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    匙唇蘭次生培養(yǎng)研究

    2012-01-05 00:43:40黃建民向極釬覃大吉曾凡忠李紅英鄒迎春
    關(guān)鍵詞:原球莖細(xì)胞分裂生長(zhǎng)素

    黃建民,向極釬,覃大吉,曾凡忠,李紅英,鄒迎春

    (1.恩施清江生物工程有限公司,湖北 恩施 445000;2.湖北省農(nóng)業(yè)科技創(chuàng)新中心鄂西綜合實(shí)驗(yàn)站,湖北 恩施 445000;3.湖北省恩施州農(nóng)業(yè)科學(xué)院,湖北 恩施 445000)

    匙唇蘭是一種來(lái)自于東印度、緬甸及泰國(guó)的重要的觀賞蘭花,在亞洲有近十個(gè)品種.Samuel Parish和Heinrich Gustav Reichenbach在1874年在《植物期刊》(Journal of Botany)上首次將它描述為Saccolabiumfragrans.1963年Gunnar Seidenfaden和Tem Smitinand在泰國(guó)將它更正為匙唇蘭[1-2].

    匙唇蘭是一種迷你型蘭花.莖長(zhǎng)大約1~3 cm,具有兩列深顏色且厚的葉片,每片葉大約2~3 cm長(zhǎng),1 cm寬.花序約2 cm長(zhǎng),生長(zhǎng)有15~25朵緊密的小花,具有香味,花并不會(huì)完全開(kāi)放,一般寬2 mm長(zhǎng)5 mm.花瓣基部近白色,外部淡粉紅色.淡粉紅色唇瓣基部長(zhǎng)有一大團(tuán)單一的半球型的硬結(jié)組織.其深厚的稠密的根緊緊地扎在基質(zhì)中.它是一種熱帶植物,所以不需要保持太高的濕度.苔蘚和蕨類(lèi)植物生產(chǎn)在其根的周?chē)?,它能忍受較干燥一點(diǎn)的環(huán)境[3-5].

    1 材料與方法

    1.1 原球莖來(lái)源

    原材料來(lái)源于泰國(guó)農(nóng)業(yè)大學(xué)Rapee中心蘭花園,花梗頂芽與側(cè)花在MS培養(yǎng)基24℃條件下培養(yǎng)6~10星期.

    1.2 培養(yǎng)基與培養(yǎng)方法

    用改良MS培養(yǎng)基(見(jiàn)表1)并附加糖,瓊脂以及不同濃度水平的細(xì)胞分裂素6-BA 和生長(zhǎng)素NAA. 6-BA有4個(gè)水平,分別是0, 0.5, 1.0, 2.0 mg·L-1; NAA有3個(gè)水平,分別是0, 0.5, 1.0 mg·L-1(見(jiàn)表2).

    表1 改良MS培養(yǎng)基各成分含量

    表2 各處理及細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量

    1.3 培養(yǎng)條件

    溫度:(23±2 )℃,光照:1 500-2 000 Lux, 濕度:80%~90%.

    2 結(jié)果

    1)不同濃度的細(xì)胞分裂素(6-BA)與生長(zhǎng)素(NAA)配比下原球莖的體積增長(zhǎng)率 (見(jiàn)表3);

    2)不同濃度的細(xì)胞分裂素(6-BA)與生長(zhǎng)素(NAA)配比下原球莖的芽誘導(dǎo)率(見(jiàn)表4) ;

    3)附加有新鮮椰乳汁與沒(méi)有附加新鮮椰乳汁的培養(yǎng)基的原球莖的體積增長(zhǎng)率與芽誘導(dǎo)率(見(jiàn)表5);

    4) 圖表來(lái)自于Minitab14.12統(tǒng)計(jì)分析軟件(表6,圖1~3).

    表3 不同濃度的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素配比下原球莖的體積增長(zhǎng)率

    表4 不同濃度的生長(zhǎng)素與細(xì)胞分裂素配比下原球莖的芽誘導(dǎo)率

    表5 附加有新鮮椰乳汁與沒(méi)有附加新鮮椰乳汁的培養(yǎng)基的原球莖的體積增長(zhǎng)率與芽誘導(dǎo)率

    本文獲得匙唇蘭原球莖增殖的可行性方法.完備了完整的匙唇蘭組織培養(yǎng).為了實(shí)現(xiàn)匙唇蘭的原球莖增殖,得到了適宜的細(xì)胞分裂素和生長(zhǎng)素種類(lèi)和含量.本文也闡述了不同含量的細(xì)胞分裂素6-BA和生長(zhǎng)素NAA在匙唇蘭原球莖增殖過(guò)程中的作用.第9號(hào)培養(yǎng)基是最佳的培養(yǎng)基配方,其含量是6-BA 2.0 mg·L-1和NAA 0.5 mg·L-1.新鮮的椰乳對(duì)于匙唇蘭的原球莖的次生培養(yǎng)有特殊的作用,相對(duì)于細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素而言,更能促進(jìn)原球莖的增殖與細(xì)莖的形成.用 Minitab14.12統(tǒng)計(jì)分析軟件進(jìn)行方差分析.結(jié)果(見(jiàn)圖2)表明,兩個(gè)因素,細(xì)胞分裂素6-BA和生長(zhǎng)素NAA的效應(yīng)與交互效應(yīng)都顯著[6-7].

    表6 方差分析表

    R-S=6.86509,R-Sq=90.10%,Sq(adj)=87.16%

    圖1 原球莖增殖圖

    圖2 原球莖增殖交互影響圖

    圖3 原球莖增殖效果圖

    3 結(jié)論

    1)添加6-BA有利于原球莖的增殖,添加NAA有利于芽的誘導(dǎo)形成;

    2)新鮮椰乳汁對(duì)于原球莖的增殖與芽的誘導(dǎo)具有強(qiáng)列的刺激作用;

    3)對(duì)于原球莖的增殖,最佳細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量是細(xì)胞分裂素6-BA為2.0 mg·L-1和生長(zhǎng)素NAA為0.5 mg·L-1;

    4)對(duì)于芽的誘導(dǎo),最佳細(xì)胞分裂素與生長(zhǎng)素含量是細(xì)胞分裂素6-BA為2.0 mg·L-1和生長(zhǎng)素NAA為1.0 mg·L-1;

    5)6-BA和NAA具有交互效應(yīng)抑制原球莖的增殖;

    6)分析結(jié)果表明,兩個(gè)因素(6-BA和NAA)效應(yīng)顯著;

    7)細(xì)胞分裂素6-BA比生長(zhǎng)素NAA有利于芽的增殖,但是生長(zhǎng)素NAA比細(xì)胞分裂素6-BA更有利于芽的誘導(dǎo).

    [1] Arditti,J.,F(xiàn)actors affecting the germination of orchid seeds Bot[J].Botany,1967,33:1-97.

    [2] Ball E A.Orchid seed germination and seedling culture[M].Cornell University Press,1982.

    [3] M.K.拉茲丹,肖尊安,祝揚(yáng).物組織培養(yǎng)導(dǎo)論[M].北京:化學(xué)工業(yè)出版社,2006.

    [4] 彭星元.植物組織培養(yǎng)技術(shù)[M].北京:高等教育出版社,2006.

    [5] 范成明.蘭花組織培養(yǎng)及分子生物學(xué)研究進(jìn)展[J].園藝學(xué)報(bào),2003(4):487-491.

    [6] 杜佳林.蘭花育種現(xiàn)狀及進(jìn)展[J].廣西熱帶農(nóng)業(yè),2009(5):32-35.

    [7] 王卜瓊.蘭花育種研究進(jìn)展[J].園藝學(xué)報(bào),2005(3):551-556.

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