藥用真菌豬苓的研究現(xiàn)狀及應(yīng)用展望*

陳文強，鄧百萬，彭 浩，劉開輝，解修超，丁小維，王乃嘉，蘭阿峰

（陜西理工學(xué)院生物科學(xué)與工程學(xué)院，陜西省食藥用菌工程技術(shù)研究中心，陜西 漢中 723001）

豬苓隸屬于真菌門Eumycophyta、擔(dān)子菌綱Basidiomycetes、多孔菌目Polyporales、多孔菌科Polyporaceae、豬苓（地花）屬Grifola，學(xué)名為Grifola umbellatus(Pers.ex Fr.)Pilat[1-3]。

目前，世界上公認的豬苓學(xué)名是1935年由Pilat在Pers.和 Fr.定名的基礎(chǔ)上定名的。由于傳統(tǒng)習(xí)慣，我國絕大多數(shù)的專著、專業(yè)雜志乃至藥典都仍沿用1821年定的老學(xué)名，即Polyponus umbellatus(Pers.)Fr.[4]。

我國古文獻中有許多關(guān)于豬苓的記載。 《本經(jīng)》記載其主痃瘧，利水道。 《藥性論》記載其解傷寒溫疫大熱，發(fā)汗，主腫脹，滿腹急痛。 《綱目》記載其開腠理，治淋、腫、腳氣，白濁、帶下，妊娠子淋，小便不利。 《本草衍義》記載其行水之功多，久服必損腎氣，昏人目。《本草求真》其文曰豬苓，凡四苓、五苓等方，并皆用此，性雖有類澤瀉，同人膀胱腎經(jīng)，解熱除濕，行竅利水，然水消則脾必燥，水盡則氣必走；澤瀉雖同利水，性亦類燥，然咸性居多，尚有潤存，澤雖治火，性亦損氣，然潤能滋陰，尚有補在。故豬必合澤瀉以同用，則潤燥適均，而無偏陂之患矣。 《神農(nóng)本草經(jīng)》將豬苓列為上品，是利水滲濕的常用藥。用于小便不利，水腫、泄瀉、淋濁、帶下等癥，藥用已有2000多年的歷史[5，6]。

現(xiàn)代藥理證明，豬苓多糖具有抗腫瘤作用，對血紅細胞免疫功能的恢復(fù)有明顯的促進作用。本文旨在通過對藥用真菌豬苓研究的歷史現(xiàn)狀、生物學(xué)特性、栽培技術(shù)及尚待解決的問題進行探討，以期為豬苓資源的有效保護、合理開發(fā)和綜合利用提供依據(jù)。

1 豬苓的生物學(xué)特性

1.1 形態(tài)特征

豬苓，別名豬糞菌、豬靈芝。子實體多數(shù)從地下菌核生出，俗稱 “豬苓花”。菌體白色，較軟，有短的主柄，主柄多次分枝而呈叢生狀，每叢可達10枝～100枝，分枝頂端著生菌蓋。菌蓋肉質(zhì)，圓形，中部臍狀，近白色至淺褐色，有淡黃褐色纖維狀鱗片，邊緣薄而銳，常內(nèi)卷。菌肉薄，白色。菌管與菌肉同色。孢子印白色，孢子無色，光滑，圓筒形，一端圓形，一端具歪尖， (7～10)μm×(3～4.2)μm。通常所說的 “豬苓”，一般指豬苓的菌核。菌核埋生于地下，呈不規(guī)則塊狀，表面有凹凸不平的皺紋，并有許多瘤狀突起，黑褐色，有油漆樣光澤，干后帶淡褐色，堅硬，略有彈性。其上有綠色 “芽眼”，并帶有蜜環(huán)菌菌索。內(nèi)部白色，干后淡褐色[8-11]。

1.2 豬苓與蜜環(huán)菌的關(guān)系及分布

1.2.1 豬苓與蜜環(huán)菌的關(guān)系

豬苓與蜜環(huán)菌存在一種十分特殊的菌內(nèi)共生關(guān)系。在自然條件下只有當(dāng)蜜環(huán)菌侵入豬苓菌核時豬苓菌才能生長發(fā)育。豬苓的菌核在沒有蜜環(huán)菌伴生的情況下呈休眠狀態(tài)，當(dāng)蜜環(huán)菌的菌索在豬苓附近的植物體上寄生并接近豬苓菌核時，首先是蜜環(huán)菌的菌絲侵染豬苓菌核，在核內(nèi)形成很多分枝的蜜環(huán)菌索[12-17]。后期，菌索上又生出菌絲在菌核內(nèi)穿插侵染，形成侵染帶[18]。很快，豬苓菌核生出菌絲反侵染入蜜環(huán)菌的菌索，深入皮層下1層～3層細胞，從中獲取營養(yǎng)。后期豬苓的菌核菌絲主要是靠附著和部分插入蜜環(huán)菌菌索皮層及侵染帶細胞間隙，吸收蜜環(huán)菌的代謝產(chǎn)物。由于得到了營養(yǎng)，蜜環(huán)菌侵染區(qū)周圍的菌絲開始繁殖[19]。

1.2.2 豬苓的地理分布

豬苓在我國分布很廣，北至黑龍江省，南達福建省，西可到青海省。主產(chǎn)于陜西、云南、山西、河南、甘肅、吉林、四川等省市、自治區(qū)。以云南產(chǎn)量最大，傳統(tǒng)認為陜西出產(chǎn)的品質(zhì)最佳。在國外，豬苓主要分布于歐洲和北美洲國家，亞洲的日本也有分布。

1.3 豬苓生長的生態(tài)環(huán)境

1.3.1 豬苓生長與地勢、地形的關(guān)系

野生豬苓多分布于海拔1000 m～2000 m的山區(qū)，以1200 m～1600 m生長較多，且陽坡、陰坡均有分布，但以半陰半陽的二陽坡生長最多。坡度以20度～25度緩坡地分布為宜，超過50度的陡坡，其分布呈直線或斜線狀分布，平緩地則呈單穴或梅花狀分布。豬苓屬好氣性真菌，喜生長于富含腐殖質(zhì)的表層土壤，深度一般在0～40 cm。

1.3.2 豬苓生長與植被的關(guān)系

原始森林或林木過于密集的地方少有豬苓生長，而原始森林采伐十余年后的亮腳林，其隱蔽度為七陰三陽處的地方豬苓生長較多。除松林外，闊葉林、混交林、次生林、竹林等均有野生豬苓分布，但以次生林沙壤土質(zhì)生長較多。雜木林中，?？稍跇渑酝诘截i苓，以樺樹、楊樹、柳樹、椴樹、槭樹等樹旁最多。森林土壤中的大量枯枝落葉，腐爛后形成營養(yǎng)豐富的腐殖質(zhì)，其中各種樹根、毛細根縱橫交錯，極利于蜜環(huán)菌生長，而蜜環(huán)菌又是豬苓的主要營養(yǎng)來源。因而，豬苓喜生長于這些樹根中。

1.4 影響豬苓生長的理化因素

1.4.1 溫度

當(dāng)?shù)販卦?0℃時豬苓開始萌動，12℃左右新苓生長膨大，14℃左右新苓萌發(fā)增多，22℃～25℃時生長最快，超過28℃時，豬苓生長則會受到抑制。

1.4.2 濕度

土壤含水量在50%～60%時豬苓最適于生長。每年7月～8月，降雨量在240 mm左右、空氣相對濕度在70%～90%時，屬豬苓生長旺季；土壤水分低于30%，豬苓即停止生長；土壤水分長期處于飽和狀態(tài)，豬苓則會腐爛。

1.4.3 pH值

豬苓在腐殖土和黃土內(nèi)都能生長，但以顆粒狀團粒結(jié)構(gòu)、疏松的腐殖土易于其生長。尤以黑沙腐殖土生長最好，產(chǎn)量最高，豬苓生長的最適土壤pH在5.0～6.7之間。

2 豬苓的分類學(xué)研究

2.1 豬苓的經(jīng)典分類學(xué)研究

2.2 豬苓的現(xiàn)代分類學(xué)研究

2.2.1 利用酯酶（EST）與過氧化物酶（POD）的同工酶分類

陳文強、鄧百萬等從陜西留壩3種不同豬苓菌核（豬屎苓P.umbellatus LBZ、雞屎苓P.umbellatus LBJ、鐵蛋屎苓P.umbellatus LBT）中分離得到營養(yǎng)菌絲，采用聚丙烯酰胺凝膠垂直板電泳（PAGE），對其酯酶（EST）與過氧化物酶（POD）的同工酶進行了分析。表明3種豬苓營養(yǎng)菌絲的酯酶同工酶和過氧化物酶同工酶活性相近。同時，利用過氧化物酶酶譜帶的相似度指數(shù)作為指標(biāo)，對3種不同豬苓菌核的營養(yǎng)菌絲進行聚類分析，再次證明3種不同菌核形態(tài)的豬苓屬同種[20]。

2.2.2 基于rDNA和β-tub1序列對不同形態(tài)豬苓菌核間親緣關(guān)系的分類

序列比對分析，邢曉科、郭順星等從ITS序列探討豬苓與其伴生菌的親緣關(guān)系[21]。劉開輝、鄧百萬等利用PCR分別擴增豬屎苓、鐵蛋豬屎苓和雞屎苓菌絲體的rDNA（ITS1-5.8S rDNA-ITS2）和β-tub1片段，所得片段序列比對結(jié)果表明，不同豬苓菌絲體的rDNA（ITS1-5.8S rDNA-ITS2）序列長度均為537 bp，所得部分18S rDNA序列長度均為882 bp，所測的不同豬苓菌絲體的β-tub1序列長度均為480 bp。比對分析發(fā)現(xiàn)，不同豬苓菌絲體的rDNA和β-tub1同源性為100%。系統(tǒng)發(fā)育分析，用Clusta-X軟件對不同豬苓菌絲體的ITS1、5.8S rDNA和ITS2序列進行人工校正，從GenBank上下載的相應(yīng)數(shù)據(jù)，按照N-J法聚類，經(jīng)自舉法檢驗（1000次重復(fù)）得到進化樹。不同菌核豬苓菌絲體的ITS序列和GenBank上收錄豬苓的ITS進行比對分析，其同源性為100%，和已知豬苓（P.umbellate）菌株類聚于同一分支。結(jié)果表明，盡管供試豬苓菌核形態(tài)差異很大，但在進化地位上仍為同一物種[22，23]。

3 豬苓的半人工栽培技術(shù)

3.1 蜜環(huán)菌菌種的選擇

蜜環(huán)菌菌種質(zhì)量直接影響豬苓的產(chǎn)量。目前，經(jīng)栽培試驗的 “京234”號蜜環(huán)菌菌種，自然存放40 d～60 d后菌絲色澤呈淺黑色，菌絲生長旺盛、粗壯均勻。一般每瓶蜜環(huán)菌菌種能擴大培養(yǎng)長50 cm～60 cm的菌材10根～15根，培養(yǎng)菌枝2.5 kg～4.0 kg，可根據(jù)培養(yǎng)量選擇蜜環(huán)菌菌種。

3.2 蜜環(huán)菌菌枝的培育

取粗1.5 cm～2.0 cm的青岡和樺樹枝條，斜砍成長5.0 cm～8.0 cm的節(jié)段，暴曬2 d～3 d后在0.25%硝酸銨或0.25%尿素水溶液中浸泡12 h～24 h后備用。挖長約80 cm～100 cm，寬約50 cm～60 cm，深約20 cm～30 cm的坑，鏟平坑底，先用清水浸透土坑，待水滲干后，在坑底鋪1層厚約2.0 cm左右的樹葉，將樹枝依次擺在樹葉上，后將蜜環(huán)菌菌種放在樹枝間的截口處，蓋1層薄土并填實空隙。依次做第2層、第3層直至4層到5層，最后坑頂覆土5 cm～8 cm，用樹葉覆蓋表面。經(jīng)常澆水（1個培育坑，1次澆水30 kg～40 kg），使坑內(nèi)濕度維持在70%～80%，2個～3個月后樹枝即可長滿蜜環(huán)菌，長有蜜環(huán)菌的樹枝節(jié)稱為菌枝。

隨著氣溫的進一步下降，蛋雞產(chǎn)蛋高峰期將逐漸結(jié)束，雞蛋出貨逐漸減少，因此預(yù)計元旦春節(jié)前后，雞蛋價格季節(jié)性上漲的預(yù)期不變。從當(dāng)前出欄情況看，養(yǎng)殖單位養(yǎng)殖盈利比較高，存在惜售情緒，短期淘汰蛋雞的量也不會太大。因此專家建議，養(yǎng)殖企業(yè)和個人補欄要量力而行，根據(jù)資金和存欄情況，在能力范圍內(nèi)行事，不要擴產(chǎn)和大幅地擴建。

3.3 蜜環(huán)菌菌材的培育

蜜環(huán)菌菌材培養(yǎng)在每年的3月～10月進行為宜。取粗4 cm～8 cm的青崗和樺樹等，截成長50 cm的短棒，在樹棒2面～3面砍成魚鱗口并深入至木質(zhì)層。晾曬20 d～30 d備用，樹棒過干時可用0.25%的NH4NO3溶液浸泡1 d后備用。挖長60 cm～70 cm，深20 cm～25 cm的坑，將坑底土壤挖松并整平，鋪厚3 cm的濕樹葉，其上擺樹棒5根，棒間距1 cm～3 cm，回填半溝砂土；在樹棒兩端和兩棒間放蜜環(huán)菌菌枝，每隔5 cm放1個菌枝，灑清水并澆濕樹棒，后用沙土填實棒間空隙，以蓋住樹棒為止，再放第2層樹棒，回填半溝砂土，放菌枝蓋土（同第1層操作一樣），依此做第3層，最后蓋砂土約10 cm。每隔10 d澆水1次，3個～4個月可長好蜜環(huán)菌菌絲。

3.4 豬苓種苓的栽培與選擇

目前，利用豬苓純菌絲菌種進行人工栽培，技術(shù)尚未完全突破，故種苓只能依靠豬苓菌核做種。一般3年以上的豬苓菌核表皮為黑褐色，2年～3年為灰黃色；當(dāng)年新生苓為清白色。蜜環(huán)菌不侵入當(dāng)年生長的白苓，只侵染灰苓和黑苓并形成共營關(guān)系。白色豬苓是膨大期的幼苓，無經(jīng)濟價值。黑苓、灰苓既是商品藥材，也可用來無性繁殖。灰苓斷面菌絲白色，含水量大，萌發(fā)新苓多，是最佳的種苓；黑苓也可作種，但應(yīng)選擇具有彈性、斷面菌絲為白色或微黃色，新鮮無霉變的苓塊。菌核無彈性，斷面菌絲黃色，體內(nèi)有許多空腔的老苓不能做種苓。

3.5 豬苓種子的培養(yǎng)

選擇海拔1000 m左右、遮陽度80%～100%的坡地進行豬苓種子的培養(yǎng)。用直徑5.0 cm以下樹枝，截成15 cm～20 cm小段挖坑進行撒播，種植2層為宜。每平方米用闊葉樹葉及椴木40 kg～50 kg，豬苓菌種和蜜環(huán)菌各1瓶～2瓶 (包)。地溫15℃以上點播定殖，15 d～20 d菌絲向土中延伸呈根網(wǎng)狀，40 d～60 d開始在樹葉及土層中形成白色球形幼苓，1年栽培培養(yǎng)后即成豬苓種子。

3.6 豬苓栽培的林地選擇

3.6.1 豬苓栽培的海拔高度

一般海拔在600 m～1500 m的林地均可栽培豬苓。林相以雜灌林、次生闊葉林、混交林和竹林為宜。樹種以樺樹、馬桑和板栗等不含油質(zhì)樹種為好。

3.6.2 豬苓栽培的山勢山向

以朝北陰坡溝槽處最宜。頂風(fēng)山、滾坡梁和向陽干坡不宜栽培。山勢在千米以下陰坡宜栽，1300 m左右二陽山宜栽，1400 m山上可栽向陽林下。要求林內(nèi)光照七陰三陽，原始密林不宜栽培。

3.6.3 豬苓栽培的最適土壤土質(zhì)

豬苓栽培要求土壤濕潤，疏松透氣，且腐殖質(zhì)含量高的砂壤土，其次為黑砂土、石渣土和油質(zhì)土。

3.7 豬苓林地半人工栽培方法

挖長70 cm、寬60 cm、深20 cm～30 cm的坑，在林間須根處栽培，也可開挖長溝漕栽培，根據(jù)地形而定，坑底挖松并整平?？觾?nèi)填腐質(zhì)土4 cm～5 cm，中間放1根稍大樹棒，樹棒兩面各放1根帶蜜環(huán)菌的菌材，菌材與中間樹棒間距4 cm～5 cm。然后，再在2根菌材兩側(cè)各放1根樹棒，樹棒與菌材間距4 cm～5 cm。在2根蜜環(huán)菌材兩側(cè)分別均勻放入350 g～500 g豬苓菌種，新樹棒處不放種苓，將細土均勻填入菌棒與樹棒空隙間壓實，后放入2根～3根樹枝，樹枝須單個平放，不能重疊，最后用腐質(zhì)土或沙土覆蓋15 cm～20 cm，坑面成平頂，便于保水、保墑，也可呈 “井”字型栽培2層。

3.8 豬苓栽培的時間

豬苓一年四季均可栽培，但以春夏2月～5月和秋冬10月～12月栽培最好，在低海拔山區(qū)應(yīng)避開夏季7月～8月高溫、高濕時節(jié)。

3.9 豬苓栽培后管理

栽培后管理一要注意防旱，在遇到連續(xù)干旱的年份，應(yīng)設(shè)法澆水，使土壤保持一定的濕度；二要注意保溫，每年冬春季在栽培穴上覆蓋厚5 cm～10 cm的枯枝落葉以保溫，從第3年起，早春時節(jié)結(jié)合培土將坑面挖開，在栽培層上加蜜環(huán)菌菌材，使豬苓獲得充分的營養(yǎng)供應(yīng)，以利生長；三要注意防止人畜踐踏，造成不必要的損失。

4 存在的問題及展望

目前，有關(guān)豬苓的研究依然是國內(nèi)外學(xué)術(shù)界研究的重要課題，大量研究涉及豬苓的生物學(xué)特性、分類學(xué)、栽培技術(shù)、發(fā)酵技術(shù)、藥理作用和臨床應(yīng)用等。作為重要的藥用真菌，豬苓在我國已被開發(fā)研制成中成藥制劑，用于防治各種疾病。然而，豬苓的研究與應(yīng)用還存在著一些值得重視的問題。

首先，豬苓的林地栽培需要消耗大量木材，會破壞森林資源，如何使用代料栽培高品質(zhì)的豬苓，需進一步研究與探討。同時，豬苓在栽培過程中易發(fā)生各類病蟲害感染，栽培用的豬苓 (菌核)菌種易失去活性，有的豬苓菌種易老化和退化，這些問題有待于進一步深入研究并解決。

其次，在豬苓栽培和應(yīng)用開發(fā)中，普遍存在規(guī)范化程度低，產(chǎn)業(yè)化程度不高等問題。如何控制豬苓原料和產(chǎn)品中的重金屬和農(nóng)殘留量，建立豬苓生產(chǎn)的GAP標(biāo)準(zhǔn)，豬苓原料、中間產(chǎn)品以及終產(chǎn)品的質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)都有待于深入研究。

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