中藥干預肝纖維化中轉化生長因子-β1的作用研究

陸增生 施維群

1.浙江中醫(yī)藥大學第二臨床醫(yī)學院 (浙江杭州，310053) 2.浙江中醫(yī)藥大學附屬第二醫(yī)院肝病科

肝纖維化 (hepatic fibros，HF)是指肝細胞發(fā)生壞死及炎癥刺激時，肝臟內纖維結締組織異常增生的病理過程。從現有的肝纖維化的發(fā)生發(fā)展研究機制中我們可以知道，在肝纖維化形成的過程中，肝星狀細胞 (hepatic satellite cell，HSC)的活化是肝纖維化的中心環(huán)節(jié)［1］。其中激活的HSC被認為是促進細胞外基質 (extracelluar matrix，ECM)過度沉積的主要細胞，而多種細胞因子參與了肝星狀細胞的激活，其中轉化生長因子-β1(trans-forming growth factor l，TGF-β1)被認為是最關鍵的因素之一［2，3］，其可激活HSC和調節(jié)ECM的合成和降解平衡。以干擾TGF-β1靶點的抗肝纖維化治療己成為當今研究的熱點之一。TGF-β1是一族結構相關、功能相似的活性多肽，為雙硫鍵聯結的二聚體堿性蛋白，分子量為25KD。在生理狀態(tài)下，TGF-β1主要由淋巴細胞、血小板和巨噬細胞分泌;在慢性炎癥或肝纖維化時，間質細胞對其表達增加，而且肝實質細胞對TGF-β1表達被啟動。據研究，TGF-β1可促進HSC增殖，同時促進HSC表達和分泌I、Ⅲ、Ⅳ型膠原、纖維連接蛋白、細胞黏合素以及通過自分泌作用促進TGF-β1自身的表達。因此，TGF-β1在肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展過程中起著重要的始動作用和持續(xù)激活作用。中醫(yī)中藥對肝纖維化的良好預防和治療效果及低毒性反應等特點目前已引起國內外學者的廣泛關注，且最近幾年中藥對于肝纖維化中TGF-β1的作用研究方興未艾，綜述如下。

1 單味藥及有效單體干預肝纖維化中TGF-β1的研究

孫玲［4］運用豹皮樟總黃酮血清對TGF-β1干預的大鼠HSC的作用進行研究，采用動物體內給藥，分離藥物血清，作用于體外培養(yǎng)細胞的血清藥理學實驗方法，探討豹皮樟總黃酮血清對TGF-β1干預的HSC-T6的活化增殖和平滑肌肌動蛋白(smooth muscle actin，SMA)及I、Ⅲ型膠原基因表達的影響，從細胞分子學水平探討豹皮樟總黃酮血清抗肝纖維化的作用。發(fā)現豹皮樟總黃酮血清可有效降低TGF-β1水平。楊潔等［5］通過對柴胡、紅花、川芎中藥單體對CCl4造模的大鼠肝纖維化治療作用的實驗發(fā)現，生理鹽水對照組、柴胡組、紅花組、川芎組的 TGF-β1表達陽性率分別為 87%、21%、30%、17%。表明柴胡、紅花、川芎對TGF-β1表達有明顯抑制作用。樊予惠等［6］用川芎嗪對人HSC TGF-β1影響的研究中發(fā)現，川芎嗪可以顯著降低TGF-β1表達陽性率。何綺微等［7］將茯苓和苦參用于CCl4造模的肝纖維化大鼠，發(fā)現茯苓和苦參顯著降低了TGF-β1表達。

2 中藥復方干預肝纖維化中TGF-β1的研究

2.1 動物實驗研究 李豐衣等［8］用調肝理脾方對酒精性肝纖維化的研究中發(fā)現，調肝理脾方能顯著下調采用“白酒-吡唑-玉米油”混合液灌胃法造模的酒精性肝纖維化大鼠肝組織中TGF-β1水平。陳青鋒等［9］運用益氣活血化瘀中藥復方對二甲基亞硝胺造模建立的肝纖維化大鼠進行研究發(fā)現，益氣活血化瘀中藥復方有明顯降低大鼠肝組織中TGF-β1水平。王麗等［10］采用腹腔注射豬血清的方法建立免疫性肝纖維化大鼠動物模型，再運用化濁解毒益氣方觀察對纖維化大鼠TGF-β1水平的表達，發(fā)現化濁解毒益氣方可以顯著下調TGF-β1水平。李豐衣等［11］用復方鱉甲軟肝片對酒精性肝纖維化的研究中發(fā)現，與復方牛胎肝提取物相比，復方鱉甲軟肝片能顯著下調采用“白酒-吡唑-玉米油”混合液灌胃法聯合高脂飲食造模的大鼠肝組織中TGF-β1水平。王衛(wèi)華等［12］運用二甲基亞硝胺對大鼠進行肝纖維化造模，發(fā)現甲乙煎能下調實驗性肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1表達。謝世平等［13］用鱉甲煎丸對免疫性肝纖維化大鼠TGF-β1mRNA表達進行研究，發(fā)現和秋水仙堿組相比，鱉甲煎丸顯著抑制TGF-β1 mRNA的表達。房澍名等［14］運用拆方益肝康不同藥物血清對 HSC膠原代謝及TGF-β1的影響進行研究，采用分別提取正常大鼠和CCl4造模肝纖維化大鼠益肝康及其拆方丹參小復方 (丹參、黃芪、歸尾)的藥物血清，作用于體外培養(yǎng)的HSC，探討該方對HSC膠原代謝及TGF-β1基因與蛋白表達的影響，去探討新的藥物作用靶點及配伍意義，結果顯示兩種方法均可顯著抑制TGF-β1的表達，益肝康優(yōu)于丹參小復方。賈愛芹等［15］用清肝抑纖飲及其拆方對CCl4致肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1的表達進行研究發(fā)現，清肝抑纖飲及其拆方預防用藥可顯著降低纖維化大鼠肝組織勻漿 TGF-β1含量。并顯示清熱解毒藥物與涼血活血藥物的配伍在方中起主要作用。潘智敏等［16］用祛痰化濁法中藥復方調脂積沖劑對由CCl4復合高脂乳劑造模的脂肪肝性大鼠肝纖維化模型進行研究發(fā)現，復方調脂積沖劑對脂肪肝性肝纖維化的大鼠有顯著降低TGF-β1的作用。宋星星等［17］用白酒輔以吡唑、玉米油的混合食料灌胃的方法建立大鼠酒精性肝纖維化模型，然后以五田保肝液對酒精性肝纖維化大鼠肝組織TGF-β1表達的影響進行研究。研究發(fā)現，五田保肝液可抑制酒精性肝纖維化大鼠肝組織 TGF-β1的表達。吳凌康等［18］以酒精灌胃制作大鼠酒精性肝纖維化模型，然后以益氣活血化痰法中藥灌胃，用免疫組化法探測大鼠肝組織中TGF-β1蛋白的分布和表達強度。以動物羊血清代替一抗制作陰性對照。發(fā)現益氣活血化痰法中藥組大鼠TGF-β1明顯低于對照組。趙建玲等［19］用中藥復方制劑對日本血吸蟲病肝纖維化形成的影響進行研究，發(fā)現中藥對日本血吸蟲鼠肝內TGF-β1有明顯抑制作用。李志鋼等［20］研究中藥肝心寧對CCl4誘導的肝纖維化大鼠肝臟 TGF-β1及Smad3表達的影響，發(fā)現經肝心寧治療后大鼠肝臟TGF-β1表達比模型組減弱，肝心寧同時下調Smad3的表達。

2.3 臨床研究 王華等［21］從病理學及肝纖維化血清標志物角度，探討中藥強肝膠囊對慢性乙型肝炎肝纖維化患者的臨床療效中發(fā)現，強肝膠囊組和給予肝泰樂、復合維生素B溶液治療的對照組相比，血清學顯示TGF-β1的下降水平更明顯。白潔等［22］用中西醫(yī)結合方法治療非酒精性脂肪性肝炎 (NASH)，觀察血清的TGF-β1變化，以探討治療NASH并抑制其發(fā)生肝纖維化、肝硬化的最佳方案，3個月后，保肝降脂湯加熊去氧膽酸組的患者TGF-β1的下降水平明顯，并優(yōu)于其他組。

3 結語

肝纖維化的防治是當今肝病治療的難點之一。迄今為止，現代醫(yī)學尚無較有效的治療方法，各國科學家試圖從肝纖維化的發(fā)生、發(fā)展等不同環(huán)節(jié)入手，研制抗肝纖維化藥物。目前在抗肝纖維化的眾多藥物中，中醫(yī)以其多環(huán)節(jié)、多層次及多靶點的綜合作用已顯現出較明顯的優(yōu)勢，具有廣闊的開發(fā)和應用前景。中藥在單味藥和復方制劑以干擾TGF-β1靶點的抗肝纖維化治療中，對自身免疫性、酒精性、脂肪性、非酒精性、血吸蟲性肝纖維化等在動物實驗中均取得較好療效。人體臨床試驗也在不斷增加，在已經進行的人體臨床實驗的研究資料中可以知道中藥在非酒精性脂肪性肝病、病毒性肝炎方面的肝纖維化的防治也有很好的療效。但因中藥多為復方，即使是單味藥也含有多種不同成分，故要確切地說明中藥的體內作用機制及有效作用成分就較為困難。但隨著分子生物學的發(fā)展和現代檢測儀器、工藝、技術的提高，為我們進一步對TGF-β1的研究和中藥的藥物機制研究提供了可能。目前關于中藥對肝纖維化中TGF-β1的研究，大多集中在動物實驗階段，人體臨床試驗比較少，并且辨證論治運用也比較少，而辨證論治是中醫(yī)精髓之所在。我們應在研究過程中動物實驗造模時應對肝纖維化各個證型的動物模型進行完善，結合中醫(yī)病因病機去造模。中藥運用時應遵循辨證論治的原則。在獲得確切療效的基礎上，擴大臨床試驗范圍，結合現代科學技術，更好地解決慢性肝病患者的痛苦。

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