蟾酥治療心血管疾病的藥理研究進(jìn)展*

姜 艷，朱會(huì)超，任 煜，王 怡

蟾酥治療心血管疾病的藥理研究進(jìn)展*

姜 艷，朱會(huì)超，任 煜，王 怡

蟾酥；心血管疾?。凰幚碜饔?；綜述

蟾酥為蟾蜍科動(dòng)物中華大蟾蜍（Bufo gargarizans Cantor）或黑眶蟾蜍（Bufo melanostictus Schneider）的耳后腺及皮膚腺分泌的白色漿液，經(jīng)加工，干燥而成[1]。中醫(yī)認(rèn)為其性味為辛，溫，有毒，歸心經(jīng)，具有解毒、消腫、止痛、開竅醒神之功效?，F(xiàn)代研究表明：蟾酥化學(xué)成分復(fù)雜，含有多種化學(xué)成分，具有心血管藥理作用。但因具有毒性，使其臨床使用受到限制。筆者就其化學(xué)成分，以及蟾酥及其成分治療心血管疾病的藥理作用等進(jìn)行綜述，為其臨床使用提供依據(jù)。

1 化學(xué)成分

蟾酥主要包含蟾蜍毒素類、蟾毒配基類、蟾毒色胺類化合物、甾醇類及其他成分[2]。蟾蜍毒素類和蟾毒配基類同屬于蟾蜍二烯烴酸內(nèi)酯類，蟾酥的脂溶性成分含量約為20%，30多種化合物[3]，主要為Ⅱ型強(qiáng)心苷類[4]，即蟾蜍二烯烴酸內(nèi)酯類（bufadienolides）。蟾蜍毒素只存在于新鮮蟾蜍分泌物中，在干燥加工過(guò)程中結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，得到相應(yīng)的蟾毒配基類[2，5]。蟾蜍毒素類成分主要有：蟾毒靈-3-半辛二酸酯（bufalin-3-hemisuberate）、華蟾毒精-3-丁二酰精氨酸酯（cinobufagin-3-succinolylarginine ester）、日蟾毒它靈－3－己二酰精氨酸酯（gamabufotalin－3－adipoylarginine ester）、沙蟾毒精－3－硫酸酯（arenobufagin－3－sulfate）等。蟾毒配基類主要有：華蟾酥毒基（又名華蟾毒精、華蟾毒配基，cinobufagin）、脂蟾毒配基(resibufogenin)、蟾毒靈（bufalin）、沙蟾毒精（arenobufagin） 和 20S，21－環(huán)氧脂蟾毒配基（20S，21－epoxyresibufogenin）等。

目前，研究發(fā)現(xiàn)蟾酥中具有心血管活性的內(nèi)酯類成分主要有：脂蟾毒配基、華蟾酥毒基、蟾毒靈、蟾毒它靈、南美蟾毒精等，其化學(xué)結(jié)構(gòu)見圖1。

2 強(qiáng)心作用

蟾酥具有洋地黃樣的強(qiáng)心作用[6]，其優(yōu)點(diǎn)是無(wú)積累、作用快，利尿作用比洋地黃顯著，對(duì)心肌具有雙重正性變力效應(yīng)[7]。蟾酥能強(qiáng)力的結(jié)合到血清蛋白上，在無(wú)蛋白濾液中釋放出來(lái)。而洋地黃類地高辛僅有25%與血清蛋白結(jié)合[8]。

蟾蜍毒素類和蟾毒配基類均具有強(qiáng)心作用，但是后者的強(qiáng)心作用更為明顯，且毒性較低。脂蟾毒配基是蟾酥所含成分中毒性最小的一種，體內(nèi)蓄積性小，且具有較強(qiáng)生物活性，其結(jié)構(gòu)類似于洋地黃毒苷配基，但其安全范圍比洋地黃類強(qiáng)心苷廣[9]。

華蟾酥毒基對(duì)心臟的作用可能與心臟的功能狀態(tài)有關(guān)，對(duì)麻醉血壓正常犬沒(méi)有明顯的強(qiáng)心作用，但對(duì)人工放血造成的低血壓犬的心臟有非常顯著的正性心力效應(yīng)，能顯著增加心臟輸出量，升高動(dòng)脈壓，但對(duì)心率無(wú)明顯影響[10]。華蟾酥毒基能顯著增加由戊巴比妥鈉造成的家兔急性心力衰竭的心肌收縮性，且強(qiáng)心作用明顯大于洋地黃類藥物毒毛旋花子苷（SK）[11]。

3 抗心肌缺血作用

在結(jié)扎冠狀動(dòng)脈大鼠和急性心肌梗死患者的血漿中，機(jī)體內(nèi)源性的地高辛樣免疫反應(yīng)性增加，紅細(xì)胞和心肌膜上的鈉鉀三磷酸腺苷（Na+-K+-ATP）酶被抑制[12]，蟾酥同樣可使血清產(chǎn)生地高辛樣免疫反應(yīng)，從而發(fā)揮抗心肌缺血的作用。對(duì)于家兔缺血再灌注模型，蟾酥能改善心肌能量代謝，減輕心肌損傷，從而發(fā)揮保護(hù)作用[13]。

此外，蟾酥可延長(zhǎng)纖維蛋白原液的凝固時(shí)間，活化纖維蛋白溶酶，從而增加冠狀動(dòng)脈灌流量。對(duì)于血栓導(dǎo)致的冠狀血管狹窄而引起的心肌梗死等缺血性心臟障礙，蟾酥能增加心肌營(yíng)養(yǎng)性血流量，改善微循環(huán)，從而增加心肌供氧[14]。

4 強(qiáng)心作用機(jī)制研究

4.1 抑制Na+-K+-ATP酶 Na+-K+-ATP酶含有3個(gè)亞型α1、α2和α3，主要維持細(xì)胞的電化學(xué)穩(wěn)定，轉(zhuǎn)運(yùn)鈉、鉀離子，充當(dāng)?shù)湫偷哪な荏w[15]。α1 Na+-K+-ATP酶在心肌中含量最高（約為505~760 pmol/g）[16]，是強(qiáng)心內(nèi)戊酯類的結(jié)合位點(diǎn)，也是腎小管和血管肌膜中鈉鉀泵的主要亞型[17]。洋地黃類藥物主要是通過(guò)抑制心肌細(xì)胞上Na+-K+-ATP酶，達(dá)到增加心肌收縮力的作用。抑制迷走神經(jīng)傳入纖維的Na+-K+-ATP酶，使心臟的壓力感受器更敏感，減少中樞的交感神經(jīng)沖動(dòng)；抑制腎臟的Na+-K+-ATP酶，減少腎小管對(duì)鈉的重吸收，增加鈉向遠(yuǎn)曲小管的排泄，從而抑制腎素的分泌[18]?？梢娧蟮攸S類藥物發(fā)揮強(qiáng)心作用的主要機(jī)制是抑制Na+-K+-ATP酶。

蟾酥的強(qiáng)心作用機(jī)制主要是直接抑制心肌細(xì)胞上的Na+-K+-ATP酶。蟾酥可分別作用于心肌、腎以及紅細(xì)胞的α1 Na+-K+-ATP酶，對(duì)心肌細(xì)胞膜上的α1 Na+-K+-ATP酶的抑制作用，使細(xì)胞內(nèi)Na+濃度升高。Ca2+通過(guò)Na+/Ca2+交換體轉(zhuǎn)運(yùn)進(jìn)細(xì)胞，細(xì)胞內(nèi)鈣濃度增加，心肌收縮力增加，從而發(fā)揮強(qiáng)心作用[6]。但與哇巴因比較，蟾酥對(duì)α1 Na+-K+-ATP酶具有更強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)性抑制作用[19]。

大鼠胸主動(dòng)脈細(xì)胞膜上的α1 Na+-K+-ATP酶和血管周圍神經(jīng)末梢膜上的α3 Na+-K+-ATP酶，均可被南美蟾毒精抑制，但南美蟾毒精對(duì)前者的IC50為10 nmol/L，對(duì)后者的僅為0.5 μmol/L。表現(xiàn)出南美蟾毒精對(duì)α1型Na+-K+-ATP酶的特異性結(jié)合，且結(jié)合力明顯強(qiáng)于哇巴因[20]。

在結(jié)構(gòu)上，蟾蜍二烯烴酸內(nèi)酯類中內(nèi)酯環(huán)的完整性及雙鍵的存在對(duì)強(qiáng)心作用極為重要，如果其內(nèi)酯環(huán)或不飽和雙鍵被破壞，則完全喪失對(duì)心臟的特殊作用[6]。結(jié)構(gòu)中C-17所連接的六元不飽和內(nèi)酯環(huán)，代替了毒毛旋花苷配基和哇巴因上的五元環(huán),可能是六元環(huán)把羰基氧移向適當(dāng)?shù)奈恢茫M(jìn)而獲得Na+/K+泵最大的活性，故蟾蜍二烯烴酸內(nèi)酯類的強(qiáng)心作用強(qiáng)于后兩者。羰基氧是蟾蜍二烯烴酸內(nèi)酯類主要生物活性的決定因子[14]。

4.2 促進(jìn)ATP合成 蟾酥能增加人體單核白細(xì)胞中環(huán)磷腺苷（cAMP）的水平，由于cAMP的增加，提高心肌磷酸化酶激酶的活性，在磷酸化酶激酶的作用下，使無(wú)活性的磷酸化酶b轉(zhuǎn)變成有活性的磷酸化酶a，因而促進(jìn)糖原分解，產(chǎn)生更多的ATP。ATP作為心肌收縮的原動(dòng)力，從而使心肌充分發(fā)揮作用[14]。

4.3影響L型電壓依賴性Ca2+（L-Ca2+）通道Roger等[19]研究發(fā)現(xiàn)蟾酥對(duì)肌膜上的L-Ca2+釋放通道無(wú)任何影響。但蟾毒靈既可抑制Na+-K+-ATP酶的活性，又可以抑制L-Ca2+釋放通道，從而進(jìn)一步使細(xì)胞內(nèi)鈣增加。且蟾毒靈此作用是哇巴因的1 000倍，蟾酥則為哇巴因的60~500倍。

采用大鼠離體胸主動(dòng)脈灌流模型，觀察華蟾素對(duì)血管張力的影響，厲旭云等[21]發(fā)現(xiàn)華蟾素對(duì)血管有收縮作用，其主要機(jī)制可能是通過(guò)引起L-型電壓依賴性Ca2+通道的開放，導(dǎo)致細(xì)胞外鈣內(nèi)流增加，從而引起血管收縮，同時(shí)華蟾素作用于血管內(nèi)皮細(xì)胞，引起一氧化氮（NO）的釋放，部分抵消血管效應(yīng)。

4.4 增加動(dòng)作電位 張磊等[22]研究離體豚鼠心室乳頭肌細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)華蟾酥毒基能縮短心肌動(dòng)作電位時(shí)程，且呈現(xiàn)劑量依賴關(guān)系，與其他強(qiáng)心類藥物的作用類似。

5 小結(jié)

蟾酥成分復(fù)雜，具有顯著的藥理作用。蟾酥抑制心肌細(xì)胞上的Na+-K+-ATP酶可使細(xì)胞內(nèi)鈣濃度增加，從而達(dá)到強(qiáng)心作用，當(dāng)鈣離子超載時(shí)則可引起心臟毒性。因此，蟾酥的藥效作用與毒性共存，有毒既有效是其存在的基礎(chǔ)。由于蟾酥的毒性影響了其臨床廣泛應(yīng)用。如何通過(guò)合理的中藥方劑配伍，達(dá)到增效減毒或者減毒的作用，為蟾酥臨床合理的應(yīng)用提供科學(xué)依據(jù)，是今后研究蟾酥的主要方向。

[1] 國(guó)家藥典委員會(huì)，中華人民共和國(guó)藥典（第一部）[S].北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2010．

[2] 朱仝飛.蟾酥和西藏胡黃連化學(xué)成分的研究[D].沈陽(yáng)：沈陽(yáng)藥科大學(xué)，2008．

[3]王浩天.蟾酥中有效成分的提取分離及抗腫瘤效果的研究[D].長(zhǎng)春：吉林大學(xué)，2007．

[4] 馬驍馳，張寶璟，鄧 卅，等．中藥蟾酥中蟾蜍甾烯類成分研究[J].現(xiàn)代生物醫(yī)學(xué)進(jìn)展，2009，9（18）：3519－3522．

[5] 吳喜燕，高慧敏，王智民.蟾蜍類藥材化學(xué)成分研究進(jìn)展[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2010，16（14）：207－215．

[6] Wansapura AN,Lasko V,Xie ZJ,et al.Marinobufagenin enhances cardiac contractility in mice with ouabain-sensitive a1Na+-K+-ATPase[J].Am J Physiol Heart Circ Physiol,2009,296:1833-1839.

[7]黃泰康.常用中藥成分與藥理手冊(cè)（下冊(cè)）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2006：1846－1858．

[8] Amitava D,David W.Bernard.Herbal Remedies Effects on Clinical Laboratory Tests [J].Arch Pathol Lab Med,2006,130:521-528.

[9] 朱 遠(yuǎn)，后德輝．脂蟾毒配基對(duì)失血性休克和實(shí)驗(yàn)性心衰的作用[J].中國(guó)藥科大學(xué)學(xué)報(bào)，1989，20（2）：117－121．

[10]厲旭云，陸 源，單綺嫻，等．華蟾素對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈的縮血管作用及其機(jī)制[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，35（2）：198－201．

[11]陳 立，曲極冰，陳 霞，等．華蟾酥毒精對(duì)衰竭兔心功能影響的實(shí)驗(yàn)研究[J].中藥藥理與臨床，1994，（2）：21－22．

[12]Bagrov AY,Fedorova OV,Dmitrieva RI.Characterization of a Urinary Bufodienolide Na+,K+-ATPase Inhibitor in Patients After Acute Myocardial Infarction[J].Hypertension,1998,31:1097-1103.

[13]邵 玲.低溫及蟾酥對(duì)麻醉家兔心肌缺血再灌注損傷的保護(hù)作用[D].武漢：武漢大學(xué)，2005．

[14]黃泰康.常用中藥成分與藥理手冊(cè)（下冊(cè)）[M].北京：中國(guó)醫(yī)藥科技出版社，2006：1846－1858．

[15]Fedorova LV,Raju V,El-Okdi N,et al.The Cardiotonic Steroid Hormone Marinobufagenin Induces Renal Fibrosis.Implication of Epitheilal to Mesenchymal Transition[J].Am J Physiol Renal Physiol,2009(1):52.

[16]Cheng Chih-Jen,Lin Chin-Sheng,Chang Li-Way,et al.Perplexing hyperkalaemia[J].Nephrol Dial Transplant,2006,(21):3320-3323.

[17]Dmitrieva RI,Bagrov AY,Lalli E,et al.Mammalian Bufadienolide Is Synthesized From Cholesterol in the Adrenal Cortex by a Pathway That Is Independent of Cholesterol Side-Chain Cleavage[J].Hypertension,2000(36):442-448.

[18]沈衛(wèi)峰，張瑞巖，陸國(guó)平．心血管疾病新理論新技術(shù)[M].北京：人民軍醫(yī)出版社，2005．

[19]Bick RJ,Poindexter BJ,Sweney RR,et al.Effects of Chan Su,a traditional Chinese medicine,on the calcium transients of isolated cardiomyocytes:Cardiotoxicity due to more than Na,K-ATPase blocking[J].Life Sciences,2002,72:699-709.

[20]Bagrov AY,Fedorova OV.Cardenolide and bufadienolide ligands of the sodium pump.How they work together in Na-Cl sensitive hypertension[J].Frontiers in Bioscience,2005(10):2250-2256.

[21]厲旭云，陸 源，單綺嫻，等.華蟾素對(duì)大鼠胸主動(dòng)脈的縮血管作用及其機(jī)制[J].浙江大學(xué)學(xué)報(bào)，2006，35（2）：198－201．

[22]張 磊，劉曉輝，王雪超．華蟾毒精藥理作用研究進(jìn)展[J].武警醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào)，2008，17（10）：924－925．

R285.5

A

1673－9043（2012）03－0187-03

國(guó)家自然科學(xué)基金項(xiàng)目（30973935）。

300193 中醫(yī)藥管理局中藥藥理三級(jí)實(shí)驗(yàn)室

姜 艷（1985-），女，碩士研究生，主要從事中醫(yī)藥配伍減毒作用研究。

*通訊作者：王 怡。

2012-04-11）