培養(yǎng)基的儲存條件以及培養(yǎng)基自身的質量，對于檢驗結果的準確性有直接影響。目前大部分的培養(yǎng)基采取的都是脫水培養(yǎng)基，因此，必須嚴格按照說明書中規(guī)定的條件進行儲存，避免培養(yǎng)基吸潮結塊從而產(chǎn)生污染。

4.2 培養(yǎng)基的滅菌處理。根據(jù)規(guī)定要求培養(yǎng)基應只允許實施一次蒸汽滅菌處理，已經(jīng)經(jīng)過高壓滅菌處理的培養(yǎng)基必須盡可能縮減重復加熱的時間，防止出現(xiàn)過度加熱，從而破壞了培養(yǎng)基的營養(yǎng)成份。

4.3 培養(yǎng)基的合理使用。將融化之后的培養(yǎng)基置于45℃ ～47℃的恒溫水浴鍋或者培養(yǎng)箱中進行保溫，直到開始使用。嚴格控制已配好的培養(yǎng)基經(jīng)過滅菌處理之后的放置時間，其時間不宜過長，防止器水分散失以及出現(xiàn)染菌［2］。

5 菌種以及菌落計數(shù)

微生物限度檢驗過程中一種非常重要的生物資源就是菌種，并在使用中定期實施傳代，使用的標準菌種的傳代不能超出五代［3］。必須有專人負責，使用專用冰箱進行保存。如果菌落生長密集的話，計數(shù)容易出現(xiàn)誤差。因此，檢驗人員必須在菌落計數(shù)的時候認真觀察，仔細鑒別檢品的不溶輔料以及培養(yǎng)基所產(chǎn)生的氣泡等等，并利用適當?shù)墓ぞ呦蓴_，增加培養(yǎng)時間以便細心觀察。如果菌落成片生長或者重疊的話會對計數(shù)產(chǎn)生影響。按照藥典的規(guī)定，菌落如果出現(xiàn)蔓延生長成片，此時就不能計數(shù)。

為確保藥品微生物限度的檢驗結果能夠準確，盡量減少實驗誤差，必須做到如下幾點:操作環(huán)境必須滿足藥典要求;檢驗人員必須具備很強的責任心，嚴格遵守藥品檢驗技術規(guī)范中的要求進行操作;嚴格遵守滅菌程序，避免出現(xiàn)二次污染;對檢驗結果準確做出判斷。

［1］馬緒榮，蘇德模.藥品微生物學檢驗手冊.北京:科學出版社，2000:38.

［2］王睿，柴棟.細菌耐藥機制與臨床治療對策.國外醫(yī)藥:抗生素分冊，2003，24(3):97.

［3］楊靜.藥品微生物限度檢查法的影響因素分析.中國藥事，2008，22(12):1095-1096.